天麻素對創傷性顱腦損傷模型谷氨酸及Ca2+、Mg2+含量的影響

王小亞 楊喜民 胡 斌 溫 煜 劉建新

解放軍第三醫院（721004）

天麻是傳統中藥配方的主要成分，在中藥領域廣泛應用。天麻素由天麻提取，目前在臨床上應用非常廣泛。近年來的藥理學研究證明，天麻素具有增加腦血管血流量、改善腦供血不足，亦可用于鎮靜、安神等作用[1]。但有關天麻素用作顱腦損傷后的治療的臨床及實驗研究報道甚少。本研究制作了標準的液壓顱腦損傷大鼠的創傷性顱腦損傷（TBI）模型，通過觀察天麻素對腦組織內興奮性氨基酸（以谷氨酸為代表）及鈣、鎂離子的變化，探討天麻素對TBI后的腦組織的保護作用，為天麻素用于臨床治療研究提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 實驗動物分組

SD大鼠（由第四軍醫大學實驗動物中心提供）60只，雌雄不拘，體質量200～280g，采用隨機數字表法分為空白組、對照組和天麻素組，每組20只。

1.2 大鼠TBI模型的建立

采用液壓顱腦損傷儀制備中重度TBI模型。將對照組和天麻素組大鼠以2.5%戊巴比妥鈉按30mg/kg劑量進行腹腔注射麻醉。將大鼠頭部固定于動物立體定位儀上，頭頂剪毛，常規消毒后，沿正中線切開頭皮約4cm，暴露雙側頂骨，在人字縫前2mm，中線左側2mm處頂骨鉆孔，擴大骨窗直徑約2.5mm，暴露硬腦膜。將液壓顱腦損傷儀的外置打擊管固定于骨窗，骨蠟封閉周圍縫隙，縫合頭皮。調整液壓顱腦損傷儀打擊強度為30atm，制成TBI模型。造模后小心拔除外置打擊管，3%雙氧水消毒傷口，電暖氣保持體溫。空白組只切開頭皮30min后縫合，不損傷腦組織。待清醒后常規籠養。

1.3 天麻素干預

用5%葡萄糖注射液將天麻素干粉（悅康藥業集團有限公司，批準文號：國藥準字H20058138）溶解稀釋。于造模后24h、48h和72h，給天麻素組大鼠經尾靜脈注射天麻素溶液各1次，注射劑量0.1g/kg體質量。空白組和對照組于相同時間點給予5mL/kg的生5%葡萄糖注射液。正常籠養。

1.4 腦組織Ca2+、Mg2+、GLU含量測定

各組大鼠于造模后7d處死，取出腦組織100mg，研磨制備勻漿，用高效氨基酸分析儀測定GLU含量，在日立7180型全自動生化分析儀測定Ca2+、Mg2+含量。。

1.5 統計學處理

2 結 果

對照組、天麻素組大鼠各有2只于術后12h內因出血過多而死亡，其余均存存活良好，進入下一步實驗。

對3組大鼠腦組織GLU、Ca2+、Mg2+檢測結果顯示，天麻素組、對照組GLU、Ca2+含量顯著高于空白組（P＜0.05），Mg2+含量顯著低于空白組（P＜0.05）。天麻素組GLU、Ca2+含量顯著低于對照組（P＜0.05），Mg2+含量顯著高于對照組（P＜0.05），見表1。

