聯(lián)吡啶釕體系電致化學(xué)發(fā)光測定鹽酸苯海索的研究

鹽酸苯海索(Benzhexol hydrochloride),又名安坦、鹽酸三己芬迪，化學(xué)名α-環(huán)己基-α-苯基-1-哌啶丙醇鹽酸鹽。鹽酸苯海索為中樞抗膽堿抗帕金森病藥，能選擇性阻斷紋狀體的膽堿能神經(jīng)通路，而對(duì)外周作用較小，從而有利于恢復(fù)帕金森病患者腦內(nèi)多巴胺和乙酰膽堿的平衡，改善患者的帕金森病癥狀[1]。

鹽酸苯海索在甲醇、乙醇或三氯甲烷中溶解，在水中微溶。目前測定鹽酸苯海索的方法有高效液相色譜法[2～4]、流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法[5]、毛細(xì)管電化學(xué)法[6]、LC-MS法[7，8]、氣相色譜法[9]、原子吸收法等[10]。

1 實(shí)驗(yàn)

1.1 試劑和儀器

1.00×10-4mol·L-1鹽酸苯海索標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取0.0034 g鹽酸苯海索，定容于100 mL棕色容量瓶中，超聲波除氣后冷藏于冰箱中備用。

1.00×10-4mol·L-1聯(lián)吡啶釕儲(chǔ)備液：準(zhǔn)確稱取六水合三(2，2-聯(lián)吡啶)氯化釕(Aldrich公司)0.0748 g 定容于100 mL棕色容量瓶中，超聲波除氣后放入冰箱中(4℃)冷藏。其它試劑為分析純或化學(xué)純，實(shí)驗(yàn)用水均為二次石英亞沸水。

MPI-E型電致化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng),西安瑞邁電子科技有限公司；DL-60D型超聲波清洗器,上海之信儀器有限公司。

1.2 方法

2 結(jié)果與討論

2.1 電化學(xué)行為和電致化學(xué)發(fā)光行為的研究

2.1.1 鹽酸苯海索的電化學(xué)行為

用循環(huán)伏安法考察了1.4×10-4mol·L-1的鹽酸苯海索在pH值為8.0的磷酸鹽緩沖溶液中的電化學(xué)行為,結(jié)果見圖1。

圖1 鹽酸苯海索的循環(huán)伏安圖

由圖1可知，當(dāng)電位從0.2 V掃向1.3 V時(shí)，未觀察到鹽酸苯海索在金電極上的電化學(xué)行為。

2.1.2 鹽酸苯海索的電致化學(xué)發(fā)光行為(圖2)

圖2 鹽酸苯海索的電致化學(xué)發(fā)光圖

由圖2可知，沒有觀察到鹽酸苯海索的電致化學(xué)發(fā)光現(xiàn)象。

圖3 聯(lián)吡啶釕和鹽酸苯海索體系的循環(huán)伏安圖

由圖3可知，聯(lián)吡啶釕在0.44 V左右出現(xiàn)一個(gè)氧化峰(曲線a)，當(dāng)有鹽酸苯海索存在時(shí)(曲線b)，原有的陽極電流升高，陰極電流下降，但氧化峰電位仍在0.44 V左右，這表明鹽酸苯海索對(duì)聯(lián)吡啶釕的氧化電流具有增敏作用[12]。

圖4 聯(lián)吡啶釕和鹽酸苯海索體系的電致化學(xué)發(fā)光圖

由圖4可知，2個(gè)體系的ECL強(qiáng)度的增加始于1.0 V，且強(qiáng)度的最高值均位于1.2 V。在聯(lián)吡啶釕體系中加入鹽酸苯海索后，體系的ECL強(qiáng)度從83 Counts(曲線a)增加到2537 Counts(曲線b)，可見在相同的條件下，鹽酸苯海索對(duì)聯(lián)吡啶釕的ECL具有顯著增強(qiáng)作用。

2.2 電致化學(xué)發(fā)光行為研究參數(shù)的選擇

2.2.1 MPI-E參數(shù)

2.2.1.1 光電倍增管高壓

圖5 鹽酸苯海索體系(a)和聯(lián)吡啶釕(b)的電致化學(xué)發(fā)光圖

由圖5可知，隨著光電倍增管高壓從700 V變化到900 V，ECL強(qiáng)度不斷增加，且變化趨勢增強(qiáng)，同時(shí)對(duì)應(yīng)的空白值也增大，其趨勢和ECL強(qiáng)度規(guī)律相一致。因此，在參考最佳信噪比條件下，選擇光電倍增管高壓為850 V。

2.2.1.2 掃描速率

考察了掃描速率為0.06 V·s-1、0.08 V·s-1、0.10 V·s-1及0.12 V·s-1時(shí)對(duì)鹽酸苯海索ECL強(qiáng)度的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨著掃描速率的加快，ECL強(qiáng)度逐漸增大；當(dāng)掃描速率達(dá)到0.10 V·s-1時(shí)，ECL強(qiáng)度較好；繼續(xù)加快掃描速率對(duì)ECL強(qiáng)度的影響不大。因此，選擇掃描速率為0.10 V·s-1。

2.2.2 聯(lián)吡啶釕濃度

2.2.3 緩沖溶液及pH值

a.PBS Buffer solution b.Na2B4O7-H3BO3 Buffer solution

2.2.4 共存物質(zhì)的影響

2.3 方法的評(píng)價(jià)

2.3.1 線性回歸方程

在最佳條件下，通過電致化學(xué)發(fā)光工作站記錄不同濃度鹽酸苯海索標(biāo)準(zhǔn)溶液在金電極上的ECL強(qiáng)度響應(yīng)曲線，結(jié)果見圖7。

圖7 鹽酸苯海索體系的線性回歸方程

由圖7可知，鹽酸苯海索濃度在2.00×10-7～1.00×10-4mol·L-1范圍內(nèi)與相對(duì)峰高呈良好線性關(guān)系，其線性回歸方程為：I(Counts)=300.00×105c-120.71。方法檢出限為1.00×10-8mol·L-1(s/n=3)。

在不同時(shí)段測定5.9184×10-5mol·L-1的鹽酸苯海索片溶液4次，所測樣品含量值的RSD為1.55%，表明方法具有較高的靈敏度。

2.3.2 回收率

對(duì)樣品進(jìn)行加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見表1。

表1 鹽酸苯海索片回收率測定

由表1可知，回收率在97.50%～104.00%，平均回收率為101.72%，RSD為2.65%，表明方法具有較好的重現(xiàn)性。

2.4 樣品分析

取10片鹽酸苯海索，準(zhǔn)確稱量，研碎，混合均勻后稱取相當(dāng)于1片鹽酸苯海索含量的樣品，超聲溶解于一定量水中，過濾后定容于100 mL棕色容量瓶中，稀釋后在最佳實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行測定，結(jié)果如表2所示。

表2 鹽酸苯海索片含量的測定

由表2可知，該方法可有效用于分析、測定鹽酸苯海索片。

3 結(jié)論

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