克乳痛膠囊揮發性成分包結工藝研究

蔣建春

克乳痛膠囊揮發性成分包結工藝研究

蔣建春

目的考察克乳痛膠囊中丹皮酚及蛇床子揮發油的最佳提取工藝和環糊精最佳包合工藝。方法比較飽和溶液合并超聲法和研磨法兩種不同揮發油包結方法及其他包結條件，以揮發性成分與β-環糊精之比、包合時間、包合溫度作為考察因素，用正交試驗考察最佳包合工藝，以包合物收得率和揮發油包合率作為評價包合工藝的指標。結果通過比較采用研磨法制備包合物，最佳包合工藝為：揮發油加及丹皮酚加4倍量β-環糊精及適量水，40℃研磨包合6h。結論該方法包合物的平均得率為90.8%，平均包結率為75.5%，表明該工藝基本可行。

丹皮酚；蛇床子；揮發油；包合技術；正交試驗

克乳痛膠囊由江蘇省中醫院許芝銀教授根據多年的臨床實踐，按照中醫理論中關于乳癖的發病機制和西醫體系中乳腺增生病的學說，從補益肝腎、調攝沖任為主，行淤化痰、散結止痛為輔的治療方法入手，自擬處方而成。原方曾為醫院制劑，經藥效學篩選，最終確定處方組成為鹿角片、蛇床子、何首烏、丹皮、赤芍、郁金、昆布、牡蠣。其藥材來源均符合藥典標準。本試驗進行丹皮酚及揮發油β-環糊精包合物的制備研究，應用包結技術可穩定丹皮酚及蛇床子揮發油，提高克乳痛膠囊的穩定性，實驗探討了飽和溶液合并超聲法及研磨法這兩種不同方法及其包結條件對包結物得率及包結率的影響，從而得出最佳工藝，并進行3批驗證試驗，確定該工藝的可行性。

1 丹皮酚、蛇床子揮發油的提取[1]

1.1 丹皮酚的提取

取牡丹皮藥材200g，水蒸氣蒸餾，收集藥材量10倍的蒸餾液，冷藏48h，濾過，得丹皮酚結晶。

1.2 蛇床子揮發油的提取

分別稱取蛇床子200g，郁金200g，加6倍量的水，浸泡2.0h，水蒸氣蒸餾6h，冷卻，收集揮發油。

2 丹皮酚及蛇床子揮發油的包結工藝研究[2-5]

2.1 試驗儀器及試劑

β- CD（安徽山河藥用輔料有限公司，純度99.2%）；揮發油提取器 （南京鑾玉化玻儀器有限公司）；磁力加熱攪拌器（江蘇金壇市大地自動儀器廠）；HT系列臺式數控超聲波清洗機（山東濟寧恒通超聲電子設備公司）；JM系列膠體磨（廊坊通用機械制造有限公司）；無水硫酸鈉、無水乙醇均為分析純。

2.2 方法與結果

2.2.1 飽和溶液合并超聲法

2.2.1.1 實驗方法

采用正交試驗法，按表1、表2對應的因素水平進行試驗。每份樣品精密取蛇床子揮發油1mL、丹皮酚0.6g，加2倍量無水乙醇溶解，分次加入β-環糊精飽和水溶液中，邊加邊超聲相應的時間，取出，冷藏48h，濾過，濾渣用少量無水乙醇洗滌后于40℃真空干燥[1]，即得。

2.2.1.2 評價指標[6]

包合物得率：按下式計算

包結率的測定：參照《中國藥典》2000年一部牡丹皮項下丹皮酚含量測定方法測定包合前與包合后丹皮酚的含量，按下式計算

2.2.1.3 因素水平的選擇

根據文獻[7]，認為揮發油和β-環糊精的比例、包合時間、包合溫度為主要因素，根據實際條件分別對每個因素設計出5個水平，進行單因素試驗，以優選3個水平。篩選出的試驗因素水平結果見表1。

表1 因素水平表

2.2.1.4 正交試驗安排及結果[8,9]

見表2～表4。

表2 L9（34）正交試驗表

表3 包合物得率方差分析表

表4 丹皮酚包結率方差分析表

2.2.1.5 結論

方差分析表明，3個因素不同水平之間未見顯著性差異，比較不同因素的極差R，其影響程度大小為B＞C＞A，再結合各因素不同水平之間Ki值，確定最佳的包合工藝為A1B3C2。即揮發油加8倍量β-環糊精所制成的飽和溶液，40℃超聲包合1.5h的包結工藝最佳。

2.2.2 研磨法

2.2.2.1 實驗方法

采用正交試驗法，優選研磨法最佳工藝條件，按表5、表6對應的因素水平進行試驗。每份樣品精密取蛇床子揮發油1mL、丹皮酚0.6g，加2倍量無水乙醇溶解，分次加入β-環糊精飽和水溶液中，邊加邊研磨相應的時間，取出，冷藏48h，濾過，濾渣用少量無水乙醇洗滌后于40℃真空干燥，即得。

