CA系列凝血分析儀凝血三項(xiàng)測定結(jié)果的可比性研究*

王 貞，劉 艷，楊 冬，馬曉露，靳 巖

(1大連醫(yī)科大學(xué) 附屬第一醫(yī)院 檢驗(yàn)科，遼寧 大連 116011；2大連醫(yī)科大學(xué) 附屬第一醫(yī)院 消化內(nèi)科，遼寧 大連 116011)

凝血酶原時(shí)間(prothrombin time，PT)、活化部分凝血酶原時(shí)間(activated partial prothrombin time, APTT)和纖維蛋白原(fbinogen,Fg)是診斷出凝血性疾病最基本的檢查項(xiàng)目，其準(zhǔn)確性直接影響臨床醫(yī)生對疾病的判斷和治療。多數(shù)醫(yī)院檢驗(yàn)科都存在兩臺或兩臺以上的凝血分析儀，需定期檢測其結(jié)果的可比性，作者就本實(shí)驗(yàn)室日本Sysmex公司的CA7000與CA1500全自動(dòng)血凝分析儀進(jìn)行比較，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料和方法

1.1 標(biāo) 本

收集2009年5月15日～5月19日不同濃度的新鮮血漿標(biāo)本40份。

1.2 儀器和試劑

兩個(gè)檢測系統(tǒng)分別是CA1500全自動(dòng)血凝分析儀、CA7000全自動(dòng)血凝分析儀及其原裝配套校正物、質(zhì)控物和試劑。

1.3 方 法

CA1500和CA7000全自動(dòng)血凝分析儀均采用散射比濁法；不同水平的DADE質(zhì)控物均按日常標(biāo)本操作，測定1次/d。質(zhì)控在控后選擇不同濃度的新鮮血漿8份，連續(xù)收集5 d，共40份標(biāo)本。

1.4 臨床評定標(biāo)準(zhǔn)

參照美國CLIA’88[1]規(guī)定，以系統(tǒng)誤差(%SE)小于CLIA’88規(guī)定的室間質(zhì)量評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)的1/2(T±7.5%；T±7.5%；T±10%)為臨床可接受標(biāo)準(zhǔn)，以醫(yī)學(xué)決定水平[2]處的系統(tǒng)誤差來判斷兩個(gè)檢測系統(tǒng)的結(jié)果是否可以接受。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)均用SPSS 11.0軟件包，組間比較采用t檢驗(yàn)，并進(jìn)行相關(guān)回歸分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩個(gè)檢測系統(tǒng)新鮮血漿PT、APTT 和Fg測定結(jié)果的比較

CA7000的PT測定結(jié)果與CA1500比較，差異無顯著性意義(P>0.05)；CA7000的INR測定結(jié)果與CA1500比較，差異無顯著性意義(P>0.05)；CA7000的APTT測定結(jié)果與CA1500比較，差異無顯著性意義(P>0.05)；CA7000的Fg測定結(jié)果與CA1500比較，差異有顯著性意義(P<0.05)，見表1。相關(guān)系數(shù)(r)分別為0.999、0.999、0.998、0.985，回歸方程見表2。

檢測系統(tǒng)PT(s)INRAPTT(s)Fg(g/L)CA150021.96±12.461.84±0.9936.22±11.722.86±0.61CA700021.94±12.241)1.81±0.941)36.51±11.531)2.95±0.572)

1) 與CA1500相比，P>0.05； 2) 與CA1500相比，P<0.01

表2 兩個(gè)檢測系統(tǒng)間的回歸方程

相關(guān)系數(shù)r1=0.999，r2=0.999，r3=0.998，r4=0.985

2.2 兩個(gè)檢測系統(tǒng)臨床可接受性能的評價(jià)

根據(jù)待評檢測系統(tǒng)(Y)與目標(biāo)檢測系統(tǒng)(X)新鮮血漿PT、APTT和Fg測定結(jié)果的回歸方程，PT的醫(yī)學(xué)決定水平X1=14.5 s，X2=16 s，X3=30 s，APTT的醫(yī)學(xué)決定水平Xl=35 s，X2=45 s，X3=90 s，F(xiàn)g的醫(yī)學(xué)決定水平X1=1.0 g/L，X2=5.0 g/L。將其分別代入各自相應(yīng)的回歸方程得相應(yīng)的Y值，系統(tǒng)誤差SE=|Y-X|，%SE= |Y-X|/X ×100%。其臨床可接受性能評價(jià)見表3。

3 討 論

隨著實(shí)驗(yàn)室技術(shù)的發(fā)展和醫(yī)院發(fā)展的需要，本院檢驗(yàn)科有數(shù)臺儀器同時(shí)對凝血項(xiàng)目進(jìn)行檢測，這就需要定期進(jìn)行儀器比對，以判斷儀器間測定的結(jié)果是否具有一致性。CA1500檢測系統(tǒng)最早購進(jìn)，定期校準(zhǔn)，測定結(jié)果可靠，幾年來參加室間質(zhì)評成績優(yōu)秀，因此以CA1500檢測系統(tǒng)為目標(biāo)檢測系統(tǒng)，CA7000測定結(jié)果與其比較。本實(shí)驗(yàn)依據(jù)NCCLS(EP09-A2)[3]文件進(jìn)行比對實(shí)驗(yàn)，PT、INR、APTT和Fg相關(guān)系數(shù)r分別為0.999、0.999、0.998、0.985(r2>0.950為合適范圍)，說明CA7000測得的凝血時(shí)間各項(xiàng)結(jié)果與比較儀器CA1500均相關(guān)良好，這與文獻(xiàn)報(bào)道相一致[4]。對CA7000檢測系統(tǒng)進(jìn)行臨床可接受性能評價(jià)，其結(jié)果大部分在臨床可接受范圍，說明其準(zhǔn)確性基本符合臨床要求。通過比對實(shí)驗(yàn)，證明本院CA系列兩個(gè)全自動(dòng)血凝檢測系統(tǒng)的測定結(jié)果具有較好的一致性，雖然采用的儀器不是同一型號，但檢測結(jié)果具有可比性。因此，當(dāng)實(shí)驗(yàn)室同一檢測項(xiàng)目存在兩個(gè)以上分析系統(tǒng)時(shí)，應(yīng)定期對其檢測結(jié)果進(jìn)行比對實(shí)驗(yàn)[5]。必要時(shí)增加樣本數(shù)可以提高統(tǒng)計(jì)估計(jì)的可信度，和降低無法預(yù)見的干擾因素的影響。

