枯草芽孢桿菌抑菌作用的實驗研究

【摘要】 枯草芽孢桿菌抗均蛋白對很多病菌都有抑制或殺滅作用，實驗中對大腸桿菌的拮抗作用進行了研究。結果表明，枯草芽孢桿菌大腸桿菌拮抗作用較為明顯。

【關鍵詞】 枯草芽孢桿菌；大腸桿菌；紫外線誘變

芽孢桿菌在自然界分布非常廣泛，多數芽孢桿菌的抗菌物質具有抗菌譜廣，對酸堿度要求不高，熱穩定性好，易于進行分子加工等特點，這些都為開發新型天然防腐劑以及生物防治劑提供了很好的條件。枯草芽孢桿菌可由稻草中分離得到，對許多植物病原生物具有拮抗作用的非病原微生物。研究枯草芽孢桿菌對大腸桿菌的拮抗作用，并通過紫外誘變手段篩選出高抗大腸桿菌的菌株。

一、材料與方法

1、供試菌種

實驗菌種 ：枯草芽孢桿菌、大腸桿菌

2、培養基

液體種子培養基：為牛肉膏蛋白凍培養基（不加瓊脂粉）。

固體種子培養基：在液體種子培養基基礎上加入18g/L的瓊脂粉。

3、枯草芽孢桿菌的制備

取稻草約500g，浸泡在清水中2h，再將其煮沸30min，后37℃下培養。24h后再將其煮沸30min，吸取液體1ml于9ml無菌水中，搖勻制成菌懸液，將菌懸液滴兩滴在固體種子培養基上，涂布均勻，37℃下培養48h。最后挑單菌落于液體種子培養基中，37℃下培養48h。

4、枯草芽孢桿菌的紫外誘變

取培養至對數生長期的枯草芽孢桿菌菌液離心（10000r/min，20min），取沉淀收集細胞，用無菌生理鹽水洗滌2次。玻璃珠振蕩15min。分別取10ml菌懸液于5個直徑9cm的無菌培養皿中，搖勻。無菌條件下在30W，60CM的紫外燈下打開培養皿蓋分別照射60s，90s，120s，150s，180s。……