羚角降壓方對高血壓肝陽上亢證大鼠證侯影響的拆方研究

呂圭源，陳素紅，陳 寧，吳海峰，湯小華

(1.浙江中醫藥大學，浙江 杭州 310053;2.溫州醫學院，浙江 溫州 325035)

羚角降壓方為平息內風，平肝潛陽之方，對高血壓肝陽上亢證療效確切。但其服用量大，攜帶不便，醫從性低，限制了推廣應用。如果能在保證其藥效的基礎上，精簡方劑，對中藥現代化具有積極的意義。本文在前期開展“羚角降壓方、天麻鉤藤方與高血壓肝陽上亢證得方證相應性研究”［1］及“羚角降壓方及其拆方對血管調節因子的影響”［2］的基礎上，就羚角降壓方及其拆方進行進一步的藥效學研究，篩選最佳精簡組方。

1 材料與方法

1.1 造模藥 附子湯為附子(090702，四川)、肉桂(030127，廣西)、干姜(090606，浙江)按1∶1∶1比例制成的水提液，濃度為1 g·ml-1。以上各味藥材經鑒定，符合05年版《中華人民共和國藥典》。麻黃堿，純度99%(解放軍第八醫院提供)。

1.2 受試藥 羚角降壓方全方，由羚羊角粉(071222，新疆)8.6 g、黃芩(071222，內蒙古)186 g、槲寄生(091009，山東)582 g、夏枯草(081119，浙江)582 g組成(濃縮為含生藥0.220 g·ml-1);羚角 -夏枯 -槲寄(含生藥 0.190 g·ml-1);羚角-夏枯-黃芩，濃縮為含生藥0.125 g·ml-1;羚角-槲寄(含生藥0.100 g·ml-1);夏枯 -黃芩(含生藥0.125 g·ml-1);單味羚角(含生藥0.001 4 g·ml-1)。以上各味藥材均購自浙江中醫藥大學飲片廠。經鑒定，符合05年版《中華人民共和國藥典》標準。

1.3 動物 SD大鼠80只，♂ 180～220 g，清潔級，由浙江省實驗動物中心提供，合格證號SCXK(浙)20080033。

1.4 儀器 CODA多通道無創傷大鼠尾動脈血壓儀，美國Kent Scienfic公司;YLS-1多功能大鼠自主活動記錄儀、YLS-13A大小鼠抓力測定儀，山東省醫學科學院設備供應維修站;8877紅外線非接觸式額溫量測器，北京東方海匯電子技術有限責任公司;LP123電子天平，常熟市衡器廠

1.5 方法

1.5.1 造模與給藥 SD大鼠80只，隨機分成8組:正常對照組、模型對照組、羚角降壓方(LJP，2.20 g·kg-1)組、羚角-夏枯-槲寄(LJPS，1.90 g·kg-1)組、羚角 -夏枯 -黃芩(LJPM，1.25 g·kg-1)組、羚角 - 槲寄(M-S，1.00 g·kg-1)組、夏草 - 黃芩(P-S，1.25 g·kg-1)、羚角(STL，0.014 g·kg-1)，每組10只。每天ig濃度為1 g·ml-1的復方附子湯(含麻黃堿，第1周3.25 mg·ml-1;2～4周 5 g·L-1)，ig容積均為1 ml/100 g，并自由飲用1%鹽水。同時，各受試藥組ig對應藥液，正常與模型對照組給予蒸餾水，ig容積為1 ml/100 g，持續 4 wk。

1.5.2 測定指標 給藥后每14 d觀察大鼠一般體征(性情變化，以分級統計，Ⅰ級為喜跳躍，Ⅱ級為系抓鐵籠，Ⅲ級為Ⅱ基礎上咬人、咬鐵籠［1］)。給藥每7 d測定自主活動、抓力、面部溫度、血壓(抓力:持抓大鼠尾根處，置于儀器上，選用大鼠抓力用的抓力板進行測定，預適應測定一次，記錄第二次測定值。面部溫度:將大鼠抓起，將紅外測溫計測試孔緊貼大鼠嘴角和耳朵之間的臉頰部測量。測3次，取平均值。血壓:室溫30℃下測定。將大鼠置于固定器中，于尾根處套上加壓裝置與脈搏檢測裝置，加壓。采集數據前預適應5 min，測壓并采集數據。)

