工程黃與人工黃之牛黃降壓丸單次給藥對自發性高血壓大鼠降壓作用比較觀察

王 蕾， 孫寶珍， 呂 楠， 趙 晨， 種影影， 陳衛平

(1.天津市醫藥科學研究所，天津300020;2.天津中新藥業集團股份有限公司達仁堂制藥廠，天津300457)

“體外培育牛黃”(亦稱為“工程牛黃”)，是以仿生學方法模擬膽紅素鈣結石在體內形成的生化過程和條件，應用現代生物工程技術在體外牛膽囊膽汁內培育的牛膽紅素鈣結石。本實驗旨在將原牛黃降壓丸中的人工牛黃替換為工程牛黃，觀察和比較含人工黃與不同含量工程黃之牛黃降壓丸對自發性高血壓大鼠血壓的影響，為工程牛黃替代人工牛黃提供藥理學實驗依據。

1 試驗材料

1.1 實驗動物

自發性高血壓大鼠(SHR)，♂性，體重260～280 g，購自北京維通利華實驗動物技術有限公司，實驗動物生產許可證號:SCXK(京)2005－0002。

大鼠用普通全價顆粒飼料Ⅱ號，由北京科澳協力飼料有限公司生產(京動許字(2000)第015號)。

標準化實驗室，實驗動物使用許可證號 SYXK(津)2005－0001。

1.2 試驗藥物

1.2.1 人工黃牛黃降壓丸(CBA－1)，棕黃色粉末，由天津中新藥業集團股份有限公司達仁堂制藥廠提供。

1.2.2 工程黃牛黃降壓丸(CBA－2)，棕黃色粉末，處方所含牛黃為工程牛黃，其含量分別為原牛黃降壓丸中人工牛黃含量的80%、60%、30%、10%4種。由天津中新藥業集團股份有限公司達仁堂制藥廠提供。

1.2.3 馬來酸依那普利片(陽性對照品)，揚子江藥業集團江蘇制藥股份有限公司產品，批號:07112301。

1.3 儀器與設備

ALC－NIBP無創血壓測定分析系統，上海奧爾科特生物科技有限公司產品;恒溫實驗箱，上海奧爾科特生物科技有限公司產品。

2 試驗方法

2.1 分組與給藥

試驗開始前一周，將SHR放入無創血壓測定分析系統固定器適應性測定血壓1周，每只大鼠至少測定3次，選擇3次血壓差值不超過±10%的大鼠為合格動物。按照大鼠3次收縮壓平均值隨機分為7組，分別為模型對照組、80%ICCB組、60%ICCB 組、30%ICCB 組、10%ICCB 組、CBA－1組、依那普利陽性對照組。各牛黃降壓丸組給藥量為0.88 g/kg，約為臨床人用劑量的40倍，依那普利給藥量為10 mg/kg，為人臨床常用劑量的30倍，均灌胃給藥，模型對照組灌胃蒸餾水，體積均為10 mL/kg。

2.2 測定方法

給藥前測定SHR基礎血壓和心率，然后各組灌胃相應藥物，測定給藥后1 h、2 h、3 h、5 h血壓值，計算血壓變化率=(藥后血壓－藥前血壓)×100%/藥前血壓。

2.3 統計處理

所得數據均經SPSS11.5統計軟件方差分析及t檢驗處理，以均數±標準差(±s)表示。

3 試驗結果

與模型對照組比較，各給藥組在藥后1h收縮壓即開始下降，以80%ICCB下降最明顯，降壓幅度14.96%，至藥后5h作用持續。60%、30%、10%ICCB組血壓顯著降低的起效點為藥后2h。CBA－1組只可見降低收縮壓的趨勢(P＞0.05);依那普利組降壓起效時間在藥后2 h，作用強于80%ICCB組，持續至藥后5 h。見表1。

在降低收縮壓的同時，80%、60%、30%ICCB組亦呈現降低舒張壓作用，其作用程度與所含ICCB比例呈正相關，見表2。

與模型對照組比較各給藥組均未見對心率有顯著性影響。

表1 不同配比之牛黃降壓丸樣品對SHR收縮壓(SBP)的影響(±s)(1 mmHg=0.133.3 kPa)

表1 不同配比之牛黃降壓丸樣品對SHR收縮壓(SBP)的影響(±s)(1 mmHg=0.133.3 kPa)

與模型對照組比，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01。

66.33±18.78 167.92±18.69 80%ICCB0.88 g/kg 10 186.58±6.06 158.47±11.88▲ 158.45±26.86▲ 147.13±13.20▲ 139.25±19.24▲▲60%ICCB0.88 g/kg 10 181.84±10.79 156.19±24.32▲ 157.95±29.31▲ 145.86±21.32▲ 163.21±26.69 30%ICCB0.88 g/kg 10 180.03±8.15 163.66±22.46 159.79±18.56▲▲ 154.68±11.86 158.20±18.99 10%ICCB0.88 g/kg 10 182.67±9.08 166.61±18.56 159.47±31.04▲ 158.53±31.45 154.78±15.40 CBA－1 0.88 g/kg 10 179.01±10.74 159.07±12.61▲ 166.94±26.65 160.24±22.05 158.64±23.49依那普利10 mg/kg 10 181.56±10.50 173.58±22.59 146.43±28.46▲▲ 142.77±19.76 140.99±27.78 1 h 2 h 3 h 5 h模型對照組 10 183.24±10.16 173.25±15.34 182.18±10.76 1組別 n 各時間點收縮壓數值/mmHg藥前▲

