中醫藥治療慢性瘡瘍實驗研究概況

慢性瘡瘍包括中醫所稱的“臁瘡”、“褥瘡”、“頑瘡”等疾患,是臨床難治性疾病之一。它的嚴重性和發病率的增加引起國內外學者的高度重視。其主要病理機制是局部有效循環血量相對不足, 局部組織營養狀態差,抵抗力低下，在此基礎上出現反復感染形成惡性循環，故創面難以愈合。中醫藥治療慢性難愈性潰瘍具有自身的優勢和特點，近年來很多學者對中藥治療瘡瘍的作用進行了實驗性的研究，在揭示外用中藥愈創的機制方面已初見成效。

1 促進創面的血液循環和對血管生成的影響

局部有效循環血量不足是慢性潰瘍難以愈合的直接原因，因而促進創面的血液循環對于促進創面愈合非常重要。

張穎等[1]研究發現枳實提取物可以改善血液循環，調和氣血的作用,有消滯散瘀、通經止痛之功，從而有利于傷口愈合。洪曉華等[2]研究表明表明，歸知糖疽顆粒有促進糖尿病大鼠皮膚潰瘍模型皮膚潰瘍創面愈合的作用，降低血糖、改善微循環障礙作用是其治療該病的關鍵。席建元等[3]通過實驗證實改善局部血液循環,是象皮生肌散促進家兔皮膚潰瘍模型生肌長皮作用的機理之一。闕華發等[4]探討補研究提示補益氣血方劑如四君子湯、四物湯和八珍湯均能上調血管內皮因子表達水平,誘導血管新生,在一定程度上改善局部組織的缺血狀態,促進創面修復愈合。韓旭等[5]研究發現，蜂蠟軟膏能明顯提高SD大鼠慢性皮膚潰瘍創面新生毛細血管數，從而后改善創面微循環，加速組織修復過程。

2 對創面生長因子的作用

表皮細胞生長因子、血小板源性生長因子、轉化生長因子-β、堿性成纖維細胞生長因子、血管內皮細胞生長因子等在創傷愈合過程具有重要的作用,它們可以影響創傷修復過程中細胞的增殖、遷移、細胞外基質的合成和釋放等，生長因子含量的減少將影響愈合過程[6-8]。

復黃生肌愈創油膏,是唐漢鈞教授長期治療慢性皮膚潰瘍的經驗方,王林揚等[9]探討了其對醋酸可的松造成SD大鼠慢性皮膚潰瘍模型堿性成纖維細胞生長因子mRNA的生成、表皮細胞生長因子mRNA表達水平的影響，結果表明其促進慢性皮膚潰瘍創面修復的機制與其上調堿性成纖維細胞生長因子mRNA的生成、表皮細胞生長因子mRNA表達水平，促進細胞增殖有關。裴憲武等[10]通過觀察不同創面的組織學變化、堿性成纖維細胞生長因子的表達和創面的愈合率來探討紫草油促進創面愈合的分子生物學機制，結果提示紫草油可能是通過提高創面組織堿性成纖維細胞生長因子的表達來完成創面的修復過程。宋清華等[11]觀察到，積雪草主要成分積雪甙可以促進血管內皮細胞生長因子 mRNA的表達,有利于傷口的愈合。王振宜等[12]用生肌化瘀方對SD大鼠背部全層皮膚缺損創面TGF-β1、TGF-β3水平進行動態影響研究，結果發現生肌化瘀方有調節創面TGF-β1、TGF-β3分泌的作用，以益于加速創面愈合、減少瘢痕形成。溫腎健脾方由黃芪、茯苓、肉桂、當歸、刺五加組成, 曹永清等[13]研究其對慢性創面愈合的影響及可能作用機制，結果提示：溫腎健脾方有促進大鼠慢性難愈創面修復的作用,其機制與調節細胞周期,上調EGF、TGF-β1細胞因子蛋白表達水平。

3 對金屬蛋白酶及Ⅰ、Ⅲ型膠原的研究

國內外對慢性皮膚潰瘍治療的研究多著眼于各種生長因子，但是臨床試用的效果并不理想，其主要原因是慢性難愈性創面中有大量的蛋白酶，如金屬酶，分解了傷口細胞分泌的內源性生長因子或給予的外源性生長因子。在創面組織愈合中,膠原代謝的結果直接影響創面的修復質量,其中起主要作用的是Ⅰ、Ⅲ型膠原。Ⅰ型膠原起支架作用,Ⅲ型膠原決定膠原纖維的直徑大小和彈性好壞,Ⅰ、Ⅲ型膠原含量的比值關系到最終的修復結果[14]。