2 結果

2.1 一般體征 正常大鼠皮毛干爽光滑，活潑、易動、精神狀態良好，模型大鼠毛發干枯、無光澤，尖叫、易怒、不易抓取、同籠打斗、撕咬;各組方藥均可潤澤模型大鼠毛色，改善躁狂癥狀。見Tab 1。

Tab 1 observation on the normal symptoms of ganyangshangkang rats(n=10)

2.2 自主活動 全方、羚角-夏枯-槲寄、羚角 -夏枯-黃芩可降低自主活動次數，說明羚角-夏枯配伍槲寄生或黃芩均能緩解“躁動不安”;羚羊角單用或全方缺羚羊角、夏枯-黃芩均不能將其改善。所以羚羊角與夏枯草相須為用，可改善其“躁動不安”。見Tab 2。

2.3 抓力 全方、羚角-槲寄-夏枯、羚角-槲寄和單味羚角可使模型大鼠抓力明顯增大，說明與槲寄生配伍的方劑可改善“腰膝酸軟”，可能與槲寄生補肝腎、強筋骨有關。見Tab 3。

Tab 2Effect on locomotor activity of ganyangshangkang rats(±s，n=10)

Tab 2Effect on locomotor activity of ganyangshangkang rats(±s，n=10)

△P＜0.05 vs normal;*P＜0.05，＊＊P＜0.01 vs model

Compounds Dosage/g·kg-1 Locomotor activity/times 7 d 14 d 21 d 28 d normal - 109.8±26.4 123.8±18.7 122.9±18.5 130.0±35.1 model - 121.3±27.5 148.5±33.3△ 150.3±29.2△ 146.4±25.1 LJP 2.20 109.8±25.6 122.4±24.2* 105.1±33.5＊＊ 111.8±40.2*LJPS 1.90 105.3±27.3 117.1±37.5* 112.0±29.2＊＊ 104.5±27.5＊＊LJPM 1.25 105.6±19.6 115.6±36.1* 127.0±33.0 124.3±36.0 M-S 1.00 108.2±24.1 137.1±33.9 123.8±34.8 132.7±56.5 P-S 1.25 111.0±27.7 122.8±26.1 129.8±22.8 122.3±40.7 STL 0.014 104.3±22.2 132.1±27.1 123.8±41.8 118.7±38.5

Tab 3 Effect on grip strength of ganyangshangkang rats( ±s，n=10)

Tab 3 Effect on grip strength of ganyangshangkang rats( ±s，n=10)

△P＜0.05 vs normal;*P＜0.05，＊＊P＜0.01 vs model

Compounds Dosage/g·kg-1 Grip strength/g 7 d 14 d 21 d 28 d Normal - 1418.5±144.8 1763.9±146.5 1811.6±201.0 1869.7±179.1 Model - 1296.1±130.3 1901.6±157.0△ 1800.1±211.2 1793.6±156.2△LJP 2.20 1352.4±114.9 1916.6±67.3 1855.8±138.7 1904.8±93.5*LJPS 1.90 1381.7±122.4 1825.3±173.3 1914.7±79.6 1975.3±57.8＊＊LJPM 1.25 1352.1±215.7 1877.0±149.3 1937.6±148.6 1863.7±146.5 M-S 1.00 1362.2±77.9 1788.9±183.0 1919.3±111.8 1989.3±45.3＊＊P-S 1.25 1396.6±180.9 1869.6±174.2 1917.8±96.1 1867.3±108.2 STL 0.014 1384.4±141.3 1828.3±167.6 1868.2±125.0 1926.3±81.2*

Tab 4Effect on facial temperature of ganyangshangkang rats(±s，n=10)

Tab 4Effect on facial temperature of ganyangshangkang rats(±s，n=10)

△P＜0.05 vs normal;*P＜0.05，＊＊P＜0.01 vs model

Compounds Dosage/g·kg-1 Facial temperature/℃7 d 14 d 21 d 28 d Normal - 35.03±0.30 35.23±0.49 35.27±0.51 35.40±0.28 Model - 35.10±0.49 35.31±0.53 35.73±0.37△ 35.72±0.30△LJP 2.20 35.26±0.34 35.32±0.53 35.41±0.35* 35.37±0.21＊＊LJPS 1.90 35.17±0.30 35.42±0.32 35.40±0.53 35.34±0.18＊＊LJPM 1.25 34.91±0.47 35.23±0.44 35.43±0.25* 35.36±0.35*M-S 1.00 34.87±0.42 35.58±0.39 35.11±0.15＊＊ 35.38±0.35*P-S 1.25 35.44±0.19 35.62±0.22 34.88±0.38＊＊ 35.53±0.49 STL 0.014 35.14±0.47 35.54±0.23 35.04±0.42＊＊ 35.28±0.36＊＊

