非水反相色譜法測定球蟲感染后三黃雞血清中類胡蘿卜素的含量

王德圣 李永勝 趙 劍

自然界中已發現的類胡蘿卜素有600種，都可以看作是從β-胡蘿卜素衍生而來的。但只有很少一部分類胡蘿卜素能有效的沉積在禽體內。

類胡蘿卜素從吸收入血液到沉積到相關部位受到很多因素的影響，其中疾病的感染最為嚴重。Ruff等（1974）報道了雞在常見的6種球蟲感染后，血清中類胡蘿卜素含量在感染后的6～8 d都明顯下降；Koutsos等（2003）報道了注射LPS或IL-1引起的血漿中類胡蘿卜素含量發生變化。血液類胡蘿卜素含量對疾病感染的敏感性引起了研究者的興趣，而準確測定血液中類胡蘿卜素含量的方法還有待完善。另外，測定血液中類胡蘿卜素含量有利于真實準確地反映其生物學利用率，從而取代依靠飼料類胡蘿卜素含量與產品色澤相關關系這一粗放的評價指標。

高效液相色譜法是近10年來應用最普遍的定性、定量檢測血液中類胡蘿卜素含量的方法。Waysek提出了以正相色譜法分離類胡蘿卜素的標準，但是柱填料硅膠會促進類胡蘿卜素的分解。采用常規反相色譜由于流動相中含有一定量水，導致洗脫類胡蘿卜素這類非極性組分的峰型不對稱，甚至還會發生組分的柱上沉淀。非水反相色譜法被認為是當前測定生物組織類胡蘿卜素含量最好的方法（Su等，2002；Furr，2004），但這類研究以人血液為樣本，分離的結果中沒有出現對角黃素（Canthaxanthin）和Apo類胡蘿卜素酯（Apo-Carotenioc ester）的特征描述，而這恰是家禽飼料中應用最多的兩種色素成分。

本實驗在前人研究的基礎上，建立了一種非水反相液相高效色譜測定血液中角黃素和Apo類胡蘿卜素酯的分析方法，并比較了在堆型或柔嫩艾美爾球蟲感染下血清中這兩種物質的變化。……