β-七葉皂甙鈉對高血壓并發腦出血患者血清水通道蛋白水平的影響

魯紅霞,姜榮建

(1.四川省成都市郫縣中醫院內二科 611730;2.四川省人民醫院心內科,成都610072)

高血壓性腦出血(hypertensive intracerebral hemorrhage,HICH)是高血壓患者最嚴重的并發癥之一,多見于50～60歲的老年人,近年來其發病年齡呈年輕化趨勢。HICH病理變化中腦水腫既是腦出血后腦組織繼發性改變之一,也是導致腦組織二次損傷的關鍵因素[1]。水通道蛋白(aquaporins,AQPs)是一族廣泛存在于原核和真核生物細胞膜上的、選擇性高效轉運水分子的特異孔道蛋白。研究表明,水通道蛋白1(aquaporin 1,AQP-1)和水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP-4)參與了多種神經系統疾病引起的腦水腫發生過程[2]。β-七葉皂甙鈉具有多種藥理作用,本研究觀察分析β-七葉皂甙鈉對高血壓并發腦出血內科治療患者血清AQP-1和AQP-4水平變化的影響,探討AQPs在高血壓并發腦出血后的變化以及β-七葉皂甙鈉的神經保護作用機制。

1 臨床資料

1.1 一般資料 分析2006年 1月至 2008年6月在本院內科住院治療的高血壓并發腦出血患者37例的臨床資料,所有患者均符合1995年第4屆全國腦血管會議制定的高血壓標準,分析對象排除繼發性高血壓,肝腎功能檢查基本正常,無腦血管、血液、腫瘤等其他系統疾病。37例患者均進行了常規內科治療,其中19例患者使用了β-七葉皂甙鈉歸于輔助治療組(輔助組),余18例患者為常規組。常規組中男8例,女10例,年齡42～76歲,平均(62.3±8.3)歲;輔助組中男11例,女8例,年齡40～77歲,平均(61.6±8.1)歲。兩組患者年齡、性別、入院時血壓、神經功能缺損評分及入院病程(發病至入院)等差異無統計學意義(表 1)。

1.2 治療方法 37例患者入院后均給予常規降低顱內壓、控制血壓、控制血糖、應用抗生素及營養支持等治療。隨機分組,19例患者(輔助組)使用了β-七葉皂甙鈉(山東綠葉制藥有限公司生產,批號200402132)20mg,加入0.9%氯化鈉250mL中靜脈滴注,每日1次,使用 10～ 14d。治療后3、7、14、21d檢測兩組患者血清AQP-1和AQP-4水平,同時進行神經功能缺損評分量表(national institute of health stroke scale,NIHSS)評分。

1.3 檢測指標及方法 采集患者第3、7、14、21天空腹靜脈血,獲取血清置-70℃低溫冰箱保存,集中測定血清AQP-1和AQP-4水平。(1)血清AQP-1和AQP-4水平檢測:采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測AQP-1和 AQP-4水平,AQP-1和AQP-4檢測試劑盒購自深圳晶美生物工程有限公司。(2)NIHSS評分:依照美國國立衛生院NIHSS評分標準,詳細記錄患者意識水平、顱神經、肢體運動、感覺以及語言等指標,分別于治療后第 3、7、14、21天各評估一次。

1.4 統計學方法 使用SPSS12.0軟件及Med Calc軟件進行統計處理,計量資料以表示,組間比較用配對t檢驗,P＜0.05為差異有統計學意義。受試者工作特性曲線(receiver operating characteristic curve,ROC)采用Med Calc軟件進行處理。

表1 兩組患者基本臨床資料

表2 兩組患者治療后不同時間的血清AQP-1和AQP-4水平(μ g/L)

2 結 果

2.1 血清AQP-1和AQP-4水平檢測結果 治療后第3、7和14天輔助組AQP-1水平顯著低于常規組(P＜0.01),第21天兩組差異無統計學意義(P＞0.05)。治療后第3、7天輔助組AQP-4水平顯著低于常規組(P＜0.01),第 14、21天兩組差異無統計學意義(P＞0.05)。兩組患者血清AQP-1和AQP-4水平在高血壓性腦出血發生后出現了顯著升高,隨病程進展及患者病情恢復逐漸降低,其下降過程中輔助組較常規組下降趨勢明顯,這可能與β-七葉皂甙鈉的抗水腫作用有關(表2)。

2.2 NIHSS評分結果 兩組患者在病程第 3、7和14天NIHSS評分差異無統計學意義(P＞0.05),病程第21天輔助組NIHSS評分顯著低于常規組(P＜0.05)。表明β-七葉皂甙鈉可能通過下調患者血清AQP-1和AQP-4水平發揮其神經保護作用而改善腦出血預后,降低了輔助組患者NIHSS評分(表3)。

2.3 血清AQP-1和AQP-4水平與NIHSS評分相關分析血清AQP-1和AQP-4水平與NIHSS相關系數分別為0.656和0.587(P＜0.01),表明血清 AQP-1和AQP-4水平可代表腦損傷程度,檢測AQP-1和AQP-4水平可對HICH患者的預后進行一定程度的預測。