表2 不同配比之牛黃降壓丸樣品對SHR舒張壓(DBP)的影響(±s)

表2 不同配比之牛黃降壓丸樣品對SHR舒張壓(DBP)的影響(±s)

與模型對照組比，▲P＜0.05。

22.94±15.16 123.76±18.43 80%ICCB 0.88 g/kg 10 138.46±6.57 118.99±14.01 116.86±21.32▲ 113.23±14.62 105.69±19.18▲60%ICCB 0.88 g/kg 10 130.60±10.13 124.04±20.09 119.04±20.68 106.41±19.17▲ 126.11±16.25 30%ICCB 0.88 g/kg 10 123.66±18.31 127.97±18.13 118.87±15.58▲ 116.60±9.97 121.43±16.53 10%ICCB 0.88 g/kg 10 136.64±10.24 125.68±16.72 121.10±24.41 113.85±23.05 120.31±11.41 CBA－1 0.88 g/kg 10 133.92±8.29 117.11±14.07 124.90±20.40 119.73±16.16 120.81±16.53依那普利10 mg/kg 10 133.59±9.22 130.81±18.92 109.85±25.89▲1 h 2 h 3 h 5 h模型對照組 10 137.11±10.53 128.98±12.25 134.47±12.47 1組別 n 各時間點舒張壓數值/mmHg藥前115.94±15.75 108.22±22.54

4 討論

牛黃降壓丸是達仁堂獨家研制于1979年投入生產的純中藥制劑，通過多年的臨床應用已成為我國中藥降壓藥的首選，其主要成分有牛黃、羚羊角、珍珠、水牛角濃縮粉、白芍、決明子、川芎、黃芩素、郁金、冰片、甘松、薄荷等。有清心化痰、平肝安神功效。用于心肝火旺、痰熱壅盛所致的頭暈目眩、頭痛失眠、煩躁不安;高血壓病見上述證候者。

其主藥牛黃是一味名貴中藥材，牛黃即干燥的牛膽結石。根據我國相關部門頒布的藥品標準統計，用牛黃做原料的國家標準藥品共有600多個品種，市場需求量很大。但我國天然牛黃產量低、資源匱乏，過去主要依賴進口。國家藥監局分別于2000、2001、2002年相繼發文，禁止使用進口牛源性材料制備中成藥，如天然牛黃等等，加劇了天然牛黃的供需矛盾。正因為天然牛黃稀缺昂貴，很多應該用天然牛黃投料的中成藥改用人工牛黃，或幾種牛黃摻兌使用，使牛黃應用產生混亂，急需對牛黃市場進行規范。

體外培育牛黃是模擬體內膽結石形成的原理和生物化學過程，運用現代生物工程技術，在體外培育的牛膽紅素鈣結石。指紋圖譜研究結果表明體外培育牛黃與天然牛黃成分相近，且質量標準更穩定［1］。已有藥效學實驗證實，體外培育牛黃有鎮痛、抗炎、抗肝纖維化、耐缺氧、清除自由基、保護心腦細胞、誘導人肝母細胞瘤 HepG2細胞凋亡等作用［2－6］。本實驗旨在將原牛黃降壓丸中的人工牛黃替換為不同含量的體外培育牛黃，觀察和比較不同含量工程黃與人工黃之牛黃降壓丸對自發性高血壓大鼠的降壓作用，并探討其不同配比與療效的關系。

結果表明，用體外培育牛黃部分替代人工牛黃之牛黃降壓丸具有明顯降壓作用，且其降低收縮壓的起效時間及降壓幅度均與ICCB含量有密切關系，含量高則起效時間早、持續時間長、降壓幅度明顯。至于將工程牛黃完全替代人工牛黃，其牛黃降壓丸的降壓活性是否更加顯著，有待下一步研究。

［1］丁 崗，盛龍生，李明慧，等.體外培育牛黃與天然牛黃指紋圖譜的比較研究［J］.中國天然藥物，2004，5:309－312.

［2］張韶輝，張延琳，王文權，等.體外培育牛黃鎮痛作用的電生理機制［J］.中國藥理學通報，2008，8:1073－1077.

［3］汪世元，陳孝平，蔡紅嬌，等.體外培育牛黃誘導人肝癌HepG2細胞凋亡的實驗研究［J］.華中科技大學學報(醫學版)，2005，6:754.

［4］梁志鵬，楊 鎮，蔡紅嬌，等.體外培育牛黃制劑對實驗性血吸蟲病家兔肝纖維化組織細胞外基質的影響［J］.廣東醫學，2005，8:1044－1045.

［5］蔡紅嬌，汪世元，劉烈剛，等.體外培育牛黃耐缺氧和清除自由基作用的研究［J］.中藥藥理與臨床，2003，6:20－22.

［6］杜佐華，蔡紅嬌，楊榮光，等.體外培育牛黃抗炎作用的實驗研究［J］.中藥新藥與臨床藥理，1996，1:450－453.