表3 CA7000檢測系統(tǒng)臨床可接受性能的評價(jià)

PT、APTT測定結(jié)果CA1500與CA7000系統(tǒng)間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明同一公司的系列產(chǎn)品具有較好的可比性。對于Fg試驗(yàn)，兩系統(tǒng)間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且Fg水平較低時(shí)CA7000檢測結(jié)果的系統(tǒng)誤差已大于總允許誤差，說明還需要進(jìn)一步校準(zhǔn)，或者增加樣本數(shù)以提高比對實(shí)驗(yàn)的可信度。WHO和NCCLS對Fg試劑、儀器、技術(shù)和操作等均有推薦參考方法和常規(guī)方法[6]。WHO的生物標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)已將1992年問世的Fg標(biāo)準(zhǔn)品89/644定為國際參考品，并推薦采用改良Jacobsson法來標(biāo)準(zhǔn)化本地區(qū)的次級標(biāo)準(zhǔn)品。在常規(guī)Fg含量測定時(shí)建議使用Clauss法。需要注意的是，目前國內(nèi)使用的某些儀器可以根據(jù)PT的變化換算出Fg含量，這種方法只能對Fg含量作出大致估計(jì)，當(dāng)含量明顯減低或增高時(shí)，不能準(zhǔn)確判斷，且與Clauss法測定結(jié)果有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異[7]。本實(shí)驗(yàn)室兩臺凝血分析儀CA7000、CA1500均采用Clauss法，測定前儀器自動(dòng)對待測血漿進(jìn)行1∶10稀釋，對于低于或高于儀器檢測線性范圍的樣本采用重新稀釋(減小或增大稀釋倍數(shù))的方法進(jìn)行再次測定，以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。本次實(shí)驗(yàn)兩個(gè)檢測系統(tǒng)測定Fg水平在2.01～4.08 g/L，大致在正常范圍內(nèi)，未納入低水平及高水平Fg測定結(jié)果，對比對結(jié)果有一定影響，也提醒筆者在日后的比對實(shí)驗(yàn)中應(yīng)適當(dāng)增加樣本數(shù)以提高比對實(shí)驗(yàn)的可信度。

通過比對實(shí)驗(yàn)，可以清楚地看到，盡管兩個(gè)檢測系統(tǒng)的測定結(jié)果大部分在臨床可接受范圍，但不同的檢測系統(tǒng)在部分結(jié)果上還存在一定的差異，對測定結(jié)果有一定的影響。因此，當(dāng)實(shí)驗(yàn)室同一檢測項(xiàng)目存在兩個(gè)以上分析系統(tǒng)時(shí)應(yīng)定期對其檢測結(jié)果進(jìn)行比對實(shí)驗(yàn)，對比對結(jié)果差異超過允許范圍的應(yīng)采取相應(yīng)的改進(jìn)措施，使同一患者樣本在不同檢測系統(tǒng)上的檢測結(jié)果保持可比性，為臨床醫(yī)生提供穩(wěn)定且準(zhǔn)確的檢測結(jié)果。

[1] U．S．Department of Health and human Services．Medicare．Medicaid and CLIA program ：Regulations implementing the Clinical Laboratory Improvem ent Amendment of 1988 (CLIA) [M]. Final rule．Fed Regist，1992, 57(40)：7002-7186．

[2] 常用檢驗(yàn)項(xiàng)目的醫(yī)學(xué)決定水平.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)網(wǎng). http://www.labweb.cn/articleview/2008-7-23/article_view_5547_2.htm.

[3] Krouwer JS, Tholen DW. Method comparison and bias estimation using patient samples; Approved Guideline, EP09-A2[M]. Second Edition. Clinical and Laboratory Standards Institute. Thomson Reuters,2002.3-55.

[4] 王敏敏,謝琦,盧忠.不同型號儀器測定凝血酶原時(shí)問的可比性研究[J]. 浙江臨床醫(yī)學(xué)，2008，10(7)：882-883.

[5] 馮仁豐．臨床檢驗(yàn)管理技術(shù)基礎(chǔ)[M]. 上海：上海科學(xué)文獻(xiàn)出版社，2003.32-136．

[6] 朱忠勇．凝血酶原時(shí)間和活化部分凝血活酶時(shí)間測定標(biāo)準(zhǔn)化及其質(zhì)量控制(草案)：附纖維蛋白原測定推薦方法和淘汰過時(shí)的出凝血時(shí)間測定方法的建議[J]．臨床檢驗(yàn)信息，1998，5(1)：6-8．

[7] 蘇加云. 纖維蛋白原測定方法的探討及臨床應(yīng)用[J]. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2008，5(23)：1438-1439.