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中藥平車前不同部位總黃酮含量測定

2010-04-03 06:57:08王恩張小華
長春中醫藥大學學報 2010年1期
關鍵詞:黃酮中藥

林 鶯,王恩,張小華 ,李 芳

(濱州醫學院,山東 煙臺 264003)

中藥平車前不同部位總黃酮含量測定

林 鶯,王恩,張小華 ,李 芳

(濱州醫學院,山東 煙臺 264003)

目的提取平車前不同部位總黃酮并測定其含量。方法用索式提取器乙醇抽提平車前不同部位總黃酮,獲得乙醇提取液,利用減壓濃縮法蒸去乙醇獲得總黃酮提取液,并用蘆丁標準曲線法計算平車前不同部位的總黃酮含量。結果平車前穗、葉、根中總黃酮含量分別為4.04%、2.48%、2.05%。結論 平車前全草均含有黃酮類成分,其中穗中含量最高,含有較高的鎮咳有效成分。因此,平車前全草均可用于總黃酮類藥用資源開發。

平車前;總黃酮;微波提取

車前是車前科車前屬植物,又稱車前菜、牛舌草、車輪菜、豬耳草等。車前全身是寶,嫩可食用,成可入藥。車前作為一味常用中藥,始載于《神農本草經》,列為上品,被國家衛生部列入可用于保健品生產的原料名單[1-2]。車前科植物有3屬約260種。而我國僅有車前屬1屬,13種[3]。目前開發用于藥用的主要是大車前(Plantago major L.)、車前(plantago asiatical L.)和平車前(Plantago depresaa Willd.)[4]。車前味甘、寒,無毒,具有清熱解毒、祛痰、止咳、利尿等作用[5],主氣癃止痛,利水通小便,除濕痹,久服輕身耐老[4,6-7]。現代藥理研究表明,車前全草中主要有效成分為烏蘇酸、車前苷、環烯醚苷類、黃酮類成分[8]。其中黃酮類化合物為鎮咳主要成分,車前草中的黃酮及其苷類對呼吸系統有著明顯的作用。車前苷作用于呼吸中樞,具有明顯的鎮咳作用,通過興奮分泌神經可促進氣管、支氣管液及消化液的分泌,且無溶血作用。苯乙酰咖啡酰糖酯類化合物能夠抑制環腺苷酸磷酸二酯酶與5-脂氧合酶,說明總黃酮類物質是車前鎮咳抗炎活性的主要物質基礎[3,9-10]。但是在不同植物的不同部位,總黃酮的含量可能不同,這對于藥材的采集及中藥有效成分的提取都具有至關重要的關系。現在對車前總黃酮含量的研究多集中在對大車前的研究,而對平車前的研究較少。為了充分利用中藥資源,了解不同植物來源的中藥有效成分,本文選取平車前(Plantago depresaa Willd.)為供試材料,通過對平車前不同部位總黃酮含量的研究,探索平車前體內總黃酮的分布,為中藥有效成分提取提供基礎理論依據。

1 材料與儀器

722型分光光度計(上海分析儀器廠)。試劑標準品蘆丁為國藥集團化學試劑有限公司生產。所用試劑均為分析純,所用水為蒸餾水。所用平車前,7月采集于本地,自然晾干,待用。

2 方法與結果

2.1 總黃酮的提取[7,11]精密稱取平車前穗、葉、根各1 g于索氏提取器中,加入70%的乙醇100 mL及少許CaCO3,提取8 h,提取液減壓濃縮蒸去乙醇。濃縮液于分液漏斗中用相同體積的乙醚洗2~3次,以除葉綠素及臘質等,然后用 70%的乙醇定容至100 mL,待測。

2.2 繪制標準曲線[11]精密稱取蘆丁10 mg,用70%的乙醇溶解并定容至100 mL,使其濃度為100 μ g/mL。將蘆丁溶液用70%的乙醇稀釋成0,5,10,15,20,25,30,35,40,45,50,55,60,65,70,75,80,85,90,95,100 μ g/mL,各取 1 mL 于試管中 ,加 70%的乙醇 1 mL,加入300 μ L 5%的NaNO2,6 min后加入300 μ L 10%的 Al(NO3)3 溶液 ,6 min 后再加入 2 mL 4%NaOH,10 min后于分光光度計波長510 nm處測定A值。繪制濃度CA標準曲線。

2.3 總黃酮含量的測定[11]取經稀釋過的樣品溶液各1 mL,按上述同樣的步驟和方法測定得A值,從標準曲線查得樣品中總黃酮的含量(μ g/mL),測得中藥車前不同部位的總黃酮含量,以蘆丁計分別為:穗4.04%,葉 2.48%,根 2.05%。

2.4 回收率試驗 精密稱取車前草適量,加入蘆丁對照品適量,按樣品液制備和樣品測定方法操作,測得平均回收率為98.7%,RSD=1.63%(n=6)。

2.5 精密度試驗 精密吸取蘆丁對照品溶液2.0 mL,按2.2項下方法連續測定6次,測定其吸收度后RSD=0.32%(n=6)。表明儀器精密度良好。

3 討論

黃酮類化合物具有降脂、抗血栓、抗氧化、降糖、鎮咳抗炎等多種生理活性。分析結果顯示,平車前各部位均含黃酮類成分,其含量穗>葉>根,可見,車前草的穗、葉、根中均含有鎮咳活性,有效成分含量以平車前穗最多。

本試驗證明平車前全體均含有鎮咳抗炎成分總黃酮類化合物,因此,平車前全草均可用于總黃酮類藥用資源開發。

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[11]張志良,翟偉箐.植物生理學實驗指導[M].北京:高等教育出版社,2003:173.

R284.2

A

1007-4813(2010)01-0129-02

林 鶯(1980-),女,碩士研究生,講師。研究方向:藥用植物學。

2009-07-26)

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