白刺花莖葉抗炎抗過敏作用的實驗研究

摘要：目的：對白刺花莖葉進行抗炎、抗過敏的實驗研究并與花作比較。方法：抗炎實驗采用二甲苯所致的小鼠耳腫脹的方法，二甲苯所致小鼠皮膚毛細血管通透性增高以及角叉菜膠所致小鼠足趾腫脹的實驗方法；抗過敏實驗采用DNCB(2.4一二硝基氯苯)所致小鼠DTH(遲發性過敏反應)以及右旋糖酐所致小鼠皮膚瘙瘁等實驗方法。結果：白刺花的莖葉和花對小鼠的耳腫脹，足趾腫脹有一定的抑制作用，同時可以降低小鼠毛細血管的通透性；對DNCB所致小鼠DTH影響不明顯，還可以減少小鼠的瘙癢次數及瘙癢持續時間。結論：白刺花莖葉有一定的抗炎、抗過敏作用，但效果均不如花，由于莖葉的產量大，容易采集，對其化學成分和各種成分藥效學有待進一步研究。

關鍵詞：白刺花；莖葉；花；抗炎；抗過敏；實驗研究

中圖分類號：R285.5 文獻標識碼：A

文章編號：1007-2349(2009)05-0053-02

白刺花為蝶形花科植物白刺花(Sophroa viciifolia hance)。廣泛分布于海拔1300m～2500m的山坡，路旁，灌木叢中。云南、貴州、四川、甘肅，河南，河北，山西等省均有分布。為漢族民間及苗族、哈尼族等少數民族習用藥，云南省多數地區有食用其花的習俗。味苦性寒，具有清熱燥濕，涼血解毒，利濕消腫等功效。主要用于濕熱痢疾，咽喉腫痛，肝炎，皮膚瘙癢，滴蟲性陰道炎。課題組前期做了花的化學成分及其抗炎、抗過敏的實驗研究，表明其具有顯著的抗炎抗過敏作用。但白刺花產量低，受花期季節限制，且不容易采集。民間有莖葉入藥的報道，因此該實驗在前期研究的基礎上，擬進行白刺花莖葉總提物與花總提物抗炎抗、過敏作用的比較，觀察二者的作用是否相似，為今后的開發和應用提供一定的實驗依據，現報道如下。

1 實驗材料

1.1 主要藥品及試劑 撲爾敏，北京太洋藥業有限公司(批號060610)；角叉菜膠，Sigma 015k0172(批號C1013-25G)；右旋糖酐，昆明南疆制藥有限公司(批號A060725)；所用試劑均為市售合格試劑。

1.2 主要儀器 電子天平，PIA03；離心機，TLG-52商速臺式冷凍離心機(江蘇醫療儀器廠)；紫外分光光度計，7520(上海分析儀器廠)；旋轉式蒸發器，RE-52(上海安亭電子儀器廠)。

1.3 實驗動物 昆明種小白鼠，體重18～22g，雌雄兼用，由四川省醫學科學院實驗動物研究所提供，生產許可證號：SCXK(川)2004-16。

1.4 統計學處理 實驗數據符合正態分布，方差齊者用￡檢驗，不齊者用t檢驗。實驗數據如有偏態，則用參比差值法。

2 實驗方法與結果

2.1 白刺花莖葉及花總提物的制備 藥材采自昆明近郊小墨雨山上，由毛曉健副教授鑒定。將500g白刺花干燥的莖葉加入75％的乙醇3000mL，浸泡30min后于水浴上回流提取1h，濾過，收集濾液，藥渣加75％乙醇2000mL水浴回流提取30min，濾過，和并濾液。濾液于減壓濃縮到500mL(1g藥材/mL)。花的總提物的制備方法同莖葉總提物的制備。置6℃冰箱中保存備用。

2.2 抗炎實驗

2.2.1 對二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響 18～22g小鼠60只，隨機分5組，分組及給藥劑量如表1所示。連續給藥7天，于末次給藥30min后，各小鼠右耳涂二甲苯30μL致炎，致炎后1h將小鼠頸椎脫臼處死，剪下左右耳廓，用打孔器打下7mm的耳片，電子天平稱重。計算腫脹率。將取耳后的小鼠迅速剖開胸腔和腹腔，取出胸腺、脾臟，用電子天平稱其鮮重并計算胸腺指數和脾臟指數，結果表明：與空白對照組比較，各給藥組對二甲苯所致的耳廓腫脹均有極顯著的抑制作用，并能顯著降低脾臟指數。對胸腺指數影響不明顯。見表1。[腫脹率一(右耳重一左耳重)/左耳重×100％]，[胸腺(脾臟)指數=胸腺(脾臟)重量(g)/lOg體重]

