聚丙烯酰胺水凝膠注射隆乳并發癥患者外周血淋巴細胞亞群特點研究

[摘要]目的：觀察聚丙烯酰胺水凝膠（PAMHG）注射后發生并發癥者的外周血淋巴細胞的免疫學變化。方法：應用流式細胞分析技術測定注射PAMHG后發生并發癥患者的外周血淋巴細胞各個亞群含量變化并與對照組（健康未注射PAMHG）人群相比較。結果：水凝膠組和對照組外周血B淋巴細胞在各個時間組變化趨勢一致，組間差異無顯著性。外周血T淋巴細胞亞群百分率水凝膠組均存在1～7項不等的指標異常。水凝膠組T3、T4、T8、NK細胞、Tn亞群含量、Ts亞群含量在各個時間組均低于對照組；水凝膠組Tm和Tc亞群在各個時間組均高于對照組。結論：PAMHG作為軟組織充填劑注入人體，引起細胞免疫變化，細胞免疫處于增強狀態，對機體的長期免疫效應尚需進一步積累病例并長期觀察。

[關鍵詞]聚丙烯酰胺水凝膠；免疫反應；并發癥

[中圖分類號]R392.12[文獻標識碼]A[文章編號]1008-6455（2007）10-1340-03

Cellular immunological effects of polyacrylamide hydrogel injected in human body

SUN Bao-dong，LIU Ding-hua，ZHAO Ru，YAN Ying-jun，ZHANG Hai-lin，BAI Ming，QIAO Qun

(Department of Plastic and Aesthetic Surgery，Peking Union Medical College Hospital，Peking Union Medical College，Beijing 100032，China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the cellular immunologic changes in patients who have complications after polyacrylamide hydrogel(PAMHG) injected. Methods To compare the patients in the PAMHG injected group and the healthy control group，we examined the proportion of different types of lymphocyte in peripheral vein blood by flow cytometry. ResultsIn PAMHG group， there are 1-7 proportions of lymphocyte type abnormal at different time point respectively. T3， T4， T8， NK， Tn， and Ts cell proportions in PAMHG group were lower than control group at all time points. Tm and Tc cell proportions in PAMHG group were higher than control group at all time points. There were significant difference at 1 or 2 time point. ConclusionPolyacrylamide Hydrogel stimulates the immune system via cellular immunity. The status of immune system is enhanced. The long term immunologic effect of PAMHG needs further observation in more cases.

Key words: polyacrylamide hydrogel; immunity reaction; complication

聚丙烯酰胺水凝膠做為一種軟組織填充材料，1997年正式引進中國并應用于臨床。聚丙烯酰胺水凝膠因其應用形式簡單，容易被患者接受，短短幾年內被注射者多達幾十萬，注射部位遍布全身。但隨著并發癥的增多以及一些相關問題的凸現，而被禁停使用。國內一些學者對其進行了一些基礎研究，關于注射聚丙烯酰胺水凝膠后患者免疫系統發生的變化，目前相關文獻較少，因此我們對注射隆乳出現并發癥患者進行細胞免疫學研究，探討患者注射聚丙烯酰胺水凝膠后機體的免疫學變化。

1臨床資料

1.1研究對象：在2004年12月～2006年1月，北京協和醫院整形外科收治的聚丙烯酰胺水凝膠注射隆乳術后出現感染、破潰、硬結、疼痛等并發癥、要求取出的患者中，選取36例為研究對象（水凝膠組），注射時間為4天～7年，年齡為22～46歲；選取健康同齡組24名女性志愿者為對照組，根據水凝膠組年齡進行匹配，按照水凝膠注射進入體內時間分為A、B、C、D四組（見表1），測定患者外周靜脈血中淋巴細胞各個亞群組成，了解患者機體免疫功能狀態。

1.2 儀器和試劑： 12mm×75mm有蓋的Falcon管，混勻振蕩器，離心機，加樣槍、Tips。儀器：美國Coulter EPICS ELITE ESP型流式細胞儀。三標抗體FITC-CD4/PE-CD8/PerCP-CD3、雙標抗體FITC-CD3/PE-CD16+CD56、單標抗體PE-CD19、溶血素（美國Becton-Dickinson公司）；熒光微球 Flow Check（美國Beckman Coulter Immunotech公司）。

1.3 標本采集和處理方法：采集靜脈血2ml，EDTA-K2抗凝，室溫保存并于4h內檢測。應用流式細胞分析技術，測定外周靜脈血中淋巴細胞表面CD3、CD4、CD8、CD19、CD16和CD56的表達情況從而計數T、B和NK細胞。