Tab 5Effect on systolic pressure of ganyangshangkang rats(±s，n=10)

Tab 5Effect on systolic pressure of ganyangshangkang rats(±s，n=10)

△P＜0.05 vs normal;*P＜0.05 vs model

Compounds Dosage/g·kg-1 Systolic pressure/mmHg 0 d 7 d 14 d 21 d 28 d Normal - 117.7±11.7 120.3±14.6 117.9±10.3 126.3±7.8 124.0±14.1 Model - 116.3±16.4 136.1±10.8△ 140.9±10.9△ 140.6±13.7△ 136.6±15.4△LJP 2.20 116.0±16.0 132.6±14.3 130.7±14.9 124.2±18.1* 131.0±19.6 LJPS 1.90 112.5±9.6 120.7±19.6 130.7±12.7 118.7±25.2* 129.3±19.9 LJPM 1.25 117.2±17.2 126.1±19.3 132.7±14.7 122.1±10.2* 138.2±8.9 M-S 1.00 118.5±8.5 131.5± 9.7 138.1±11.1 132.0±21.0 121.7±21.0 P-S 1.25 116.3±10.0 137.8±17.3 147.2±15.9 121.9±23.8* 125.9±17.0 STL 0.014 113.5±10.0 141.2±19.2 149.1±17.9 128.3±16.7*124.1±26.6

2.4 面部溫度 羚角-槲寄-夏枯組大鼠面部溫度下降，其它給藥組大鼠面溫明顯下降，說明各組方藥均可改善大鼠高血壓肝陽上亢之“面部烘熱”。見Tab 4。

2.5 血壓 模型大鼠收縮壓升高;全方、羚角 -槲寄 -夏枯、羚羊-夏枯-黃芩、夏枯 -黃芩、單味羚角可降低收縮壓，表明羚角降壓方全方或單用羚角、羚角-夏草的組合配伍槲寄生或黃芩均可降低收縮壓。就降低收縮壓而言，羚羊角、夏枯草是不可缺少的。此外，各組方藥對模型大鼠舒張壓、平均動脈壓無明顯影響。

3 討論

中醫認為，附子辛、甘，大熱之品，入心、腎、脾經，具有助陽補火之功效，“其性走而不守”(《本草綱目》);干姜性熱，味辛，溫中散寒，“干姜……守而不走”，“附子無姜不熱”，二者相須為用。肉桂性熱，味辛、甘，“通血脈，理疏不足，宣導百藥”，又有補火助陽之效，三者聯合應用，所致的肝陽上亢證較單味附子湯顯效更快更持久，但附子湯不能引起血壓升高。作為高血壓誘因的食鹽，作用恰好相反。麻黃堿具有擬交感神經作用，可升高血壓，由于麻黃堿具有快速耐受性，前期應用應減量。三因素聯合可制備高血壓肝陽上亢證動物模型［3］，本課題模型大鼠表現為面部烘熱、腰膝酸軟、狂躁易怒、躁動不安等中醫證侯，收縮壓、平均動脈也有顯著升高。

本實驗是在中醫理論的指導下，將羚角降壓方進行拆方。方中羚羊角平肝息風，清肝明目，為君藥，其水提液可鎮靜、抗驚厥(5.5 g·kg-1)［4］，實驗中卻未發現羚羊角 -槲寄生、單味羚羊角的鎮靜作用，可能與羚羊角劑量小有關。但羚羊角、夏枯草二者相須為用，可降低收縮壓，改善“躁動不安”、“狂躁易怒”、“面部烘熱”等與肝陽上亢證密切相關的證侯。所有改善“腰膝酸軟”之證的組方有槲寄生存在，相反則未與槲寄生配伍，所以槲寄生是強筋骨的主要藥味，但“腰膝酸軟”并非肝陽上亢直接相關的證侯，所以羚羊角-夏枯草兩味合用即可改善肝陽上亢證，降低收縮壓，是高血壓肝陽上亢證最佳精簡方劑。但其科學性仍有待進一步研究。

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