王宏艷 周秀玉 王玉國 崔元日
1 黑龍江省大慶油田總醫院病理科(163000)
2 黑龍江省大慶油田總醫院神經內科(163000)
在外檢標本中,宮頸錐切組織比較多見,所以在實際工作中,做好宮頸錐切組織制片具有重要意義。通常情況下,宮頸錐切組織主要成分為肌肉組織和結締組織,制作切片時比較難切,主要原因一是硬、脆,二是切片易厚、易碎,三是容易脫片[1-3]。每天科室可收到20~30例宮頸錐切組織,如果制片不佳,就會拖延正常工作進行,而且無形中會加大科室工作量。我們通過多年的實踐總結,對宮頸錐切組織的制片進行了改進,取得良好效果。
現總結改進方法如下。
組織塊不宜過大,大約0.8cm×0.5cm×0.2cm。如果組織過大會導致標本在正常處理時間內處理效果差。
收到標本后,為了防止宮頸錐切組織固定不充分,而影響切片質量,導致延誤診斷。尤其是在北方寒冷季節里,12月至2月更容易出現。為了克服這一現象,我們首先從增強固定效果來解決這一問題。常規標本選用在常溫下10%福爾馬林固定3h即可,而宮頸錐切標本的固定就需要4h左右,現在我們選用20%福爾馬林固定液,并置于60℃環境中作為增強固定,只需要2h左右即可[4]。
由于用乙醇脫水時需要時間長,往往會造成組織變硬變脆,所以為了防止宮頸錐切組織過硬過脆,不應采用乙醇脫水。我們的改進方法是直接用丙酮脫水,因為丙酮比乙醇浸透組織速度快,脫水時間短,所以組織不宜變硬。具體操作中,要視組織大小,來確定脫水時間,一般來說,脫水時間不易過長,2~3h即可。
二甲苯雖然是組織的良好透明劑,但它容易使組織收縮、變脆,使含有肌肉纖維多的組織變得堅硬難切,使含有膠質豐富的組織發脆,影響切片。具體操作中,我們在常規透明程序中將二甲苯改為松節油,因為松節油對組織作用比較柔和,應用時間要相對長一些。改善以往病理常規制片,達到良好效果[5]。
浸蠟宜用58~60℃熔點石蠟,時間3h,每1h更換一次石蠟,石蠟的熔點不得超過60℃,如果熔點過高,會導致宮頸錐切組織變硬,而中心浸蠟不佳,浸好蠟的組織應該立即包埋于60℃的石蠟中。
切片時要注意以下幾點:①蠟塊不要凍得過硬,否則組織硬脆,切片時易破碎。②修蠟塊時一般用8~10μm,不能修的太厚,易使組織從蠟塊上脫落,很難得到完整切片。③切片要用一次性鋒利的刀片,切片厚為3μm,不易過厚,否則染色時易脫片或染色過深,連續切片時可向蠟塊組織輕輕哈氣,以使組織軟化,這樣切出的宮頸錐切組織連續完整,不易破碎且平展。④烤片溫度應于70℃左右,不易過高,時間為1h[6]。
多年實踐證明,要制作高質量的宮頸錐切組織切片,對病理技術人員的要求是首先要熱愛病理技術工作,有敬業精神,要有高度的責任心,其次是要注意操作的每個細節,執行規范化操作程序,認真摸索,總結經驗,就一定能獲得一張精良的宮頸錐切組織HE切片。
[1]龔志錦,詹熔洲.病理組織制片和染色技術[M].上海:科學技術出版社,1994:3-24.
[2]倪燦榮.免疫組織化學實驗新技術及應用[M].北京:北京科學出版社,1993:165-166.
[3]張哲,陳輝.實用病理組織染色技術[M].沈陽:遼寧科學技術出版社,1988:175.
[4]程國平,徐建業,胡錦林等.超聲及微波輻射技術在制備穿刺活檢組織切片中的應用[J].診斷病理學雜志,2007,14(6):475.
[5]印志琪,王政祿,張學義等.一種改良的肝穿刺活檢標本快速制片方法[J].診斷病理學雜志,2007,14(1):80.
[6]蔡文琴,王伯云.實用免疫細胞化學與核酸分子雜交技術[M].成都:四川科學技術出版社,1994:524.