表3 兩組患者治療后不同時間NIHSS評分結果

表4 血清AQP-1及AQP-4水平AUC統計結果

2.4 血清AQP-1和AQP-4水平ROC曲線特征分析 ROC分析表明,AQP-1曲線下面積為0.621,AQP-4曲線下面積為0.582。AQP-1和 AQP-4 ROC配對比較,AUC相差值為0.039±0.011,95%可信區間為0.018～0.060,z statistic參數為3.708,P＜0.01,說明β-七葉皂甙鈉對血清 AQP-1和AQP-4水平均有顯著影響,但對AQP-1水平的影響顯著大于對AQP-4的影響,即β-七葉皂甙鈉可能主要通過對AQP-1的影響達到其神經保護作用(表4)。

3 討 論

AQPs作為膜主體內在蛋白(major infrinsic pro-tein,MIP)家族成員,具有增加細胞膜水通透力的功能,可以提供快速液體轉運的途徑。AQPs功能不受溫度和脂質膜成分影響,而且不存在開放和關閉的功能狀態,只要有滲透壓梯度就有水分子順滲透壓梯度通過水孔通道[3]。AQP-1作為原生型水通道,在全身分布極為廣泛,分布于循環系統、泌尿系統、消化系統、神經系統及運動系統,參與人體內多種生理功能的調節,對維持人體正常生理狀態具有重要作用[4],AQP-1表達異常或調節失控與某些疾病的發生密切相關[5]。AQP-4為四異聚體蛋白,AQP-4與腦的血液灌注及水腫的形成和消退有著密切的關系,對調節體內水代謝和維持中樞神經系統水代謝的平衡有重要的意義。AQP-4參與腦出血、腦水腫的形成,在維持大腦平衡中起重要作用,AQP-4水平降低均可以延緩或阻止腦水腫形成。本研究中,治療后第 3、7、14天輔助組 AQP-1水平顯著低于常規組,第 3、7天輔助組 AQP-4水平顯著低于常規組。提示輔助組和常規組患者血清AQP-1和AQP-4水平在高血壓性腦出血發生后出現了顯著升高,隨病程進展及患者病情恢復逐漸降低,輔助組下降趨勢較明顯。治療后第21天兩組AQP-1水平差異無統計學意義,治療后第 14、21天兩組AQP-4水平差異無統計學意義,說明隨患者病情穩定,AQP水平逐漸穩定。有文獻支持本研究觀察結果,陳現紅等[6]發現高血壓性腦出血患者出血后 AQP-4、MM P-2及MMP-9早期上調表達。周圣軍等[7]發現血腫周圍組織腦水腫的形成和發展與AQP-4的異常表達密切相關。

本研究結果表明,兩組患者血清AQP-1和AQP-4水平均隨治療時間延長逐漸呈下降趨勢,但輔助組下降較明顯,這可能與β-七葉皂甙鈉的抗水腫及抗炎作用有關。急性腦出血血腫形成后,在血腫周圍會形成低密度的水腫帶,并且隨著出血時間的延長,水腫范圍也逐漸擴大,最終導致腦組織受壓形成高顱內壓甚至腦疝,造成二次損傷。因此,在維持血壓穩定的前提下,加用β-七葉皂甙鈉治療對進一步減輕腦水腫有良好效果。這也符合腦出血治療原則:控制顱內壓增高、減輕腦水腫、調整血壓、防止再出血和減輕血腫造成的繼發性損害。曾建中等[8]將腦出血患者加用β-七葉皂甙鈉注射液治療,發現β-七葉皂甙鈉對組織損傷有抗炎、抗滲出及消水腫作用,血腫吸收和神經功能改善。最為重要的是患者神經功能的恢復,本研究中輔助組第21天NIHSS評分顯著低于常規組,表明β-七葉皂甙鈉可能通過顯著下調AQP-1和AQP-4水平,發揮其神經保護作用而改善 NIHSS評分,改善了腦出血預后。為分析何種AQP在β-七葉皂甙鈉的作用機制中可能更發揮作用,本科采用ROC分析方法探討AQP-1和AQP-4以輔助組為陽性值進行的統計分析,結果表明,AQP-1曲線下面積顯著高于AQP-4,z statistic參數為 3.708,P＜0.01,說明β-七葉皂甙鈉對AQP-1水平的影響顯著大于對 AQP-4的影響,即β-七葉皂甙鈉可能主要通過對AQP-1的影響達到其神經保護作用。

β-七葉皂甙鈉是含多酯鍵三萜皂苷的鈉鹽,在抗炎、抗滲出和消腫方面作用尤為顯著,它既能增加體內前列腺素PGF2分泌,抑制前列腺素E釋放量,還能促進腎上腺皮質分泌皮質類固醇,對抗組胺和緩激肽等炎性介質作用,因而具有明顯的抗炎、抗滲出、消腫脹、減輕水腫作用,并且還具有很強的穩定血管內皮細胞和清除自由基及恢復毛細血管的正常通透性、改善微循環、保護神經組織及促進腦功能恢復的作用[9]。本研究結果提示AQP-1和AQP-4參與了腦出血水腫的形成,可通過下調AQP-1和AQP-4達到控制HICH發生后腦水腫發生、避免繼發性損傷、改善患者預后的目的。

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