結直腸癌中ＭＭＰ－１４及ＣＤ４４ｖ６表達及臨床意義

劉芝蘭　楊延煥

【摘要】 目的 探討MMP-14及 CD44v6與結直腸癌臨床病理因素的關系。方法

對68例結直腸癌中MMP-14及CD44v6的表達進行免疫組化檢測。結果

MMP-14及CD44v6在正常腸黏膜組織及結直腸癌中的表達差異顯著，不同性別及組織分型結直腸癌中MMP-14及CD44v6的表達無差異性，Dukes分期C-D期中MMP-14與CD44v6的表達明顯高于A-B期

(P<0.05)。結論

結直腸癌中CD44v6及MMP-14中表達的檢測，對結直腸癌侵襲性和預后的評估有實際的臨床意義。

【關鍵詞】 結直腸癌； MMP-14； CD44v6； 侵襲

Expression of MMP-14 and CD44v6 in colorectal carcinoma

LIU Zhi-lan，YANG Huan-yan.

Department of Digestion, Qinghai Provincial Peoples Hospital, Xining,

810007, Qinghai Province, China

【Abstract】Objective To investigate the relationship between the

expression of MMP-14 and CD44v6 with clinicopathologic features of colorectal

carcinoma. Methods The expression of MMP-14 and CD44v6 in 68 cases of

colorectal carcinoma was detected by using SP immunohistochemical

technique. Results The difference of MMP-14 and CD44v6 expression between

colorectal carcinoma and normal colorectal tissues had statistical

significance(P<0.05). The positive expression of MMP-14 and CD44v6 was

correlated with Dukes stage(P<0.05), was no relationship with pathological

types and sex. Conclusions The expression of MMP-14 and CD44v6 had a

close relationship with the invasion of colorectal carcinoma. Examination

of expression of these two proteins may be helpful to judge biological

behavior and prognosis of colorectal carcinoma.

【Key words】 colorectal carcinoma； MMP-14； CD44v6； invasion

檢測膜型基質金屬蛋白酶MMP-14和黏附分子CD44v6

在68例結直腸癌中的表達情況，探討它們與癌組織侵襲和轉移的關系，為臨床上進一步了解結直腸癌生物學行為、判斷預后和指導治療提供依據。

1材料與方法

1.1 一般資料

68例結直腸癌病例來源于青海省人民醫院與解放軍536醫院2003年2月至2007年11月手術切除后病理診斷的存檔蠟塊，并調閱相關臨床與病理資料且按Dukes標準分期。68例結直腸癌中男41例，女27例，男女之比為1.52∶1，年齡24～76歲,平均54.4歲。高分化腺癌21例，中分化腺癌34例，低分化腺癌8例，其他類型5例。Dukes分期：A-B期39例，C-D期29例。另取切除的切緣正常結腸壁組織10例作對照。

1.2 免疫組化染色及結果判斷

免疫組化染色使用二步法，即用型MMP-14、CD44v6兔抗人多克隆抗體及第二代通用型二步法檢測系統（pv-9000）購自北京中杉金橋生物技術限公司。MMP-14、CD44v6在胞漿中呈黃色至深棕色顆粒顯色。染色結果按細胞染色強度和染色細胞所占面積二者積分之和來判斷。染色強度積分為：不染色=0，輕度染色=1，中度染色=2，強染色=3；染色面積積分為：無細胞染色=0，<25%細胞染色=1，25%～50%細胞染色=2，>50%細胞染色=3。若2種積分之和>2，則為陽性表達，≤2則為陰性表達。

1.3 統計學分析

統計分析用χ2檢驗，使用SPSS11.0統計軟件。P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 正常結腸黏膜與結直腸癌中MMP-14、CD44v6的表達

10例正常腸黏膜中MMP-14及CD44v6均為陰性表達，68例結直腸癌中，MMP-14陽性表達19例，CD44v6陽性表達17例，MMP-14與CD44v6在正常腸黏膜與結直腸癌中的表達差異顯著。(見表1)

01

2.2 MMP-14、CD44v6的表達與結直腸癌臨床病理因素的關系

不同性別及組織分型中MMP-14與CD44v6的表達無差異性，而Dukes分期C-D期中MMP-14與CD44v6的表達明顯高于A-B期

(P<0.05)。(見表2)

2.3 結直腸癌中CD44v6與MMP-14表達間的關系

CD44v6陽性表達組中的MMP-14陽性表達率高于CD44v6陰性表達組，差異顯著。(見表3)

3 討論

腫瘤細胞的浸潤及轉移與腫瘤細胞的運動、黏附、基底膜及細胞外基質的降解等多種機制相關。基質金屬蛋白酶(matrix

metalloproteinases, MMPs)

