胡桃楸樹皮及其果皮超臨界CO2萃取物的GC-MS分析

王蓮萍* 趙昱瑋 張蓮珠 呂雪峰 南敏倫 趙全成

1 吉林天藥現(xiàn)代中藥科技有限公司（130012）

2 長春中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院實驗中心（130012）

3 松原市食品藥品檢驗所（138000）

4 吉林省中醫(yī)藥科學研究院（130012）

胡桃楸（Juglans mandshurica Maxim.）為胡桃科胡桃屬植物，別名核桃楸，廣泛分布于我國東北、華北、華東地區(qū)。胡桃楸樹皮、羽狀復葉、果實及果實外果皮都有很高的藥用價值[1]，胡桃楸樹皮簡稱楸樹皮，其味苦、辛，性寒，有清熱解毒、抗菌消炎和明目等功效[2]。臨床用于治療腸炎、細菌性痢疾、骨結(jié)核、麥粒腫等疾病[1]，也有治療癌癥的報道[2-4]，胡桃楸青果皮系胡桃科植物核桃楸未成熟果實的果皮。性平味辛，用于治療胃、腹痛、水痢、痛腫毒瘡及皮膚洗瘡、癌癥等[5,6]。

目前對二者揮發(fā)性成分的研究較少，本文對二者SFE-CO2萃取物成分進行分析鑒定，并比較成分間差異。

1 儀器與材料

HA221-50-06型超臨界流體萃取裝置（江蘇，南通華安超臨界萃取有限公司）；HP6890-5973型氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國Agilent科技有限公司）；胡桃楸樹皮（采自吉林省長白山），粉碎過20目備用；He（純度99.999%）、CO2（純度99.9%）均由長春市光機氣體有限公司提供；乙醚、乙酸乙酯（分析純，北京北化精細化學品有限公司）。

2 方 法

2.1 超臨界流體萃取

分別取胡桃楸樹皮及果皮粗粉200g，加入1kg萃取釜，對超臨界萃取系統(tǒng)加熱，達到預定溫度時，將壓力達到預定壓力，先靜態(tài)萃取30min，后動態(tài)萃取90min，從出口閥接物料，獲得萃取物，萃取條件見表1。

表1 胡桃楸樹皮超臨界CO2流體萃取條件

2.2 GC-MS分析測試條件

美國HP6890A-5973氣相色譜質(zhì)譜儀聯(lián)用儀，G1701BA化學工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。參考文獻[3]中方法結(jié)合預實驗結(jié)果，確定方法為HP-1（30m×0.25mm，0.25μm） 彈性石英毛細管柱；載氣為高純氦氣，載氣流量1.0mL/min；進樣口溫度280 ℃；分流比50∶1；升溫程序：起始柱溫60℃，維持3min，再以6℃/min升溫至300℃；離子源為EI源，離子源溫度200℃；接口溫度280℃；電離電壓70eV；發(fā)射電流34.6A；掃描范圍m/z20～500，掃描速度2000amu/s。

圖1 胡桃楸樹皮超臨界萃取物GC-MS分析的總離子圖

圖2 胡桃楸果皮超臨界萃取物GC-MS分析的總離子圖

表2 胡桃楸樹皮及果皮超臨界萃取物中相同成分

表3 胡桃楸樹皮及果皮超臨界萃取物中不同成分

2.3 供試樣品的制備

分別取樹皮及果皮超臨界萃取物10mL加水20mL稀釋，乙醚萃取3次，每次30mL，合并乙醚層，水反洗3次，每次100mL，乙醚層加2g無水硫酸鈉脫水，乙醚層至蒸發(fā)皿中揮干，分別稱取50mg，加乙酸乙酯1mL溶解，0.45μm濾膜濾過，得供試品。

3 結(jié)果與討論

3.1 實驗結(jié)果

將供試品進行GC-MS分析，總離子流圖如圖1及圖2所示，在NIST1998.L資料庫支持下并查閱有關文獻資料，確定成分及相對含量，并比較其異同，如表2、3所示。

4 討 論

胡桃楸是我國重要的藥源植物，其樹皮和果皮為其重要的藥用部位，樹皮具有清熱解毒、抗菌消炎和明目的作用，而果皮則因清熱解毒、祛風療癬、止痛止痢功效入藥，二者功效有所不同?，F(xiàn)有文獻多針對二者的乙酸乙酯及氯仿等高極性萃取部位，對其揮發(fā)性部位鮮有報道。故本次實驗對其超臨界CO2流體萃取物進行GC-MS分析，比較成分異同。結(jié)果表明兩個藥用部位的低極性化學成分組成差異較大，為其不同的功效提供一定的物質(zhì)依據(jù)。

[1]吉林省中醫(yī)中藥研究所,長白山自然保護區(qū),東北師范大學生物系.長白山植物藥志[M].長春：吉林人民出版社,1982：203-205.

[2]李敬芬,王建農(nóng),谷艷玲等.核桃楸樹皮化學成分的研究[J].佳木斯醫(yī)學院學報,1994,17(6)：1-3.

[3]郭建華,崔黎明,李淑紅等.胡桃楸提取物對S180肉瘤的抑制作用及機制[J].林大學學報(醫(yī)學版),2007,33(2)： 286-289.

[4]潘麗艷,郭喜平,李淑紅等.胡桃楸樹皮提取物對SMMC-7721、MCF-7和A549腫瘤細胞的抑制作用及其機制[J].吉林大學學報(醫(yī)學版) 2009,35(1)： 124-127.

[5]《全國中草藥匯編》編寫組.全國中草藥匯編(上冊) [M].北京：人民衛(wèi)生出版社,1975：58.

[6]江蘇新醫(yī)學院.中藥大辭典(下冊) [M].上海科技出版社,1986：1793.