水蔓菁滴丸的制備工藝和質量評價研究

刁海鵬， 杜 艷， 孫體健， 牛栓成

(山西醫科大學，山西太原030001)

水蔓菁為玄參科細葉婆婆納屬水蔓菁(Veronica linariifolia)全草入藥(應具體說明其藥用部位)，具有清熱解毒、利尿、止咳化痰等作用［1］。主要化學成分為芹黃素、木犀草素苷等黃酮類化合物［2］，現水蔓菁已有制成片劑，臨床用于治療慢性氣管炎、肺化膿癥、咳吐膿血、急性腎炎、尿路感染等疾病［3］。為滿足臨床用藥的需要，本課題組對水蔓菁藥材中的黃酮類有效成分進行提取并富集，制備成止咳滴丸，同時對制備過程中影響滴丸成型的多種因素進行考察，優化工藝條件，并對制成的滴丸質量進行評價。

1 儀器與試藥

儀器:旋轉蒸發儀:RE－52－98型(上海亞榮儀器公司);真空干燥箱:DEG－402型(天津天宇技術實業有限公司);超聲波清洗儀:KQ－100型(昆山市超聲儀器有限公司);760CRT雙光束紫外－可見分光光度計(上海精密分析儀器廠)。

材料與試劑:PEG 4000、PEG 6000(AR，天津基準化學試劑有限公司);甲基硅油、液狀石蠟等均為藥用規格;大孔吸附樹脂HPD600購自南開大學;蘆丁對照品(中國藥品生物制品檢定所 批號:1521－200401);水蔓菁藥材，經山西省藥檢所鑒定為細葉婆婆納屬水蔓菁，產自山西省萬榮縣。

2 方法與結果

2.1 水蔓菁浸膏的制備

2.1.1 水蔓菁藥材的提取

水蔓菁藥材中最主要的有效成分是黃酮類化合物，通過單因素考察，水蔓菁提取工藝中主要的影響因素有:加水量、提取時間和提取次數，故以水蔓菁藥材提取液中總黃酮含量為指標，以三因素三水平的L9(34)正交試驗設計，來考察最佳提取工藝。

將水蔓菁藥材粉碎，過20目篩，稱取粗粉20 g，加水煎煮，按照表1、表2設計內容進行操作。將提取液過濾，減壓濃縮，測其總黃酮含量［4］，結果見表 2、表 3。

表1 水蔓菁總黃酮水提取方法正交試驗考察因素水平

試驗結果表明，只有提取次數對水蔓菁中總黃酮含量有顯著性影響，確定提取次數為3次;根據總黃酮含量直觀分析表明，影響因素差別為:D＞B＞A，最后工藝為A2B2D3，即10倍量水，回流提取3次，每次1 h。

表2 提取工藝正交實驗安排及結果

表3 藥材總黃酮含量方差分析

2.1.2 水蔓菁提取物的純化 將水蔓菁藥材粉碎，過20目篩，稱取300 g，加10倍量水煎煮3次，每次1 h，過濾，合并濾液減壓濃縮藥液比至1∶8(g/mL)，作為上樣溶液。取處理好的大孔吸附樹脂HPD600濕法裝柱，使其徑高比為1∶10，以1.5倍柱體積/小時的速度上樣，同時用FeCl3溶液驗漏，至變成墨綠色;然后用2倍柱體積的水洗，流速為2倍柱體積/小時，洗脫液棄取;然后用4倍柱體積的50%乙醇洗脫，流速為2倍柱體積/小時，收集洗脫液，濃縮，真空干燥得浸膏，研細，過80目篩，即得水蔓菁浸膏粉末，平均出粉率為31.4%，總黃酮含量按蘆丁折算為20.66%。

2.2 水蔓菁止咳滴丸成型工藝考察［5，6］

2.2.1 水蔓菁滴丸基質種類的確定 本試驗考察了水蔓菁浸膏粉末與不同基質混合后的成型情況。取適量2.1.2項下制得的浸膏粉末，稱取PEG4000、PEG 6000各3 g，分別置50 mL小燒杯中，80℃水浴加熱，熔化后加入浸膏，攪拌均勻后，80℃保溫，滴頭口徑為3.0/4.0 mm，滴距6 cm，以20 d/min速度滴入0～5℃的液體石蠟中，冷凝液長為15 cm。

試驗結果表明:PEG6000本身黏度較大，熔融溫度偏高，熔融液顏色深，滴制時不宜成形，制成的滴丸大小不均勻，丸重差異大，圓整度不好，而且制成的滴丸溶散時間為8.4 min。而浸膏與PEG4000融合性好，藥液稠度適宜，易于滴制，制成的滴丸溶散時間短，故水蔓菁滴丸的基質選擇用PEG4000。

2.2.2 冷凝劑的確定 根據水蔓菁浸膏為水溶性物質，制備滴丸時應選擇油溶性冷凝劑，因植物油穩定性較差，故選擇液體石蠟和甲基硅油，通過實驗確定冷凝劑的種類。取適量2.1.2項下制得的浸膏粉末，按1∶3加入在80℃熔化的PEG4000中，攪拌均勻后，分別滴入液體石蠟、甲基硅油中，其它滴制條件不變。