是由多種鋅離子依賴性酶組成的能降解細胞外基質蛋白的酶系家族，膜型金屬蛋白酶MMP-14是MMPs家族中的一種特殊蛋白酶，MMP-14可降解Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ型膠原和纖維連接蛋白FN，參與包括基膜等細胞外基質降解過程，還可以通過激活基質金屬蛋白酶MMP-2酶原，活化MMP-2進一步增強其降解作用[1]。而黏附分子CD44是一種跨膜糖蛋白，參與細胞與細胞、細胞與基質之間的特異性黏附。其中含有外顯子v6的異構體CD44v6能與基底膜及細胞外基質的透明質酸結合，且易與毛細血管后小靜脈中的高柱狀內皮細胞結合，使腫瘤更易進入淋巴系統及循環系統[2]。研究顯示CD44v6與肝癌、乳腺癌及肺癌等多種惡性腫瘤的浸潤及轉移密切相關[3-5]。而MMP-14在宮頸癌、乳腺癌及喉癌中的表達與腫瘤的分期、分化及淋巴結轉移情況呈正相關[6-8]。本組研究中，MMP-14與CD44v6在正常腸黏膜組織及結直腸癌中的表達差異統計學意義(P<0.05)，說明惡性腫瘤細胞的黏附與降解基底膜和細胞外基質的能力強于正常組織。但中、低分化與高分化的癌組織間MMP-14與CD44v6的表達無差異性，而Dukes分期C-D期中MMP-14與CD44v6的表達明顯高于A-B期

(P<0.05)，因Dukes分期以有淋巴結及遠處器官轉移作為C、D期的標準，顯示MMP-14與CD44v6陽性表達的結直腸癌組織侵襲性強且易轉移。以上結果與張翠萍等[9]及曹歌等[10]研究報道CD44v6在結直腸癌組織的陽性表達率與腫瘤的大小、分化高低、浸潤深度、臨床分期及淋巴結轉移相關的結果不完全一致，可能與研究對象的選擇及例數有關，對此尚需進一步研究。同時CD44v6陽性組結直腸癌中的MMP-14陽性表達率高于CD44v6陰性組，差異統計學意義(P<0.05)。提示腫瘤的浸潤與轉移過程中，腫瘤細胞對基底膜和細胞外基質的降解可能與其特異性黏附能力相關。以上結果顯示CD44v6及MMP-14可以作為臨床上判斷結直腸癌預后的指標，結直腸癌中CD44v6及MMP-14中表達的檢測，對結直腸癌侵襲性和預后的評估有實際的臨床意義。

參考文獻

[1] 杜月光, 陳慰浙.

基質金屬蛋白酶在胃腸癌中的表達及其抑制劑的研究進展. 中國癌癥雜志, 2002, 12(1):81-84.

[2] Rudy W, Hofmann M, Schwartz-Albiez R, et al. The two major CD44

proteins expressed on a metastatic rat tumor cell line are derived from

different splice variants: each one individually suffices to confer

metastatic behavior. Cancer Res, 1993, 53(6):1262-1268.

[3] 張克蘭, 王志明, 魏尚典, 等.

CD44v6,c-Met在原發性肝癌中的表達及其臨床意義. 中國普通外科雜志, 2008, 17(1):94-97.

[4] 李增才, 俞永忠, 許正昌. VEGF和CD44表達與乳腺癌分期的相關性研究.

現代腫瘤醫學, 2007, 15(9):1249-1251.

[5] 劉波, 金秀國, 劉曉光, 等.

肺癌組織CD44、CD71的檢測及與病理學的關系. 實用腫瘤學雜志, 2006, 20(4):268-270.

[6] 劉冬玲, 李娜萍.

MMP-14、VEGF、E-cadherin與子宮頸癌生物學行為的相關性研究. 華中科技大學學報(醫學版), 2006, 35(6):774-777.

[7] 姚廣裕, 林鵬, 王軍業, 等. MMP-14在乳腺癌中的表達及臨床意義.

腫瘤防治研究, 2005, 32 (5):268-270.

[8] 劉業海, 唐平章, 劉芝華, 等.

基質金屬蛋白酶14基因在人喉鱗狀細胞癌中表達差異的分析. 中華耳鼻咽喉科雜志, 2004, 39(8):501-506.

[9] 張翠萍, 張琪, 武軍, 等.

CD44v6和MMP-9在結直腸癌組織中表達的臨床意義. 中華胃腸外科雜志, 2005, 8 (2):179-180.

[10] 曹歌, 沈志祥, 黃杰安, 等. 結直腸癌中CD44v6, MMP-2,

nm23-H1表達與臨床病理的相關性研究. 腫瘤防治研究, 2002, 29(1):53-56.