分化型甲狀腺癌中 ADAM9的表達及其與臨床病理因素的關系

陳 啟 馮吉煥 張 瑩 趙一軍 許俊龍

近年來研究表明金屬蛋白酶解離素 9(a disintegrin and metalloproteinase 9,ADAM9)高表達與乳腺癌、肝癌、胰腺癌、胃癌等多種腫瘤侵襲轉移關系密切[1～4]。關于 ADAM 9在分化型甲狀腺癌侵襲轉移過程中的作用,目前,國內、外少見文獻報道。為此,我們采用免疫組化 SABC法檢測了 42例甲狀腺癌組織中ADAM9的表達,旨在探討 ADAM9在分化型甲狀腺癌侵襲轉移過程中的作用及臨床意義。

1 材料與方法

1.1 資料

標本取自聊城市人民醫院病理科(2007～2008年)手術切除的甲狀腺癌標本,共 42例,男性 13例,女性 29例,年齡 18～75歲,中位年齡 38歲。所有病例均經術后病理確診,其中乳頭狀癌 34例,濾泡狀癌 8例。有頸淋巴結轉移者 20例,無頸淋巴結轉移者 22例;腫塊限于甲狀腺內者 35例,累及或超出甲狀腺被膜者 7例;按 1987年 UICC制定的國際 TNM分期:Ⅰ期 22例 ,Ⅱ期 12例,Ⅲ期 8例。

1.2 試劑和方法

鼠抗人 ADAM9單克隆抗體購自 Santa Cruz公司,工作濃度為 1∶100。即用型 SABC試劑盒和 DAB顯色試劑均購自武漢博士德試劑公司。將存檔的石蠟塊重新制成 4μm厚切片,進行免疫組化 SABC法染色觀察。具體操作技術按說明書進行。每批染色均用已知的陽性切片作為陽性對照,PBS代替一抗作陰性對照。

1.3 結果判斷

采用半定量積分法,將染色強度分為 3級:無著色記 1分,淺著色記 2分,棕黃色記 3分;按陽性細胞的百分比分 3級:≤25%為一級記 1分,26%～75%為二級記 2分,≥76%為三級記 3分。每張切片最后的得分為兩次評分的乘積(1～9),≥3分為陽性,＜3分為陰性。

1.4 統計學分析

應用 SPSS 13.0統計軟件對數據進行統計分析,采用 χ2檢驗。

2 結果

2.1 ADAM9在甲狀腺癌中的表達情況

ADAM9以胞質著色為主,部分胞膜著色。甲狀腺癌組織中 ADAM 9的陽性率為 64.3%(27/42)。

2.2 ADAM9表達與甲狀腺癌臨床病理因素的關系

ADAM9表達與浸潤程度和頸淋巴結轉移有關(P＜0.05),而與病理分型和 TNM分期無關(P＞0.05),見表 1。

表1 ADAM 9表達與甲狀腺癌臨床病理因素的關系

3 討論

ADAM9是金屬蛋白酶解離素家族中的一員,在多種腫瘤中高表達,能提高腫瘤細胞的侵襲和轉移的能力,并和預后有關[1～4]。Lendeckel等[1]研究發現,ADAM9在乳腺癌中高表達,有淋巴結轉移者更明顯,主要表達于癌細胞的胞質中,并且和乳腺癌的預后有關。ADAM9通過其蛋白水解活性改變細胞分子表面活性狀態,清除表皮生長因子的部分底物,促進腫瘤細胞的增殖生長。Mazzocca等[2]研究發現,ADAM9通過和腫瘤間質相互作用分解層黏連蛋白增強肝癌細胞的侵襲性,其高表達在腫瘤與基質的連接處,尤其在周圍基質與腫瘤緊密連接處的細胞中,而肝臟細胞中 ADAM9陰性表達。ADAM9通過作用于肝腫瘤細胞與細胞間的基質使原發腫瘤細胞進入淋巴管或血管內,使腫瘤細胞在遠處器官種植。Yamad等研究發現[3],ADAM9在胰腺癌中高表達,并參與腫瘤進展。ADAM 9還在胃癌中高表達,和胃癌的發生發展有關[4]。

本研究結果顯示 42例甲狀腺癌中有 64.3%表達ADAM9,與文獻報道的其它系統腫瘤情況相符[1～4]。本研究還發現,累及或超出甲狀腺被膜的甲狀腺癌中ADAM9表達明顯高于腫塊限于甲狀腺內者;伴頸淋巴結轉移的甲狀腺癌中 ADAM9表達明顯高于不伴頸淋巴結轉移者。這提示 ADAM9高表達與甲狀腺癌的浸潤轉移及病期進展有關。ADAM9主要通過 Nortch和EGFR途徑參與腫瘤的發生發展和侵襲轉移[5]。ADAM9的這些作用和 TNF-α、EGF、整和素家族等有關[5]。本研究還發現,ADAM9表達與病理分型和TNM分期無關。

綜上所述,ADAM9可能是甲狀腺癌易出現浸潤轉移的 1個重要生物學指標,對評估甲狀腺癌生物學行為及進展程度可能具有一定的臨床價值。至于 ADAM9在甲狀腺癌侵襲轉移過程中的分子生物學機制目前尚不清楚,有待于進一步研究闡明。

[1] Lendeckel U,Kohl J,Amdt M,et al.Increased expression of ADAM fam ily members in human breast cancer and breast cancer cell lines〔J〕.J Cancer Res Clin Oncol,2005,131(1):41.

[2] Mazzocca A,Coppari R,De Franco R,et al.A secreted form of ADAM 9 p romotes carcinoma invation through tumor-stromal interactions〔J〕.Cancer Res,2005,65(11):4728.

[3] Yamad D,Ohuchida K,Mizumoto K,et al.Increased expression of ADAM 9 and ADAM 15 Mrna in pancreatic cancer〔J〕.Anti-cancer RES,2007,27(2):793.

[4] Carl-McGrath S,Lendeckel U,Ebert M,et al.The disintegrin-metalloproteinases ADAM9,ADAM 12,and ADAM15 are upregulated in gastric cancer〔J〕.Int JOncol,2005,26(1):17.

[5] Mazzocca A,Coppari R,De Franco R,et al.A secreted form of ADAM 9 promotes carcinoma invation through tumor-stromal interactions〔J〕.Cancer Res,2005,65(11):4728.