2.2.2.2 評價指標

同2.2.1.2項下評價指標。

2.2.2.3 因素水平的選擇

根據文獻[10]，認為揮發油和β-環糊精的比例、包合時間、包合溫度為主要因素，根據實際條件分別對每個因素設計出5個水平，進行單因素試驗，以優選3個水平。篩選出的試驗因素水平結果見表5。

表5 因素水平表

2.2.2.4 正交試驗安排及結果[8,9]

見表6～表7。

2.2.2.5 結論

包結率方差分析結果表明，3個因素不同水平之間未見顯著性差異，比較不同因素的極差R，其影響程度大小為B＞C＞A，再結合各因素不同水平之間Ki值，同時考慮包合物的得率，確定最佳的包合工藝為A2B3C2。即揮發油及丹皮酚加4倍量β-環糊精及適量水，40℃研磨包合6h的包結工藝最佳[6]。

表6 L9（34）正交試驗表

表7 包合物得率方差分析表

表8 丹皮酚包結率方差分析表

2.3 超聲法與研磨法對包結物得率及包結率影響的比較

2.3.1 超聲法最佳包合工藝

精密取蛇床子揮發油1mL、丹皮酚0.6g，加2倍量無水乙醇溶解，分次加入β-環糊精（12.8g）飽和水溶液之中，邊加邊超聲，超聲時間1.5h，包合溫度40℃取出，冷藏48h，濾過，濾渣用少量無水乙醇洗滌后于40℃，真空干燥，即得。

2.3.2 研磨法最佳包合工藝

精密取蛇床子揮發油1mL、丹皮酚0.6g，加2倍量無水乙醇溶解，分次加入β-環糊精（6.4g）飽和水溶液之中，邊加邊研磨，研磨時間6h，包合溫度40℃，取出，冷藏48h，濾過，濾渣用少量無水乙醇洗滌后于40℃真空干燥，即得。

2.3.3 結果

見表9。

表9 超聲法及研磨法最佳包合工藝

結論：根據以上結果可見研磨法制備包合物優于飽和溶液合并超聲法，再考慮到飽和溶液合并超聲法制備丹皮酚與蛇床子揮發油β-環糊精包合物所用β-環糊精量較大，且目前尚缺乏適應生產的超聲設備，故選擇研磨法制備包合物，以降低β-環糊精的用量。

2.4 驗證試驗

取丹皮酚結晶1.0g，加2倍量無水乙醇溶解后與揮發油1.5mL混勻，分次加入丹皮酚與揮發油總量4倍量的β-環糊精混懸液研勻，40℃研磨6h，所得糊狀物與40℃真空干燥24h，無水乙醇洗滌，干燥的包合物，分別按上法測定包合物得率及丹皮酚的包結率。平行試驗3份，結果見表10。

表10 丹皮酚等β-環糊精包合物制備工藝

該包合物的平均得率為90.8%，平均包結率為75.5%，表明該工藝基本可行。

3 討 論[10,11]

由于實驗所得研磨法制備包合物優于飽和溶液合并超聲法，且飽和溶液合并超聲法制備丹皮酚與蛇床子揮發油β-環糊精包合物所用β-環糊精量較大，且目前超聲設備限制，故選擇研磨法制備包合物，以降低β-環糊精的用量根據。 通過正交試驗篩選出最佳包合工藝，揮發油加及丹皮酚加4倍量β-環糊精及適量水，40℃研磨包合6h。驗證實驗表明本工藝質量穩定，基本可行。

[1] 林桂濤,徐淑國.β-環糊精包封中藥揮發油新方法的探討[J].中國中藥雜志,1992,17(5):283-285.

[2] 劉樹芬,楊曉紅,李曉紅等.蒼木揮發油-β-環糊精包合物的研究[J].中國藥學雜志,1992,27 (11):658-660.

[3] 劉友平,秦春梅,鄢丹.β-環糊精包合物包合物在中藥學領域中的應用進展[J].中草藥,2003,34(7):附4-附7.

[4] 張霄岳,常樹春,畢研更.本草蒜素液β-環糊精包合物的制備[J].中成藥,2001,23(9):634.

[5] 李正翔,任榮.丹皮酚β-環糊精包合物的制備[J].中國藥學雜志, 2004,39(4):305.

[6] 邱嬌英,張慧芳.八角茴香揮發油的提取與β-環糊精包合工藝研究[J].云南中醫中藥雜志,2008,29(6):50.

[7] 富志軍,周志新.膠體磨應用于肉桂油-β-環糊精包合物制備工藝條件的實驗篩選[J].中成藥,1994,16(12):6-7.

[8] 李慧,邊寶林,孟繁蘊等.正交試驗法優選川芎、當歸揮發油的β-環糊精包合工藝[J].廣州中醫藥大學學報,2005,22(6):471-472.

[9] 錢士輝,袁麗紅.正交設計法優選當歸等揮發油β-環糊精的包合工藝[J].中藥材,1999,22(6):309-400.

[10] 李琰,王鳳林,孫秀華.采用加速試驗法考察揮發油經β-CD包合前后的穩定性[J].中國中藥雜志,2005,30(4):305.

[11] 呂鵬.β-環糊精在中藥新技術研究中的應用[J].天津藥學,2003, 15(6):4.

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