替硝唑葡萄糖注射液與注射用鹽酸頭孢替安配伍穩定性考察

楊艷 張婉婷

替硝唑(tinidazole)屬于硝基咪唑類衍生物，具有廣譜抗厭氧菌作用，是繼甲硝唑之后的一種療效更高、體內分布更廣、耐藥性低的藥物[1]。除用于抗滴蟲和抗阿米巴原蟲外，近年來，廣泛地用于抗厭氧菌的系統與局部感染：如腹腔、婦科、手術創口以及腸道和肝阿米巴病等。頭孢替安(cefotiam，CEF)系第二代頭孢菌素類抗生素，抗酶性能強，對第一代頭孢菌素耐藥的革蘭陰性菌菌株也有效；抗菌譜廣，比第一代頭孢菌素抗菌譜有所擴大，主要敏感菌有葡萄球菌屬、鏈球菌屬、肺炎球菌等，對奈瑟菌、部分腸桿菌屬等亦均有抗菌作用,有時臨床病例有厭氧菌與需氧菌引起的混合感染，臨床工作者將二者結合起來用。但目前未見有二者配伍穩定性的報道。本文模擬臨床用藥濃度對替硝唑葡萄糖注射液與頭孢替安的配伍穩定性進行考察，為臨床用藥安全提供參考依據。

1 材料

1.1 試劑和藥品

替硝唑葡萄糖注射液(四川科倫有限公司，規格100ml：葡萄糖5g，替硝唑0.4g，批號：E090520)，注射用鹽酸頭孢替安(商品名：佩羅欣， 哈爾濱制藥總廠，規格1g，批號B200907305)，葡萄糖標準品(中國醫藥上?；瘜W儀器公司，批號：F990524；)，蒸餾水(實驗室自制)。

1.2 儀器

TU-1901型雙光束紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責任公司)；Sartorius BT125D電子分析天平(塞多利斯科學儀器有限公司)；SG5200HPT超聲波清洗器(上海冠特超聲儀器有限公司)；SartoriusPH計(塞多利斯科學儀器有限公司)；GWF微粒分析儀(天河醫療儀器有限公司)。

2 方法與結果

2.1 貯備液的配制

取佩羅欣一支(以頭孢替安計)，取蒸餾水將藥物粉末溶解并轉移于50ml容量瓶中，蒸餾水定容即得濃度為20mg/ml的貯備液A；0.4%替硝唑葡萄糖注射液為貯備液B。

2.2 測定波長的選擇

從上述配制的貯備液A中精密量取0.1ml于100ml容量瓶中，用蒸餾水定容至100ml得濃度為20μg/ml供試液A。精密量取0.5ml貯備液B于100mL容量瓶中，用蒸餾水定容即得濃度為20μg/ml供試液B。取供試液A、B以蒸餾水為空白在200～400nm波長范圍內進行掃描，結果替硝唑在317nm波長處有一穩定的最大吸收峰，與文獻一致[2]。頭孢替安在258nm波長處有一穩定的最大吸收峰，掃描紫外光譜圖見圖1。從圖譜上可見，替硝唑在頭孢替安的最大吸收峰處有吸收，對頭孢替安的測定有影響，故采用紫外雙波長等吸收消去法測定頭孢替安的含量。根據紫外雙波長等吸收消去法等吸收原則選擇258nm為測定波長，參比波長為356.63nm。在替硝唑的最大吸收波長317nm處，頭孢替安在此無吸收，對替硝唑的含量測定無影響，故選擇317nm為替硝唑的測定波長。

圖1 替硝唑和頭孢替安紫外掃描光譜圖

2.3 驗證葡萄糖無干擾實驗

精密稱取105℃干燥至恒重的無水葡萄糖0.0718g，置于小燒杯中，加適量純化水溶解并定容至250ml容量瓶中，搖勻即得無水葡萄糖標準溶液。精密量取無水葡萄糖標準溶液2.0ml置于25ml容量瓶中，蒸餾水稀釋至刻度，搖勻即得濃度為22.976μg/ml的葡萄糖溶液。取此溶液于200～400nm波長范圍內進行波長掃描，在此范圍內無吸收。

2.4 頭孢替安標準曲線繪制

取佩羅欣一支(以頭孢替安計),取蒸餾水將安瓿中的藥物粉末溶解并轉移于1000ml容量瓶中，蒸餾水并定容至刻度。再分別精密量取此溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml置100mL容量瓶中，用蒸餾水稀釋并定容，搖勻即得頭孢替安系列溶液，以258nm為測定波長，356.63nm為參比波長，蒸餾水為空白，測定吸收度。以吸收度差△A對濃度C回歸，得回歸方程為C=38.19657△A-0.79735(r=0.9999)。結果表明，在5～25μg/ml范圍內，吸收度差△A與濃度C呈良好的線性關系。

