咪達唑侖對異氟烷小鼠的鎮痛、催眠作用的影響

王 雷，孫 飛，李 艷，劉 備，龐 靜，趙冰雪，談艷雯，惠洪亮，廖藝聰，王紅軍，孟 晶

(1.徐州醫學院麻醉學院，2.江蘇省麻醉學重點實驗室，江蘇 徐州 221004)

異氟烷(Isoflurane，Iso)是臨床常用吸入麻醉藥。有研究發現［1］，GHB受體、神經元煙堿受體與吸入麻醉藥的催眠作用有關，而 NMDA、GlyR及 AMPA與其鎮痛作用有關，但是GABA受體與吸入麻醉藥的鎮痛作用的關系還不明確［2］。咪達唑侖(Midazolam，Mid)是一種含咪唑環的苯二氮類藥物，可增強麻醉藥的鎮痛作用。本實驗通過觀察咪達唑侖對異氟烷的鎮痛、催眠作用的影響，為臨床合理使用兩藥奠定理論基礎，并初步探討苯二氮受體與異氟烷作用機制的關系。

1 材料與方法

1.1 試劑和儀器 吸入用異氟烷(批號:61K05A)，英國羅地亞精細化工有限公司;咪達唑侖注射液(批號:20100108)，江蘇恩華藥業股份有限公司;HH-42數顯恒溫攪拌循環水箱，常州國華電器有限公司。

1.2 實驗動物及方法 昆明種小鼠18～25 g，由徐州醫學院實驗動物中心提供。熱板法用♀，扭體法、翻正反射法♀♂兼用。每種方法均按分層隨機區組設計分為生理鹽水組(NS組)、Mid組(M組)、Iso組(I組)、咪達唑侖 +異氟烷組(MI組)4組，每組10只，使各組動物平均體重、年齡相似。Mid腹腔注射劑量為 2.7 mg·kg－1，Mid和 NS注射容積為0.1 ml·(10 g)－1。Iso 腹腔注射鎮痛劑量為 2.5 μl·(10 g)－1［3］，催眠劑量為 6 μl·(10 g)－1［3］。

1.3 咪達唑侖對異氟烷鎮痛作用的影響

1.3.1 熱板法 小鼠置于(55±0.5)℃的恒溫水浴箱熱板上，記錄從小鼠放入到舔后足的時間作為痛閾(pain threshold in the hot-plate test，HPPT)，選取 5 s＜HPPT ＜30 s的小鼠。觀察時間超過60 s者HPPT記為60 s。用藥前測痛閾2次，間隔5 min，取其平均值為基礎痛閾。實驗開始時，I組先ip Iso，5 min后 ip生理鹽水;MI組先 ip Iso，5 min后給 ip Mid，均為腹腔注射。記錄4組小鼠的基礎痛閾和用藥后5、15、30、45 min 的 HPPT。

1.3.2 扭體法 腹腔注射1%冰醋酸造模。注冰醋酸前5 min，各組給予相應的藥物，給藥順序同熱板法。觀察并記錄致痛后15 min內各組小鼠的扭體次數(writhing times，WT)。

1.4 咪達唑侖對異氟烷催眠作用的影響 給藥順序同熱板法。記錄小鼠翻正反射消失的持續時間，即睡眠時間(sleeping time，ST)。

2 結果

2.1 咪達唑侖對異氟烷鎮痛作用的影響 在熱板實驗中，NS組、I組和M組HPPT較基礎痛閾均無差異，MI組 HPPT給藥后延長(P＜0.05或 P＜0.01);與 NS組相比，僅 MI組HPPT延長(P＜0.01)。在扭體法實驗中可見MI組小鼠15 min扭體次數只有2～3次(P＜0.01)。見 Tab1。

2.2 咪達唑侖對異氟烷催眠作用的影響 NS組和M組小鼠均無入睡，I組有3只小鼠入睡，MI組入睡率為1.0(P＜0.01)。

3 討論

Wakai等［4］的研究顯示異氟烷在臨床濃度時能夠增強脊髓背角淺層神經細胞GABA能神經遞質受體系統功能，抑制單突觸的興奮性神經傳遞，而咪達唑侖可以通過GABA受體亞單位的苯二氮類結合位點發揮抗傷害作用［5］，苯二氮類受體與GABA受體及氯通道等結合成GABA-苯二氮類受體－氯通道復合物調節GABA的突觸前抑制作用，也使進入脊髓和腦干等二級神經元的神經遞質釋放減少［6］，從而使中樞接受的興奮性遞質進一步減少，增強了異氟烷的中樞抑制效果。本實驗結果表明咪達唑侖能夠增強異氟烷的鎮痛催眠作用。同時，咪達唑侖可減少病人的躁動，故提示咪達唑侖與異氟烷合用于臨床麻醉是有利的。

Tab 1Effect of midazolam on the analgesia of isoflurane(writhing test，hot-plate test)(±s，n=10)

Tab 1Effect of midazolam on the analgesia of isoflurane(writhing test，hot-plate test)(±s，n=10)

*P＜0.05，＊＊P＜0.01 vs basal HPPT;##P＜0.01 vs NS

Group WT/n Basal HPPT/s HPPT(after injection of drugs)/s 5 min 15 min 30 min 45 min NS 45.3 ± 16.7 13.1 ±6.0 12.7 ±5.4 11.7 ± 3.7 11.5±4.8 12.9 ± 4.3 Mid 35.4 ± 15.6 12.9 ±4.1 9.8 ±2.7 11.5 ± 3.6 12.1 ±2.7 13.2 ± 4.8 Iso 30.9 ± 17.5 11.0 ±3.3 12.4 ±11.7 19.4 ± 12.8 11.8 ±5.8 12.5 ± 5.4 Mid+Iso 2.6 ±2.8## 13.6 ±2.9 29.2 ±16.1*## 44.8 ±20.8＊＊## 33.2 ±17.0＊＊## 22.0 ±8.8*##

［1］ 周美艷，戴體俊.吸入麻醉藥鎮痛、催眠作用受體機制研究進展［J］.徐州醫學院學報，2010，30(5):346 －8.

［1］ Zhou M Y，Dai T J.Research progress on receptor mechanisms of analgesia and hypnosis of inhalation anesthetics［J］.Acta Acad Med Xuzhou，2010，30(5):346 －8.

［2］ 閆 肅，戴體俊，程 偉.全身麻醉藥鎮痛作用受體機制的研究進展［J］.中國藥理學通報，2008，24(10):1272 －5.

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