2.2.2 對二甲苯所致的小鼠皮膚毛細血管通透性的影響Ⅲ取18～22g小鼠60只，分組及給藥劑量如表2所示。連續給藥7d，于第6天將小鼠腹部正中的毛去出，于第7天末次給藥60min后，各小鼠尾靜脈注射0.5％伊文思蘭生理鹽水溶液0.1mL/lOg，隨即于皮膚上涂二甲苯30#L/只。30min后小鼠頸椎脫臼處死，剝下染藍皮膚，用打孔器打下兩塊7mm藍染皮膚，放入具塞的玻璃試管內，加入丙酮：生理鹽水=7：3混合溶液5mL，置于37℃的恒溫箱中孵化36h。2000轉離心10min，取上清液，于610hm處比色測吸光度(A)。以空白丙酮生理鹽水校零。結果表明：高劑量組能顯著升高小鼠毛細血管的通逮性，低劑量組和花對照組差異不顯著。見表2。

2.3.3 對角叉菜膠所致的小鼠足趾腫脹的影響 18～22g小鼠60只，雌雄兼有。隨機分為5組，分組及給藥劑量如表3所示。連續給藥6d，給藥劑量如表3。末次給藥前測每只小鼠的后右足的足趾厚度，給藥后30min每只小鼠右肢足趾皮下注射1％角叉菜膠混懸液0.1mL致炎，每隔1h測一次足趾厚度，連續測4次，記錄結果，計算腫脹度(腫脹度=給藥后足趾厚度一給藥前足趾厚度)。結果表明：與空白組相比較，在給藥后1h，各給藥組對角叉菜膠所致小鼠的足趾腫脹抑制作用不顯著，2h時候高劑量組，花對照組及阿司匹林組均有顯著的抑制作用。3h后各給藥組均有極顯著的抑制作用。4h時只有花對照組有顯著抑制作用。見表3。

2.4 抗過敏實驗

2.4.1 對DNCB(2、4一二硝基氯苯)所致小鼠DTH(遲發性過敏反應)的影響取18～22g小鼠60只，雌雄各半，隨機分5組，分組及給藥劑量如表4所示。分組后開始灌胃給藥，于給藥第2d將鼠腹部去毛，以1％DNcB50μL均勻涂抹致敏。第3天強化致敏1次。給藥第7天即致敏6d后，將DNCB丙酮液10μL。均勻的涂抹于小鼠右耳進行攻擊。第8天即攻擊后24h，于末次給藥后1h，處死小鼠剪下左右耳廓，用打孔器打下7mm的耳片，稱重，以左右耳片重量之差為腫脹度，并取胸腺，脾臟稱重，計算胸腺指數，脾臟指數(計算方法同2.3，1)。結果表明：花對照組和撲爾敏對照組對DNCB所致的DTH有抑制作用，而莖葉高、低劑量組均無作用。低劑量組，花對照組對胸腺和脾臟指數均有明顯的降低作用。見表4。

2.4.2 對右旋糖酐所致小鼠皮膚瘙癢的影響 取18～22g小鼠60只，雌雄兼用。隨機分5組，分組及給藥劑量如表5所示。連續給藥7d。以末次給要后30min，各小鼠尾靜脈注射0.04％右旋糖酐0.1mL/10g。以小鼠前爪搔頭部，后爪搔軀干，嘴咬全身各個部位作瘙癢指征，記錄30min內小鼠瘙癢次數及每次瘙癢的持續時間。結果表明：各實驗組與空白組比較均能明顯的降低右旋糖酐所致的小鼠皮膚瘙癢次數。其中高低劑量組和撲爾敏組能明顯的減少小鼠持續瘙癢時間。見表5。

3 討論

題組前期做了花的化學成分及提取物的抗炎抗過敏實驗的研究，表明其具有顯著的抗炎抗過敏作用，但白刺花產量低，受花期季節限制，且不容易采集。民間有莖葉入藥的報道，因此該實驗在課題組前期研究的基礎上，進行了白刺花總提物與白刺花花總提物抗炎抗過敏作用的比較。觀察二者的作用是否相似，為今后的開發和應用提供一定的實驗依據。

本次實驗結果表明白刺花莖葉有一定的抗炎抗過敏作用，但效果均不如花。但由于莖葉的產量大，容易采集，對其化學成分和各種有效成分有待進一步研究，且由于實習時間短，只有3個月，只選擇了抗炎中的急性炎癥模型、抗過敏中的遲發超發等模型進行驗證，其對中期炎癥的影響等抗炎指標、對速發型超敏反應等抗過敏指標，以及自刺花止血、體外抑菌等指標均有待進一步繼續研究。