鹽酸羅哌卡因明膠微球的制備及質(zhì)量評價

陸 璐，郭 麗

（1.中國人民解放軍總醫(yī)院藥檢室，北京 100853；2.中國人民解放軍第61785部隊(duì)門診部，北京 100075）

羅哌卡因（ropivacaine，ROP）是一種適用于硬膜外腔阻滯和術(shù)后鎮(zhèn)痛安全有效的局部麻醉藥。為避免在鎮(zhèn)痛期間內(nèi)重復(fù)和持續(xù)給藥給患者帶來的不便，需要制備長效制劑。近年來，長效局部麻醉制劑的研制方向已轉(zhuǎn)向各種形式的局部麻醉藥微球的制備[1]。藥物微球是一種新的給藥系統(tǒng)，為近年來研究較多的藥物控釋和緩釋劑型。筆者以明膠作為藥物微球的載體，制備了鹽酸羅哌卡因明膠微球并對其特性進(jìn)行分析，以紫外分光光度（UV）法測定鹽酸羅哌卡因含量，確定最佳制備工藝，報道如下。

1 儀器與材料

IKA攪拌器（IKA廣州分公司）；KQ-50DB型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；DC-2006型低溫恒溫槽（寧波新芝生物科技股份有限公司）；電子天平（北京塞多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）；UV 2201型紫外分光光度計（日本島津公司）。鹽酸羅哌卡因（濟(jì)南誠匯雙達(dá)化工有限公司，批號為060923）；藥用明膠（上海明膠廠）；蒸餾水（石家莊四藥有限公司）；戊二醛（分析純，美國）；脂肪山梨坦85（span 85）、異丙醇、丙酮、乙醚、液狀石蠟均為分析純（北京化學(xué)試劑公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 鹽酸羅哌卡因明膠微球制備

采用乳化-交聯(lián)法[2-3]制備微球。將明膠與鹽酸羅哌卡因粉以一定比例溶于1mL蒸餾水中，混勻制成A液；B液由液狀石蠟、脂肪山梨坦85制成，在60℃水浴中以300 r/min的攪拌速度將A液滴加于B液，乳化10min后改為冰浴，1h后滴加適量戊二醛，繼續(xù)攪拌1h后加入適量異丙醇，攪拌10min后超濾。以丙酮和無水乙醚洗滌4次，真空干燥后，篩分稱重，分裝壓蓋，即得。

2.2 鹽酸羅哌卡因含量測定（UV法）

最大吸收波長選擇：精密稱取鹽酸羅哌卡因適量，以0.9％氯化鈉溶液溶解，配制成200!g/mL的溶液，以0.9％氯化鈉溶液為空白對照，按UV法[2005年版《中國藥典（二部）》附錄"A]在200～400 nm波長范圍內(nèi)掃描。結(jié)果表明，鹽酸羅哌卡因在260 nm波長處有最大吸收（見圖1）。

圖1 紫外分光光譜圖

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：精確稱取鹽酸羅哌卡因40 mg，置100 mL量瓶中，加0.9％氯化鈉溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻。分別精密吸取上述溶液0.4，0.6，0.8，1.0，1.2，1.4 mL，置 10 mL量瓶中，加0.9％氯化鈉溶液稀釋至刻度，搖勻。在（260±2）nm波長處以紫外分光光度計測定吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)吸收曲線，得線性回歸方程 A=0.011C+ 0.004 3，r=0.999（n=6）。結(jié)果表明，鹽酸羅哌卡因檢測質(zhì)量濃度在16～40!g/mL范圍內(nèi)與吸光度線性關(guān)系良好。

回收率試驗(yàn)：將標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制項(xiàng)下的鹽酸羅哌卡因溶液，以0.9％氯化鈉溶液為空白，平行操作3次。結(jié)果見表1。

精密度試驗(yàn)：取回收率試驗(yàn)中質(zhì)量濃度為20!g/mL的溶液，連續(xù)測定5 d，分別于不同時間點(diǎn)進(jìn)行測定。結(jié)果日內(nèi)平均回收率為（100.02±0.08）％，RSD=0.08％（n=5）；日間平均回收率為（100.04±0.4）％，RSD=0.4％（n=5）。

2.3 載藥量、包封率及產(chǎn)率測定

精密稱取40mg鹽酸羅哌卡因明膠微球，加熱，溶于1mol/L的NaOH中，冷卻后定容為50mL，從中吸取5mL，加入1mol/L的鹽酸溶液5mL中和，并加蒸餾水定容至50mL，以紫外分光光度計測定吸光度并以回歸方程計算含量。載藥量（DCP）=（微球中所含藥量/微球的總質(zhì)量）×100％；包封率（DEn）=（已包裹的藥物總量/投入系統(tǒng)中的總藥量）×100％；產(chǎn)率=（制成微球質(zhì)量/投入所有成分的質(zhì)量）×100％。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果（n=3）

2.4 微球質(zhì)量評定

通過微球的跨距（S1）、產(chǎn)率（S2）、包封產(chǎn)率（S3）、載藥量（S4）等指標(biāo)的求和值來衡量，包埋法和溶劑揮發(fā)法制備的微球求和值S=S2+S3+S4-S1。

2.5 微球制備工藝優(yōu)選

結(jié)果見表2。

表2 不同投料比制備的樣品特性比較±s，n=5）

表2 不同投料比制備的樣品特性比較±s，n=5）

注：與投料比分別為1∶2和1∶1.5時比較，△P＜0.05，▲P＜0.01。

投料比1∶3 1∶2.5 1∶2 1∶1.5形態(tài)光滑圓整光滑圓整光滑圓整光滑圓整大?。?m）34.3±14.8 28.9±9.8 28.5±18.7 23.5±9.5產(chǎn)率（％）70.5±2.7 70.7±3.3 60.3±4.3 61.6±2.0包封率（％）73.5±1.7 74.8±0.9 65.8±2.8 65.3±1.4載藥量（％）18.4±0.4 21.4±0.3 21.9±0.9 26.1±0.6求和值S 161.2±4.7△166.0±2.9▲146.2±6.2 152.0±2.3

3 討論

乳化-交連法制備鹽酸羅哌卡因明膠微球，工藝簡便，載藥量較高，具備載藥微球的特性。UV法測定鹽酸羅哌卡因含量具有簡便、快捷、結(jié)果準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)。本試驗(yàn)自制的鹽酸羅哌卡因明膠微球成球性好、載藥量高，計算出的載藥量為21.4％，藥物包封產(chǎn)率為74.8％。通常求和值越大，其質(zhì)量越好[4]。制備工藝優(yōu)選中鹽酸羅哌卡因與明膠最佳投料比為1∶2.5。

[1]周新騰，潘衛(wèi)三，張汝華.局部麻醉藥生物可降解緩釋微球的研究進(jìn)展[J].中國新藥雜志，2001，10（9）：658-660.

[2]陶利軍，孫永海，張 宏，等.亞甲藍(lán)磁性明膠微球的制備及特性試驗(yàn)[J].中國藥師，2006，9（1）：24-26.

[3]王 勇，孫永海，劉健行，等.阿霉素磁性明膠微球制備及鎮(zhèn)痛作用的研究[J].軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院學(xué)報，2006，27（6）：420-422.

[4]Gruttner C，Teller J.New types of silica-fortified magnetic nanoparticles as tools for molecular biology applications[J].Journal of Magnetism and Magnetic Materials，1999，194（1）：8-15.