試驗結果表明:使用液體石蠟為冷凝劑時水蔓菁滴丸下降太快，形成子母丸，滴丸產生拖尾，丸的大小不均勻，圓整度低;而使用甲基硅油為冷凝劑，滴丸下降速度慢，丸形圓整度高，故確定甲基硅油為冷凝劑。

2.3 水蔓菁滴丸制備條件的優化

水蔓菁滴丸的制備:本課題組選擇常用的水溶性基質PEG4000，冷凝劑為甲基硅油，并通過單因素試驗，確定滴頭內外徑為3.0/4.0 mm，冷凝劑溫度為0～5℃，滴距為6 cm，以丸重差異、溶散時限和外觀質量為指標，對熔融溫度(A)、滴速(B)、冷凝液高度(C)、保溫溫度(D)按正交設計L9(34)表做四因素三水平試驗，試驗設計見表4，試驗結果見表 5，表 6。

表4 水蔓菁滴丸正交試驗因素水平

表6的丸重差異方差分析數據表明，各因素對丸重差異系數的影響沒有顯著性差異。各因素對丸重差異的影響大小順序為:B＞D＞C＞A，最優組合為A1B3C3D3，即藥液熔融溫度為80℃，保溫溫度為85℃，滴速為40 d/min，冷凝液高度為35 cm。

2.4 水蔓菁止咳滴丸質量評價［7］

2.4.1 3批樣品重復性試驗 按確定的處方制備3批水蔓菁止咳滴丸，進行外觀評價和溶出度測定，結果見表7。

結果表明，批次之間滴丸外觀和體外藥物的溶出無明顯差異，設計與優化結果是可靠的。

2.4.2 穩定性試驗 藥物制劑的基本要求是安全、有效、穩定，藥物制劑穩定性對保證制劑安全有效是非常重要的。滴丸作為一種固體分散體劑型，其主要缺點是藥物分散狀態的穩定性不高，久貯易產生老化現象。

針對中藥滴丸的特點，設計以下實驗進行加速試驗:在溫度(30±2)℃、相對濕度60%±5%的條件下放置3個月，在試驗期間第0，1，2，3個月取樣，進行外觀、含量考察，結果見表8;采用不帶外包裝，在照度3600Lx的光照條件下放置10天，于第0，5，10天取樣，進行外觀、總黃酮含量考察。結果見表9。

表5 水蔓菁滴丸正交試驗結果(n=6)

表6 水蔓菁滴丸丸重差異方差分析

表7 3批樣品重復性試驗結果

表8 水蔓菁滴丸高溫和高濕下的外觀和含量

表9 水蔓菁滴丸強光下的外觀和含量

結果表明，水蔓菁止咳滴丸在溫度和濕度加速試驗條件下，色澤、硬度等外觀保持良好，含量穩定;在光照加速試驗條件下，外觀、含量均無明顯變化。說明制備的水蔓菁滴丸在此試驗條件下比較穩定。

3 討論

本實驗從影響滴丸的丸重差異系數、溶散時限和外觀質量為評價指標考察了各因素的影響，確立制備水蔓菁滴丸的最佳條件為:基質為PEG4000，冷凝劑為甲基硅油，滴頭內外徑為3.0/4.0 mm，冷凝劑溫度為0～5℃，滴距為6 cm，藥液熔融溫度為80℃，保溫溫度為85℃，滴速為40 d/min，冷凝液高度為35 cm。

本課題組對水蔓菁滴丸質量從重現性、穩定性兩方面進行評價，該滴丸重現性良好，在高溫、高濕環境下三個月內、強光下10 d內滴丸外觀不變，其總黃酮含量基本保持不變，但其有效期的確定還有待通過加速試驗和長期試驗繼續加以探討。

通過上述工藝條件確定的滴丸成型度好，所制滴丸符合《中國藥典》(2005版)滴丸質量標準。

［1］江蘇新醫學院.中藥大辭典［M］.上海:上海科技出版社，1986:1032.

［2］馬翠英.水蔓菁中黃酮類化合物的研究［J］.藥學學報，1991.26(3).203－208.

［3］楊丁銘，朱開賢.水蔓菁的化學成分研究(Ⅱ)［J］.中草藥，1991.(22).2－3.

［4］楊榮平，李 琳.紫外分光光度法測定補骨脂中總黃酮含量［J］.中國藥業，2007，16(1):22－23.

［5］姜 泓，孟 舒，陳再興.婦康滴丸的制備與質量控制［J］.中成藥，2009，31(5):813－815.

［6］劉華亮，袁 珂，朱建鑫，等.枸杞子滴丸成型工藝的研究［J］.時珍國醫國藥，2009.20(3):601－602.

［7］中國藥典［S］.二部.2005:附錄IK.