減肥類中成藥、保健食品和食品中非法添加鹽酸西布曲明的檢測

楊文紅 黃奕濱 黃諾嘉

廣東省汕頭市藥品檢驗所（515041）

近幾年，肥胖已經(jīng)成為影響最大的全球成年人疾病，可誘發(fā)或加重糖尿病、脂肪肝、心腦血管系統(tǒng)疾病等，越來越引起人們的重視。由于受“中藥治本，西藥治標”、“中藥沒有不良反應，西藥不良反應大”等傳統(tǒng)觀念的影響，使許多人比較愿意使用減肥類中成藥或保健食品。但中成藥或保健食品起效緩慢，不法商家便在減肥類中成藥、保健食品和食品中非法添加鹽酸西布曲明（sibturamine hydrochloride，STH）等化學藥品提升自己產(chǎn)品的功效，以此牟取暴利。消費者在不知情的情況下服用了含有該成分的減肥保健食品，有可能產(chǎn)生嚴重的后果，嚴重危害消費者的身體健康。

為了有效打擊這種制假摻偽的不法行為，本文參考有關文獻[1]，建立減肥類中成藥、保健食品和食品中非法添加STH的檢測方法，并據(jù)此檢測25批市售的中成藥、保健食品和食品中是否摻入了STH。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

島津LC-10ATvp型高效液相色譜儀（包括自動進樣器、柱溫箱、二極管陣列檢測器）；超聲波清洗器[KUDOS SK 250 LHC型（300W、50kHz）]。

1.2 試藥

STH對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：100624-200401，供含量測定用）；

25批樣品均為市售品；甲醇為色譜純：水為超純水；其他試劑為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適應性試驗

以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀（55∶45，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0±0.1）為流動相；檢測波長為223nm；DAD：190～400nm；柱溫：40℃。理論板數(shù)按鹽酸西布曲明計算應不低于2000。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥24h的鹽酸西布曲明對照品適量，精密稱定，加乙醇制成每1mL含0.1mg的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備

若供試品為片劑，研細，精密稱定約1片量；若供試品為膠囊劑，取出內(nèi)容物研細，精密稱定約1粒量；若為顆粒劑、袋泡茶等固體制劑，研磨粉碎，精密稱定約1/2包量；若供試品為口服液，量取1/2次服用量；分別置100mL量瓶中，加乙醇適量，超聲處理2min，放冷至室溫，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.4 測定法

分別精密吸取照品溶液與供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，測定，即得。

2.5 結果判斷

供試品色譜中不得呈現(xiàn)與對照品保留時間一致的色譜峰。如出現(xiàn)與對照品保留時間一致的色譜峰，則應采用二極管陣列檢測器進行檢測，若該色譜峰與對照品的紫外吸收光譜相同，則可判斷含有鹽酸西布曲明。

2.6 測定結果

照上述色譜條件進行測定，25批樣品中的17批陽性樣品色譜在與對照品相應位置上均有相同的色譜峰，且STH與與相鄰峰分離度＞1.5，所有8批陰性樣品色譜中在與對照品相應處無干擾峰，見圖1。

2.7 線性關系考察

精密吸取對照品溶液（濃度0.1015μg/μL）2、4、6、8、10、12、14、16μL（采用自動進樣器），注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以對照品進樣量（μg）為橫坐標，以與其相應的峰面積為縱坐標，求得STH的回歸方程為：

結果表明，西布曲明進樣量在0.203～1.624μg 范圍內(nèi)與峰面積具有良好的線性關系。

2.8 精密度試驗

2.8.1 進樣重復性

取含量測定項下的對照品溶液連續(xù)進樣6次，峰面積的RSD為0.34%（n=6）。

2.8.2 重復性試驗

取同一批號的樣品6份，依法制備供試品溶液，測定，平均含量為35.78（mg/g），RSD%為1.49%（n=6）。

2.8.3 穩(wěn)定性試驗

取同一份供試品溶液（批號為060501），在不同時間0、0.5、24、30、42h分別進樣，結果表明在42h內(nèi)所得的峰面積穩(wěn)定，峰面積RSD為1.48%（n=6）。

2.8.4 加樣回收率試驗

精密稱取已知含量樣品共6份，以當前取樣含量的1∶1，分別精密加入對照品溶液（5.084mg/mL）1mL，按樣品測定項下制備供回收用的供試品溶液，依法測定，即得。回收測定結果見表1。

2.9 樣品含量測定

圖1 HPLC色譜圖

17批陽性樣品依法測定，以外標法計算含量，結果見表2。

3 討 論

3.1 若對照品溶液與供試品溶液濃度過濃，可導致峰形差，分離效果差，其匹配率下降，常造成結果誤差。若二者濃度比例相差過大，則用乙醇稀釋，使對照品溶液與供試品溶液二者濃度相當，以減少測定誤差。

表1 加樣回收率試驗

表2 17批陽性樣品中西布曲明含量測定結果

3.2 干擾峰的排除

①如果對照品色譜峰保留時間與供試品目標成分色譜峰保留時間有差異，但差異又不大時，可用標準加入法判斷可疑峰是否為干擾峰。即將對照品溶液與供試品溶液按1∶1比例混合進樣，并與未加入對照品溶液的供試品溶液的液相圖譜比較。②如果供試品色譜峰在與對照品保留時間相同處有小峰，經(jīng)計算折合為每次服用量，如少于起效劑量10mg的1/10（即1.0mg/次），則判斷該小峰為干擾峰，結論為未檢出鹽酸西布曲明。

[1]鄭國鋼,方宇謹,杜加秋等. RP-HPLC法測定鹽酸西布曲明片的含量[J].西北藥學雜志,2001,16(5)：195-196.