乙型肝炎病毒外膜大蛋白檢測的臨床應用

陳惠文 劉壬通 羅宜招 賀勇鋒

1 廣東省惠東縣婦幼保健院（516300）

2 廣東省惠東縣人民醫院（516300）

乙型肝炎病毒（hepatitis Bvirus，HBV）感染是全球健康性問題，其中慢性HBV感染者約占世界的1/3[1]。臨床應用上主要以肝功能是否得到改善，HBeAg和HBV DNA是否轉陰作為乙型肝炎病毒復制與抗病毒療效的監測的指標，在不具備實驗室條件時，對HBV感染者的評估存在一定的局限。我們對147例患者同時進行ELISA方法檢測乙型肝炎病毒外膜大蛋白（hepatitis B Virus Large Surface Protein，LHBs）、實時熒光法檢測HBV DNA ，對結果進行統計學分析，探討慢性乙型肝炎患者血清中LHBs與HBVDNA的關系。探討LHBs檢測作為反映乙型肝炎患者體內病毒的復制情況的評估指標。

表1 不同乙型肝炎標志物模式LHBs、HBV DNA陽性率比較

1 材料與方法

1.1 對象

147例乙型肝炎患者血清HBsAg均陽性，年齡14～55歲，病程2～5年。診斷均符合第十次全國病毒性肝炎及肝病學術會議修訂的《病毒性肝炎防治方案》[2]，排除了其他類型的肝炎、失代償期肝硬化、糖尿病、結核病等慢性疾病。

1.2 儀器與試劑

HBV DNA用實時熒光定量分析法進行檢測，HBV DNA＜1.0×103copy/L為陰性，儀器用杭州博日BIORE line-gene，試劑由中山大學達安基因生物公司生產。LHBs用ELISA方法檢測，試劑購自北京熱景生物技術有限公司。

2 結 果

2.1 LHBs與HBV DNA結果表明，在相同乙型肝炎模式中，LHBs與HBV DNA結果陽性率經χ2檢驗差異無顯著性（均P＞0.05），見表1。

2.2 HBeAg陽性和陰性血清LHBs、HBV DNA的檢出情況比較 在HBeAg陽性血清中LHBs和HBV DNA的陽性率明顯高于HBeAg陰性組，經χ2檢驗有顯著性差異（P＜0.05），見表2。

3 討 論

討論LHBs是HBV的包膜蛋白，包括HBsAg與前S蛋白（PreS1 蛋白和PreS2蛋白）。近年研究表明，LHBs與病毒侵入、組裝和復制等密切相關，能反映患者機體內HBV復制情況。研究鴨乙型肝炎動物模型發現含有嗜肝病毒血清的感染性不僅依賴于具有感染性的Danc顆粒的多少，還依賴缺乏葉酸的亞病毒顆粒的數量[3]。國內外研究表明，LHBs是導致肝細胞病變及凋亡的主要原因[4]。這個結果表明，LHBs可用于觀察臨床療效和估計預后。本研究結果發現，對147例慢性乙型肝炎患者中血清LHBs與HBV DNA檢測，LHBs陽性結果與HBV DNA陽性結果無顯著性差異（P＞0.05），LHBs在一定程度上可作為HBV復制的指標。表2結果中有7例HBV DNA陰性的標本LHBs檢測為陽性，可能是新的HBV突變株引起，導致PCR引物存在漏檢，或者存在HBV DNA檢測的方法學與靈敏度缺陷，導致低水平的HBV DNA漏檢。結果表明，乙型肝炎患者HBV DNA結果陰性而LHBs結果陽性，可能是肝內病毒繼續復制或抗病毒治療不徹底的現象。同時，血清LHBs與HBV DNA陽性率也具有一致性，LHBs可作為HBV病毒復制及療效監測的指標。

表2 HbeAg陽性和陰性血清LHBs、HBV DNA的檢出情況比較 [例（%）]

過去臨床認為，HBeAg陰轉是HBV復制減弱、傳染性降低和預后好轉的表現，習慣認為乙型肝炎兩對半模式中的HBeAg抗原和HBV DNA作為評估HBV病毒復制的指標，大量實驗證明，因HBV的變異，HBV基因前C區或CP區的變異[5]，導致HBeAg合成障礙，HBeAg轉陰后仍有患者存在病毒復制的現象，因此，HBeAg作為評估HBV病毒復制指標受到一定的限制。HBV DNA定量PCR檢測是評估HBV復制最直接和可靠的指標，許多基層醫療單位因受實驗室條件限制不能開展HBV-DNA定量檢測，不能廣泛應用臨床。

目前有專家提倡，HBV DNA轉陰、HBeAg血清轉陰已不能作為抗病毒治療的終點。本研究結果表明，LHBs和HBV DNA的結果有較好的一致性，能夠反映乙型肝炎患者體內病毒的復制情況，尤其對

HBeAg陰性的慢性乙型肝炎患者的應用價值更大，LHBs可單獨或聯合其他檢測方法評估HBV復制狀況的指標。

[1] 梁曉峰,陳園生,王曉軍等.中國3歲以上人群乙型肝炎血清流行病學研究[J].中華流行病學雜志,2005,26(9):655-658.

[2] 中華醫學會傳染病與寄生蟲學會,肝病分會.病毒性肝炎防治方案[J].中華傳染病雜志,2001,19(1):56-62.

[3] Hidt E,Saher G,Bruss V,et al.The hepaititis B virus large surface protein LHBs is a transcriptional activator[J].Virology,1996,225(1):235-239.

[4] Roingeard P,Sureau C.Ultrastructural analysis of hepatitis B virus in HepG2-transfected cells with special emphasis on sub viral filament morphogenesis[J].Hepatology,1998,28(4):1128-1133.

[5] Hamasaki K,Nakata K,Nagayama Y,et al.Change in prevalence of HbeAg negative mutant hepatitis B virus during the course of chronic hepatitis B[J].Hepatology,1994,20(1 Pt 1) :8-14.