酶抑制法檢測蔬菜有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留試驗

王志波

（江蘇如皋市農產品質量檢驗測試中心，226500）

酶抑制法檢測蔬菜有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留試驗

王志波

（江蘇如皋市農產品質量檢驗測試中心，226500）

根據行業標準《NY/T448-2001》，利用酶抑制法和相關農殘速測儀及配套試劑盒對江蘇如皋市主要批發市場、農貿市場、超市的蔬菜樣品進行了有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留檢測。檢測結果顯示，蔬菜合格率為97.7%，酶抑制法具有檢測時間短、成本低、操作簡便等特點，是目前我國控制農藥殘留的一種有效的初篩方法。

農藥殘留 速測 酶抑制

在人們廣泛關注食品質量安全的今天，作為監控農產品質量安全的最直接有效的手段——蔬菜農藥殘留速測技術得到迅速發展。蔬菜農藥殘留速測法主要有酶抑制法和化學試劑速測法兩種。它們都具有快速、簡便、靈敏、成本低等特點，在基層監督部門、蔬菜生產基地及市場得到廣泛應用。本文根據行業標準《NY/T448-2001》，利用酶抑制法和相關農殘速測儀及配套試劑盒對江蘇如皋市主要批發市場、農貿市場、超市的蔬菜樣品進行了檢測。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

檢測儀器有RP-410速測儀，T-200型電子天平，電熱恒溫培養箱，可調移液槍（10～100 μL；1～5 mL），配套玻璃儀器及其他配件。

試劑配置了pH值為8的緩沖液，乙酰膽堿酯酶、底物、顯色劑粉末分別加10 mL緩沖液配置成溶液，待用。

1.2 試驗方法

①試驗原理 根據有機磷和氨基甲酸酯類農藥能抑制昆蟲中樞和周圍神經系統中乙酰膽堿酶的活性，造成神經傳導乙酰膽堿的積累，影響正常傳導，使昆蟲中毒致死，將這一昆蟲毒理學原理，用在對農藥殘留的檢測中。如蔬菜的提取液中不含有機磷或氨基甲酸酯類的農藥殘留或殘留量較低，酶的活性就不會被抑制，試驗中加入的基質就被酶全部或部分水解，水解產物與加入的顯色劑反應產生顏色。反之，如果蔬菜的提取液中含有一定量的有機磷和氨基甲酸酯類農藥，酶的活性就被抑制，試驗中加入的基質就不能被酶水解，從而不顯色或顏色變化很小，用分光光度計來測定反應前后吸光度的變化，計算出抑制率，就可以判斷蔬菜中含有機磷和氨基甲酸酯類農藥的殘毒情況。

②檢測步驟 取2 g樣品（非葉菜類取4 g）切碎，放入提取瓶中，加入20 mL緩沖液，振蕩2～3 min，倒出提取液，靜止5 min，用移液槍移取3 mL提取液上清液于小試管中，加入50 μL酶，50 μL顯色劑，混勻后于37～41℃下培養30 min，再分別加入50 μL底物，混合后倒入比色皿中，于412 nm波長下比色。取3 mL緩沖液，其他步驟同樣品測定，得出空白試驗，作對照。

2 結果與分析

2.1 檢測標準

當抑制率＜70%時，說明基本上不存在農藥殘留；當抑制率≥70%，說明肯定存在有機磷或氨基甲酸酯類農藥。抑制率一般在-10%～110%之間，一旦檢測結果超出此范圍，即說明操作過程中有失誤的地方，需要重新檢測。

表1 用酶抑制檢測法檢測青菜等蔬菜農藥殘留結果

2.2 不同種類蔬菜農藥殘留情況

分別對取自生產基地和市場的青菜、大白菜、生菜、菠菜、花菜、包菜、刀豆、豇豆、紫茄進行檢測。檢測結果見表1。從檢測結果來看，大白菜的抑制率為97.7%，大于70%，說明大白菜中肯定存在有機磷或氨基甲酸酯類農藥。其余樣品抑制率均小于70%，均為合格樣品。本次檢測的總體合格率為88.9%，總體情況較好。

3 小結與討論

測定值與農藥殘留呈正相關，測定值越高，說明農藥殘留越高。在比色測定中，酶活性愈高，吸光度值愈低。當樣品提取液中有一定量的有機磷或氨基甲酸酯類農藥存在時，酶活性受到抑制，吸光度值則較高。據此可判斷樣品中有機磷農藥或氨基甲酸酯類農藥的殘留情況。此外，如果樣品提取液用氧化劑氧化，則可提高某些有機磷農藥的抑制率，因而可提高其測定靈敏度，過量的氧化劑再用還原劑還原，以免干擾測定。此方法最關鍵的試劑是膽堿酯酶，應統一標準，應選用對甲胺磷較敏感以及活性較高的膽堿酯酶。

4 評價

酶抑制檢測法操作簡單、快速、靈敏、經濟。該方法的研究和應用，對市場上含有機磷、氨基甲酸酯類農藥的蔬菜進行初篩選，防止中毒事故發生，凈化蔬菜市場，加強批發市場上上市蔬菜的管理，威懾不法商販和菜農濫用農藥，對大量抽檢樣本快速進行初篩，減少實驗室儀器分析的工作量起到了較大作用，同時該方法在一定程度上可讓老百姓吃上相對安全的蔬菜。為此農業部還專門對蔬菜上農藥殘留快速檢測法制定了行標，代號為NY/T448-2001，適用于葉菜類（除韭菜）、果菜類、豆菜類、瓜菜類、根菜類（除胡蘿卜、茭白等）中甲胺磷、氧化樂果、對硫磷、甲拌磷、久效磷、殺撲磷、敵敵畏、克百威等近20種高、中毒有機磷、氨基甲酸酯類農殘速測。但酶抑制檢測法也有它的局限性，此方法只能檢測有機磷和氨基甲酸酯類農藥，不適合其他農藥殘毒檢測，且不能定量檢測，所以，當用此方法檢測出有殘毒問題的蔬菜時，如果要作為仲裁處理，應送到有關部門進一步用氣相色譜等儀器進行定量和定性分析，其結果方可作為最終結論性數據。

[1]李順，紀淑娟，孫煥.酶抑制法快速檢測蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留的研究現狀及展望[J].食品與藥品，2006，8（7）：29-30.

[2]NY/T448.2001無公害蔬菜、水果農藥殘留檢測標準[S].

[3]裘正軍，陸江峰，何勇.基于酶抑制法的農產品農藥殘留快速檢測系統及影響因素分析[J].農業工程學報，2007，23（9）：229-33

[4]沈體忠，孫光忠.天門市蔬菜農藥殘留例行監測結果與對策思考[J].湖北植保，2006（5）：18-19.

[5]藍妮春.蔬菜農藥殘留原因及其控制[J].廣西植保，2006，19（2）：34.

Detection Experimet of Organophosphate and Carbamate Pesticide Residues in Vegetable with Enzyme Inhibition Method

WANG Zhibo

Vegetable samples collected from wholesale markets,farmer markets,supermarkets were detected by enzyme inhibition method using pesticide residues detector coupled with reagent set according to standard (NY/T448-2001).The results showed that the pass-rate was 97.7%.The enzyme inhibition method only needs short time,low cost,simple operation,and it becomes an effective initial method for controlling pesticide residues in China nowadays.

Pesticide residues;Rapid test;Enzyme inhibition

10.3865/j.issn.1001-3547.2009.18.027

王志波（1981-），男，助理農藝師，副主任，主要從事農產品質量檢驗測試工作，電話:13962708462。E-mail:rgwzb@126.com

2009-05-06