牙周病患者唾液酶活性病理改變的初步探討

陳于思

(重慶市三峽中心醫(yī)院檢驗科,萬州404000)

目前,牙周病常通過牙周探診深度(periodontal pocket probing depth)、牙周附著水平(clincalattachment level)、牙周袋出血(bleeding of pockets)和X-射線檢測骨吸收狀況等手段來診斷。本文嘗試檢測唾液中一些實驗室方便檢測的酶類,探討其與牙周病的病理關系,現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 牙周病患者52例,男∶女為23∶29,年齡21～62歲,平均43歲。本組受試對象中不包括孕婦、哺乳期婦女、絕經(jīng)后婦女和經(jīng)各類藥物治療的個體。所有受試者除患有牙周病外,其他各組織器官健康狀態(tài)良好,未發(fā)現(xiàn)任何不適,也沒有全身性疾病和既往病史。受試者由主治醫(yī)師職稱以上的3名牙科醫(yī)師進行雙盲問診,將至少有2位結(jié)果一致的受試者按病情分為3組,其分組所依照的診斷標準是:牙周袋探測有出血,牙周袋探測深度小于或等于4 mm者,確診為牙齦炎(G組,n=18);牙周袋探測深度為4～6 mm者,診斷為中度牙周炎(M組,n=23);牙周袋探測深度大于或等于6mm者,診斷為重度牙周炎(S組,n=11)。另外,隨機選擇健康者20例作為對照(H 組),男∶女為12∶8,年齡27～56歲,平均40歲。

1.2 唾液樣品 晚上就寢前小心而仔細地刷牙(切勿人為引起出血),第2天晨起后于早餐前用溫水清潔口腔,5 m in后將唾液收集入潔凈玻璃試管,立即送檢。樣本以1 000 r/min離心10m in,取上清液上機檢測。

1.3 測定方法 在全自動生化分析儀Intergra400 plus(Rch,德國)上測定樣本中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、乳酸脫氫酶(LDH)、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(GGT)和堿性磷酸酶(ALP),所有試劑均購自重慶亞中公司。

1.4 統(tǒng)計學方法 用單因素方差分析(ANOVA)比較各組牙周病患者和健康對照者間酶活性,q檢驗檢測各組間的差異性,P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。用受試者工作曲線(receiver operating characteristic curves,ROC)選擇最佳判斷點、敏感度(Se)和特異性(Sp),并計算其陽性預告值(PPV)和陰性預告值(NPV)。用SPSS13.0統(tǒng)計軟件處理。

2 結(jié) 果

2.1 各病例組和健康對照組的唾液酶水平 見表1。方差分析顯示所觀察5種酶均存在組間差異,且差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。進一步通過q檢驗對各個受試組的唾液酶水平進行了比較,結(jié)果見表2。

2.2 各種酶對診斷牙周病的ROC曲線 見圖1。其診斷有效性從表3可見,當以最大Youden指數(shù)(YImax)選擇判斷點時,ALT、AST、GGT、ALP和 LDH 的最佳判斷點依次是 26、30、32、132、228 u/L。曲線下的面積(AUC)和 YImax指示 LDH對診斷牙周病的有效性最高,其次是AST、GGT、ALT和ALP。但AST、ALP。和LDH具有相同的特異度(Sp),均為95%。而敏感度(Se)最高的是GGT(84.6%),但其特異性最低,僅為55%

表1 各組受試者唾液酶水平(±s)

表1 各組受試者唾液酶水平(±s)

項目 H組(n=20) G組(n=18) M組(n=23) S組(n=11) T組(n=72) F,P A LT 19.0±9 29.0±13 30.0±14 39.0±17 28.0±14 5.681,0.002 AST 18.0±9 27.0±14 33.0±15 40.0±19 28.0±16 7.741,0.000 GGT 36.0±20 54.0±30 80.0±63 113.0±78 66.0±56 6.481,0.001 A LP 91.0±31 136.0±59 120.0±35 162.0±70 123.0±52 5.529,0.001 LDH 183.0±25 282.0±93 256.0±99 454.0±216 272.0±139 14.297,0.000

表2 不同組間受試者唾液酶水平的比較(q,P)