董莉等[15]采用體外養創面肉芽組織成纖維細胞，以乳鼠皮膚成纖維細胞作對照，加入生肌方、化瘀方及生肌化瘀方大、小劑量藥物血清，檢測成纖維細胞Ⅰ、Ⅲ型膠原的含量。結果表明，生肌方能夠明顯提高創面成纖維細胞Ⅰ、Ⅲ型膠原含量；化瘀方能夠降低創面成纖維細胞Ⅰ、Ⅲ型膠原含量，生肌化瘀方大、小劑量組Ⅰ、Ⅲ型膠原含量與正常組比較差異均無顯著性，因此認為生肌化瘀方能夠促進創面修復，其可能的作用機理是通過調節Ⅰ、Ⅲ型膠原的比值來調控Ⅰ、Ⅲ型膠原代謝，達到創面愈合及抑制瘢痕生長的目的。袁亮等[16]以生肌紅粉膏作為中醫祛腐生肌法的代表藥,對家兔創傷感染性創面模型進行換藥,動態對比觀察祛腐藥在換藥過程中對創面金屬蛋白酶-1，金屬蛋白酶-3(MMP-1、MMP-3)、細胞凋亡、創面溶菌酶含量的影響。觀察發現:生肌紅粉膏能夠提高創面MMP-1、MMP-3、創面溶菌酶含量、并促進創面成纖維細胞原位凋亡。從而認為其祛腐生肌的可能機理是促進金屬蛋白酶MMP-1、MMP-3的活性,增強巨噬細胞溶菌酶作用以及刺激局部細胞凋亡等,促進局部腐爛壞死組織的清除,從而達到祛腐作用。盛巡等[17]通過觀察Ⅰ、Ⅲ型膠原含量及Ⅰ、Ⅲ型膠原比值,并觀察金屬蛋白酶-1、-13(MMP-1、-13)、金屬蛋白酶抑制劑-1(TIMP-1)水平及MMP-1、-13與TIMP-1比值來研究瘍愈涂劑促進糖尿病遲緩愈合傷口的修復作用及其分子機制，研究表明瘍愈涂劑可能通過調節影響膠原代謝的MMPs(金屬蛋白酶)、TIMPs(金屬蛋白酶抑制劑)表達平衡,促進膠原的合成和沉積,從而加速創面的愈合。

4 調控創面修復過程中TGF-β1信號轉導分子修復基因Smad3等的表達

生長因子(表皮細胞生長因子、血小板源性生長因子、轉化生長因子-β、堿性成纖維細胞生長因子、血管內皮細胞生長因子)參與調控創傷修復的全過程。生長因子通過與細胞膜上特定的高親和性受體結合而啟動其活性,然后通過信號轉導而發揮作用[18]。

秦海洸等[19]采用改良付氏大鼠模型為研究對象, 研究補虛祛瘀法促進慢性難愈性創面愈合的機理,實驗發現動物造模給藥第18天時,復黃生肌愈創油膏組TGF-β1表達明顯高于生理鹽水組,而修復蛋白Smad3分子的表達明顯低于生理鹽水組, 作者認為復黃生肌愈創油膏在瘢痕形成重塑期的是通過對TGF-β1→Smad3信號轉導通路的調控作用,來促進創面的修復。闕華發等[20]以糖尿病大鼠背部全層皮膚缺損開放性創面為模型，探討益氣化瘀方(生黃芪、太子參、桃仁、地龍為主)對糖尿病潰瘍大鼠Smad3、Smad4表達的影響，蛋白質印跡(Western blot)檢測結果顯示，益氣化瘀中藥能明顯促進糖尿病潰瘍大鼠的創面愈合，下調Smad3、Smad4的表達水平是其作用機制之一。

5 對纖維結合蛋白(fibronectin, FN)的影響

FN是一種高分子糖蛋白, 與膠原具有特別的親和力，參與傷口愈合的全過程，FN含量的提高有利于創傷愈合。

黃灶華等[21]通過實驗研究發現,復黃膏可使創傷大鼠傷口愈合時間明顯縮短,還可顯著提高創傷大鼠血清及肉芽組織中纖維結合蛋白含量,提示該藥對血清及肉芽組織中FN含量有一定的調節作用,其提高血清及肉芽組織中的FN含量可能是促進傷口愈合的機制之一。曹永清等[13]研究發現, 溫腎健脾方亦可促進間質FN的表達。

