高效液相色譜法測定米諾地爾搽劑中米諾地爾的含量

范玉峰 胡守蓮

1 河南省信陽職業技術學院附屬醫院（464000）

2 河南省信陽市食品藥品檢驗所（464000）

米諾地爾搽劑是信陽職業技術學院附屬醫院的自制制劑，臨床外用治療斑禿[1]、雄激素性脫發[2]等常見病癥。通過對現有文獻[3-5]的調研發現，米諾地爾的含量測定方法多為紫外分光光度（UV）法。為了更有效、快速、準確的控制產品質量，本試驗應用準確度較高的高效液相色譜法檢測米諾地爾搽劑中米諾地爾的含量，結果顯示此方法快速、操作簡便、分離效果好，具有廣泛的推廣價值，現報道如下。

1 儀器與試劑

日本島津LC-10AT高效液相色譜儀，SPD-10A可進紫外檢測器，C-R6A色譜數據處理機。

甲醇為一級色譜純，水為純化水，其他化學試劑均為分析純。米諾地爾對照品（中國生物藥品檢定所，批號080429618），米諾地爾（江蘇金壇市天華化工新技術研究所，批號 080621，藥用規格），米諾地爾搽劑 （河南省信陽職業技術學院附屬醫院制劑室，20080421、20080511、20080624）。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱：十八烷基鍵合硅膠柱（Nova-PaKC18色譜柱 150mm×4.6mm，5μm）；流動相：甲醇-水（70∶30）；流速：1.0mL/min；檢測波長：285nm；柱溫：室溫；進樣體積：10μL。在此色譜條件下，測得米諾地爾對照品，米諾地爾搽劑樣品色譜圖，見圖1。在圖1中，米諾地爾保留時間約9.5min，理論板數7500，與其相鄰峰的分離度＞1.5。

2.2 對照品溶液的制備

對照品溶液：精密稱取105℃干燥至恒重的米諾地爾對照品10mg，用甲醇定容至10mL容量瓶中，搖勻，精密量取稀釋液1mL，置100mL量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，即得米諾地爾對照品儲備液。

2.3 供試品溶液的制備

精密量取樣品5mL，置100mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，精密量取稀釋液1mL，置100mL容量瓶中，用甲醇定容置刻度，搖勻，即得供試品溶液。

圖1 色譜圖

表 1 精密度試驗結果

2.4 線性關系考察

精密量取該對照品儲備液適量，用甲醇稀釋成2.5、5、7.5、12.5、17.5、20mg/L系列濃度樣品，分別取10μL注入液相色譜儀，記錄色譜峰面積，以峰面積均值X（n=3）對進樣濃度Y（mg/L）線性回歸，得方程：Y=18.838X-0.296，r=0.9999。實驗證明，米諾地爾在2.5～20mg/L范圍內濃度與峰面積比呈現良好的線性關系。以最低濃度峰與基線噪音峰比值為1∶3倍計算，測得最低檢出濃度為0.5mg/L。

2.5 精密度試驗

分別取線性試驗項下的供試品儲備液，用流動相甲醇配成濃度分別為5、15、20mg/L標準溶液，在1d內分別重復進樣5次，分別于1d內測定，計算得日內RSD（n=3）分別為1.67%、1.73%、1.51%。連續5d測定，計算得日間RSD（n=3）分別為2.01%、1.66%、1.70%。重現性良好，結果見表1。

2.6 穩定性試驗

取濃度為125μg/mL的對照品溶液和128μg/mL的供試品溶液，密封室溫放置4、8、12、24h后進樣測定，米諾地爾含量RSD分別為1.77%和1.90%，表明溶液在24h內穩定。

2.7 重復性試驗

取同一批號樣品，精密稱取5份，按上述方法制備供試品溶液，依上述色譜條件測定米諾地爾搽劑中米諾地爾的含量，結果米諾地爾平均含量為98.2%，其RSD=1.83%（n=5）。

2.8 回收率試驗

精密稱取米諾地爾對照品按米諾地爾搽劑處方制備5份回收樣品。按樣品測定項下方法測定含量，求得平均回收率為99.5%，RSD為1.85%。

2.9 樣品測定

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，記錄米諾地爾色譜峰面積，外標法計算含量。樣品含量應為標示量的90%～110%。結果5批樣品中米諾地爾含量分別是95.4%、96.3%、100.8%、102.3%、100.3%。

3 討 論

米諾地爾具有擴血管、增加局部血供作用，能刺激毛囊上皮細胞的增殖與分化，能通過拮抗細胞內鈣離子通道，抑制表皮成長因子生成；最終促使毛發生長[6]。因此，米諾地爾仍是目前治療各種原因引起脫發的主要手段。因此，嚴密監測米諾地爾產品的含量對于患者用藥安全具有重要意義，而隨著科學技術的發展，米諾地爾的定量方法也可由原質量標準中的分光光度法提高為高效液相色譜法。此方法能夠更加嚴格控制產品質量，保證藥品的安全性、有效性。隨著高效液相色譜儀的普及，此方法亦可作為藥品生產的常規檢驗方法[7]。本次試驗結果證明，檢驗用溶劑和輔料成分對米諾地爾的測量沒有干擾，表明本法專屬性強，操作簡單，結果準確可靠，可滿足米諾地爾搽劑中米諾地爾的含量測定的要求。故本法可作為米諾地爾搽劑質量控制的有效測定方法。

[1]許嵐,楊新建.2%米諾地爾搽劑治療斑禿臨床觀察[J].中國中西醫結合皮膚性病學雜志,2009,8(2):104.

[2]陳聲利,孫建方.米諾地爾治療脫發的藥理與臨床研究[J].國外醫學皮膚性病學分冊,2004,30(5):276-278.

[3]郭燕萍,陳珍鳳,鄭基蒙.復方米諾地爾溶液中米諾地爾的含量測定[J].中國臨床藥學雜志,2005,14(3):52-53.

[4]莫玉芳,葉延武.紫外分光光度法測定米諾地爾洗劑中米諾地爾的含量[J].廣東藥學,2004,14(5):18-20.

[5]周敏,顧宜,張三奇,等.氮酮對人參皂苷Rg1和米諾地爾透皮吸收的影響[J].第四軍醫大學學報,2004,25(10):958-960.

[6]Han JH,Kwon OS,Chung JH,et al.Effect of minoxidil on proliferation and apoptos is in dermal papilla cells of human hair follicle[J].J Dermatol Sci,2004,34(2):91-98.

[7]康自華,陽小成,陳婷.高效液相色譜法在藥物分析中的應用[J].廣東微量元素科學,2006,13(8):18-22.