1.4 結果分析：應用SPSS11.5統計軟件對數據進行方差分析，以P<0.05為依據，判斷是否具有統計學差異。

2結果

36例注射水凝膠患者中，均存在淋巴細胞各亞群含量異常（升高或降低），1～7項不等，對照組各項指標均在正常值范圍，結果見表2。

3討論

外周血中淋巴細胞包括B淋巴細胞和T淋巴細胞，淋巴細胞表面有很多膜表面分子，是淋巴細胞接受刺激、識別抗原，與其他免疫細胞進行相互作用的物質基礎。根據白細胞分化抗原不同分為CD3+T淋巴細胞、CD19/20+B淋巴細胞；T淋巴細胞又可以分為CD4+T輔助淋巴細胞、CD8+T抑制淋巴細胞[1-3]。CD4分子和 CD8分子具有增強T淋巴細胞受體（TCR）與抗原呈遞細胞或靶細胞的親和性，有助于激活信號的傳遞。CD16屬于免疫球蛋白家族，表達于中性粒細胞、NK細胞、巨噬細胞和T細胞上。CD25分子是T細胞激活的標志，CD3+CD25+T細胞是調節性T細胞的一個亞群，只占成熟T細胞的一小部分，在誘導自身耐受、維持T細胞自穩、防止自身免疫疾病以及抗移植排斥中都起著重要作用[4]。

CD45分子亦稱白細胞共同抗原(leukocyte common antigen)，根據CD45亞型的表達與否，可將人的T細胞分為初始T細胞(Tnaive，Tn)(CD45RA+)和記憶T細胞(Tmemmory，Tm) (CD45RA-)。T記憶細胞（Tm）具有自我更新、不斷分化成為效應細胞的能力，在細胞免疫中起著重要作用[5-7]。

自然殺傷（NK）細胞在抗腫瘤免疫、克服移植排斥以及抑制自身免疫性疾病的發生中發揮著至關重要的作用[8-9]。

王毓璈[10]發現聚丙烯酰胺水凝膠注入兔體內3個月可以引起CD3+T、CD4+T淋巴細胞升高，提示聚丙烯酰胺水凝膠會引起機體免疫反應。馮曉玲[11]研究發現，注射聚丙烯酰胺水凝膠組IgG和C3表達水平較對照組降低， IgM表達水平較對照組升高，認為聚丙烯酰胺水凝膠注入人體，在機體內可引起免疫學變化。

本研究中發現，患者外周血液淋巴細胞中T細胞發生變化，B細胞無變化，提示患者注射聚丙烯酰胺水凝膠后細胞免疫受影響；T淋巴細胞各種成分的比例隨注射物在體內時間不同而變化，水凝膠注入體內后成熟T細胞總（T3）百分率出現降低，各個時間組與對照組相比組間差異顯著。水凝膠組T4、T抑制/細胞毒（T8）、NK細胞、Tn亞群、Ts亞群、Tactive淋巴細胞在各個時間組均低于對照組，水凝膠組Tm、 Tc亞群在各個時間組含量均高于對照組，分析T3淋巴細胞含量下降的原因可能為T3淋巴細胞持續消耗所致，各組份百分率下降可能是由于其參與免疫反應逐漸消耗所致，從時間序列分析在注入后2～5年變化較明顯，T8淋巴細胞的百分比減少可導致機體清除異物的能力降低，NK細胞變化趨勢與T4細胞含量變化趨勢相符合，表明NK細胞數量變化與T4淋巴細胞亞群對NK細胞調節有關，Tm升高和Tn下降，證實機體細胞免疫處于免疫增強狀態。提示植入物進入體內后抗原刺激持續存在，反映機體存在增強免疫反應狀態，與其它亞群變化相對應，機體存在T細胞活化增強、細胞免疫水平上調，機體針對異物的免疫反應持續存在。

患者外周血免疫細胞數量、結構、功能和種類等的變化，可反映機體的免疫狀態。不同時期、不同患者外周血淋巴細胞亞群百分比的改變并不相同。我們認為，聚丙烯酰胺水凝膠作為異物注入體內可引起機體細胞免疫變化，T3、T4、T8均降低提示免疫細胞的消耗，NK的減少為向局部參與反應所致；TC的增加提示體內細胞免疫為主的反應；Ts的下降反映了對機體免疫的負調控異常，導致機體免疫功能亢進狀態；Tm的增高提示體內持續的免疫刺激存在，機體細胞免疫反應持續處于增強反應狀態，但是聚丙烯酰胺水凝膠注射后對機體的遠期影響尚需加大樣本量進一步觀察

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[10]王毓璈， 楊天鵬， 應奇才， 等. 聚丙烯酰胺水凝膠注入兔體的免疫效應研究[J]. 中華醫學美學美容雜志，2002，8：146-148.

[11]馮曉玲， 易傳勛， 張一鳴，等. 聚丙烯酰胺水凝膠注射后并發癥患者的體液免疫變化[J]. 中華整形外科雜志，2004，20：349-350.

[收稿日期]2007-05-11[修回日期]2007-09-29

編輯/張惠娟