表1 3組大鼠腦組織Glu、Ca2+和Mg2+含量

3 討 論

自天麻素成功提取并研制出注射制劑后，其臨床應用范圍進一步得到擴展。近年來，應用天麻素治療椎-基底動脈供血不足、眩暈、偏頭痛、腦卒中乃至情感性精神障礙等的研究取得很大進展。如任劍鋒等[2]對75例眩暈癥患者聯合應用葛根素和天麻素進行了治療研究。以10天為1個療程，結果顯示在1個療程結束后，總有效率達96%。認為聯合應用葛根素與天麻素治療眩暈療效肯定。孫玉芝等[3]研究了天麻素穴位注射雙足三里治療椎-基底動脈供血不足性眩暈。觀察治療前后癥狀、血流動力學指標結果變化。結果顯示總有效率為96. 67 %，認為天麻素穴位注射對椎基底動脈供血不足性眩暈療效確切。景富春等[4]觀察天麻素治療伴焦慮抑郁癥狀功能性消化不良的療效，以4周為一個療程。結果顯示總有效率為 91.9%。認為天麻素對伴焦慮抑郁癥狀的功能性消化不良患者具有較好療效。代春靖等[5]觀察了天麻素和甘露醇聯合治療重度偏頭痛的臨床療效。結果顯示以天麻素與甘露醇聯合用藥組的總有效率達96.7%。認為天麻素聯合甘露醇治療重度偏頭痛效果顯著。張洪等[6]觀察了天麻素注射液治療62例急性腦梗死的臨床療效。結果顯示天麻素用于急性腦梗死的總有效率為87.1%，優于對照組（70.7%）。認為應用天麻素注射液可促進急性腦梗死患者神經缺損功能的恢復，改善患者的生活質量。

在TBI后繼發性腦損傷的形成機制中，Ca2+、相關興奮性氨基酸在細胞內外的失衡起重要作用，研究顯示凡能阻止鈣離子的細胞內超載、阻止神經遞質特別是谷氨酸及相關興奮性氨基酸釋放的藥物，都可能減輕腦損傷的進展。在本研究中，TBI后的大鼠，其腦組織內Ca2+、GLU含量均顯著高于空白組，而經尾靜脈注射天麻素后，模型大鼠腦組織內GLU及Ca2+含量顯著降低。說明天麻素可能通過調節細胞內外Ca2+及興奮性氨基酸等神經遞質的平衡而起到腦保護作用。Mg2+是目前較為確定的內源性腦保護因子，它具有穩定細胞內DNA，RNA和核糖體的作用，是天然的鈣拮抗劑，鎂是N-甲基-D天門冬氨酸（NMDA）受體的非競爭性拮抗劑，通過阻止NMDA受體的離子通道而抑制鈣進入細胞，從而起到腦保護作用，它還通過Mg2+-Ca2+促使細胞內過多的鈣離子外流，防止細胞內鈣超載，維持細胞膜上Na+-K+-ATP酶的活性，保持正常的Na+-K+交換，防止細胞水腫[7]。本實驗結果顯示給予TBI模型大鼠天麻素處理后可以抑制損傷灶內鎂離子含量的下降。說明天麻素有可能通過調節腦細胞內外Mg2+濃度的平衡而發揮細胞保護作用。

[1]羅海,孫中吉.天麻素的基礎藥理研究和臨床應用[J].武警醫學院學報,2007,16(4)：465-468.

[2]任劍鋒,馬來,劉宏等.聯合應用葛根素與天麻素治療眩暈75例[J].中國民族民間醫藥,2010,5 (5)：151.

[3]孫玉芝,陳黨紅,安暢等.天麻素穴位注射治療椎—基底動脈供血不足性眩暈60例臨床觀察[J].中成藥,2010,32(9)：1476-1478.

[4]景富春,郭靜賢,譚勇.天麻素治療伴焦慮抑郁癥狀功能性消化不良的療效觀察[J].中國臨床藥理學與治療學,2010,15( 8)：924-926.

[5]代春靖,劉齊.天麻素聯合甘露醇治療重度偏頭痛的療效[J].中國醫藥指南,2010,8(7)：60-61.

[6]張洪,周敏,周平.天麻素注射液治療急性腦梗死的臨床研究[J].中國中西醫結合心腦血管病雜志,2010,8(4)：427-429.

[7]張迅,李拴德,毛小林等.硫酸鎂對大鼠急性顱腦損傷后白介素-1?表達的影響[J].中華急癥醫學雜志,2001,10(2)：82-84.