6 對創面氨基酸含量的影響

創面營養對于愈合起一定作用，不可忽視。王林揚[22]研究復黃生肌愈創油膏促愈作用，發現復黃生肌愈創油膏組肉芽組織中天冬氨酸、蘇氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、組氨酸、賴氨酸、精氨酸11種氨基酸含量與模型組相比, 差異有顯著性意義，提示復黃生肌愈創油膏可能是通過影響肉芽組織中有關氨基酸的含量以促進創面的良好愈合。

7 調節創面免疫功能

機體免疫功能的增強有利于創面的愈合.羅宇慧等[23]通過金黃色葡萄球菌和化膿性鏈球菌感染所致的大鼠瘡瘍模型,證實祛腐生肌軟膏可增加補體C3、IgA及IgM的含量，增加膿性分泌物中溶菌酶含量，并增加胸腺指數及脾臟指數的作用，從而增強機體免疫功能，促進創面的愈合。馬忠麗等[24]發現，斂瘍散對實驗動物的特異性免疫和非特異性免疫功能均具有增強作用,表現為巨噬細胞百分率和吞噬指數均明顯地提高,這是其對慢性皮膚潰瘍的修復的作用機制之一。

8 對溶菌酶、pH值的影響

鐘勇萍等[25]將實驗性家兔進行瘡瘍造模，探討復方蒼耳蟲油膏促進瘡瘍愈合的機理，實驗結果表明，復方蒼耳蟲油膏能有效地改善瘡面pH值,增加瘡面溶菌酶含量,加速愈合。昌蘭芳等[26]用黃及瘡瘍膏對大鼠瘡瘍模型進行治療研究，觀察膿液溶菌酶的含量、膿液的變化及傷口的愈合情況，結果表明，黃及瘡瘍膏能顯著提高膿液溶菌酶的含量，促進膿液排出，加速傷口愈合，為有效的瘍科外用藥。

9 其它研究

張甘霖等[27]研究發現血余蛋黃油能夠促進表柔比星致小鼠皮膚潰瘍瘡面結痂,縮短愈合時間;其作用機制與其能夠促進瘡面表皮細胞及膠原修復,降低瘡面組織脂質過氧化損傷,提高抗氧化能力有關。李萍[28]等觀察瘍愈涂劑對鏈脲佐菌素(STZ)引起的糖尿病大鼠傷口細胞增殖及體外對成纖維細胞增殖遷移的作用，與模型組相比,不同劑量的瘍愈涂劑均能明顯縮短STZ誘發糖尿病大鼠復合創傷后創面的愈合時間,提高創面愈合率，瘍愈涂劑細胞核增殖抗原(PCNA)表達明顯高于模型組，從而得出結論:瘍愈涂劑可能通過促進糖尿病大鼠創面成纖維細胞的增殖,從而加速創面的愈合。董建勛等[29]采用“激素干預—皮膚缺損—細菌感染”復合因素疊加法制備慢性皮膚潰瘍大鼠模型。實驗觀察大鼠一般生活行為,檢測創面分泌物溶菌酶含量,血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)及血栓素B2(TXB2)含量及組織病理改變，結果發現與模型組比較,傳統回陽生肌膏及其脂質體凝膠治療組創面分泌物溶菌酶含量顯著升高(P<0.05或P<0.01);血清中TNF-α和TXB2的含量顯著下降(P<0.05或P<0.01);創面肉芽組織增多,膠原合成旺盛,皮膚結構趨于完整。

10 結語

縱觀上述文獻，中醫藥促進創面愈合等方面實驗研究發現中醫藥創面愈合的主要作用機制可能是通過調控生長因子的合成和分泌,促進細胞分裂增殖,刺激創面新生血管形成,改善創面的血液循環,調控膠原的合成及代謝,調控創面修復過程中TGFβ1信號轉導分子修復基因Smad3的表達,調節創面修復基質形成,營養創面等發揮其多靶點、多環節、多層次的綜合調控作用,促進創面愈合。研究資料表明,中醫藥具有肯定的促進潰瘍面愈合的作用,為慢性瘡瘍的中醫藥防治研究開辟了新的途徑。但目前大多研究尚處于起步階段,中藥促進潰瘍面愈合作用機制及其藥效物質基礎尚有待進一步闡明,今后應加強中醫藥促中醫藥促進創面生理性修復及組織再生的研究,并從細胞學、分子學等多個水平作更為深入的研究和探討，以期全面闡明中藥治療瘡瘍的作用機理,為中醫藥臨床治療提供更多的科學實驗根據。

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