表3 唾液酶水平對牙周病診斷的有效性

圖1 受試者ROC

3 討 論

血清酶學檢查常用于許多疾病的診斷,牙周病的診斷卻幾乎沒有實驗室結(jié)果作為輔助手段,主要依靠臨床體征,如探診深度、牙齦指數(shù)、探診出血以及通過影像學檢查牙槽骨喪失情況來診斷。這些手段有益于對既往病史的確定,也有利于檢查牙周健康情況,但對牙周病患者牙周受損風險只能提供極有限的信息。從循證醫(yī)學角度講,這給牙周病的診斷帶來了很大難度。唾液作為機體重要的生物樣本之一,正日益用于某些疾病的診斷和(或)發(fā)病機制的探討,如白血病、干燥綜合征、艾滋病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡和糖尿病患者都有唾液檢測的相關報道[1]。有關唾液樣本成分的檢測,報道最多的是對其所含酶類水平變化的研究[1-2]。

當牙周組織發(fā)生病變時,作為應答機體從細胞間質(zhì)、上皮細胞或細菌細胞中釋放出許多酶族,如組織降解酶、彈性蛋白酶、膠原酶、明膠酶和蛋白酶等。與此同時,伴隨牙周組織細胞損傷,胞內(nèi)酶越來越多的釋放入齦溝液、唾液和周圍體液。其中,具有組織特異性的酶有:ALT、AST、LDH、GGT和ALP[2]。有研究報道唾液中的這些酶水平改變均有助于牙周病診斷,其機制是牙周組織受損時,受累細胞水腫導致細胞膜結(jié)構(gòu)改變,使其通透性增加,胞內(nèi)酶隨病變過程不斷地釋放到齦溝液和唾液[3]。本組病例中,所觀察的5種酶(ALT、AST、LDH、ALP和GGT)與健康對照組相比均有明顯增高,可對其進一步佐證。

有學者研究報道,A LT、AST、LDH和GGT是參與細胞代謝過程的胞內(nèi)酶,它們大多存在于軟組織細胞。因此,齦溝液和唾液中這些酶水平增高,指示胞內(nèi)有損傷存在,即牙周組織因炎癥反應而改變了胞內(nèi)的代謝過程[2]。ALP是主要存在于組織和器官的胞內(nèi)酶,尤以骨組織含量為高。唾液中ALP酶活動增加,可能是牙槽骨破壞嚴重,表示牙周疾病已發(fā)展至中、重度狀態(tài)。因此,聯(lián)合檢測牙周病患者唾液ALT、AST、LDH、GGT和 ALP的活性,有助于判斷牙周疾病的嚴重程度[3]。本組病例之 ROC曲線分析表明,唾液中 LDH、ALP和AST水平對診斷牙周病均有很高的特異性(均為95.0%)和陽性預告值(均＞95.0%),但靈敏度卻相對較低,均不及GGT和A LT。從AUC和YImax的統(tǒng)計結(jié)果來看,所檢測的5種酶中LDH水平對牙周病的診斷效率最高,其余4種酶則相接近。提示唾液酶對評估牙周病并非獨立預報因子,聯(lián)合檢測方具臨床實用價值。

唾液酶水平與血液水平相差很大。本組病例中,通過ROC情況分析,以 Y Imax為選擇依據(jù),得出 ALT、AST、GGT、ALP和 LDH 的最佳判斷點依次是 26、30、32、132、228 u/L。因此,在應用于臨床之前,各實驗室應當建立其本地區(qū)人群的參考值,切勿盲目借用。

本研究顯示唾液中某些酶的改變反映了牙周病患者牙周組織的病理變化。其活性的高低可反映牙周組織損傷程度和病理過程。既能指示牙周炎癥、軟組織損傷和骨丟失狀態(tài),還能夠指示疾病的嚴重程度。另外,本研究顯示牙齦指數(shù)與唾液中ALT、AST、LDH、GGT和ALP的改變呈正相關。

[1]Kaufman E,Lam ster IB.Analysis of saliva for periodontal diagnosis-a review[J].JClin Periodontol,2000,27(7):453.

[2]Todorovic T,Dozic I,Vicente-Barrero M,et al.Salivary enzymes and periodontal disease[J].Med O ral Patol O ral Cir Bucal,2006,11(2):E115.

[3]Yoshie H,TaiH,Kobayashi T,etal.Salivary enzyme levels after scaling and interleukin-1 genotypes in Japanese patients w ith chronic periodontitis[J].J Periodonto l,2007,78(3):498.