2.5 替硝唑葡萄糖標準曲線繪制

表1 替硝唑葡萄糖注射液與頭孢替安的回收率實驗結果(n=6)

精密量取0.4%的替硝唑葡萄糖注射液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml置100ml容量瓶中，用蒸餾水稀釋并定容，搖勻即得替硝唑葡萄糖系列溶液，以317nm為測定波長，蒸餾水為空白，測定吸收度。以吸收度A對濃度C回歸，得回歸方程為C=26.25457A-0.0523(r=0.9996，n=5)。從回歸方程結果可知，替硝唑葡萄糖在4～20μg/ml范圍內，吸收度A與濃度C呈良好的線性關系。

表2 配伍液外觀及PH值(n=3)

表3 8h內替硝唑葡萄糖注射液和頭孢替安配伍后的微粒變化(n=3)

2.6 回收率實驗

精密量取替0.4%硝唑葡萄糖貯備液B和頭孢替安貯備液A，用蒸餾水配制成含替硝唑8、12、16μg/ml和頭孢替安10、15、20μg/ml的混合溶液，照標準曲線下的方法分別測定吸收度A，所得數據代入回歸方程，計算回收率。結果見表1。

2.7 配伍實驗

模擬臨床用藥濃度，取佩羅欣(以頭孢替安計)，加入0.4%替硝唑葡萄糖注射液定容至刻度，搖勻即得配伍溶液。室溫下0，1，2，4，6，8h時間點觀察配伍溶液的外觀變化、測定PH值、微粒粒徑、替硝唑與頭孢替安各自的含量。

配伍溶液在室溫下0～8h內，無沉淀及汽泡產生，均為淡黃色澄明液體。配伍液的PH值無明顯改變。詳見表2

2.8 不溶性微粒測定

室溫下，于各時間點取配伍液對其微粒(≥10um，≥25um)進行測定。結果顯示不溶性微粒無明顯變化且符合2005版《中國藥典》[3]規定，詳見表3。

2.9 觀察吸收曲線形狀變化及測定含量室溫下，各時間點取配伍溶液稀釋至一定濃度，在選定的測定波長處測定替硝唑和頭孢替安的吸收度，代入回歸方程，以0h的含量為100%，計算出各自的百分含量。結果，配伍后替硝唑和頭孢替安各自含量無明顯變化，詳見表4。在測定吸收度的同時在200～400nm波長范圍內進行掃描，結果溶液的吸收曲線形狀未改變，亦未發現新的吸收曲線，最大吸收峰也未發生移動。

3 討論

在200～400nm波長范圍內對頭孢替安和替硝唑葡萄糖注射液進行掃描，頭孢替安的最大吸收波長在258nm處，替硝唑葡萄糖注射液的最大吸收波長在317nm處，但替硝唑在頭孢替安的最大吸收波長258nm處有吸收對頭孢替安的含量測定有影響，為了消除此影響本實驗采用了紫外雙波長分光光度法測定頭孢替安的含量。實驗結果表明紫外雙波長分光光度法操作簡單、方便，可用于對頭孢替安的含量測定。但在選擇測定波長時，根據紫外雙波長分光光度法等吸收原則，盡可能使共有組分的△A趨于零[4]，否則會影響測定結果。

表4 配伍液8h內的含量變化(%，n=3)

替硝唑葡萄糖注射液的溶媒是葡萄糖，為了考證葡萄糖對配伍液的含量測定有無影響，需用葡萄糖標準溶液在200～400nm范圍內掃描，掃描結果表明葡萄糖在此波長范圍內根本無吸收，對配伍液的含量測定無影響。

實驗結果表明，在0～8h內替硝唑葡萄糖注射液與頭孢替安配伍后溶液外觀均為淡黃色澄明，無沉淀及汽泡產生，替硝唑葡萄糖注射液與頭孢替安的含量基本無變化。紫外圖譜發現吸收曲線形狀未改變，最大吸收峰無位置改變，亦無新的吸收峰出現，說明替硝唑葡萄糖注射液與頭孢替安配伍化學性質穩定，未有新的物質出現；配伍液的PH值無明顯變化，且符合注射液的pH要求(4～9)[5]；不溶性微粒檢查亦符合2005版《中國藥典》規定。故認為臨床上二者配伍后在8h內可以使用。

[1]陳新謙,金有豫,湯光.新編藥物學[M].16版.北京:人民衛生出版社,2007:69-77.

[2]劉偉,張曉梅,王曉霞.替硝唑葡萄糖注射液中配伍止血芳酸的穩定性[J].中國醫院藥學雜志,2002,22(3):187-188.

[3]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].北京:化學工業出版社,2005:附錄ⅨC.

[4]孫毓慶.分析化學[M].3版.北京:人民衛生出版社,1996:32-46.

[5]崔福德.藥劑學[M].6版.北京:人民衛生出版社,2007:67-75.