芒種花提取物對(duì)四氯化碳致肝損傷小鼠模型的影響

　　摘要：目的：考查芒種花不同提取物對(duì)CCl致肝損傷模型小鼠的保肝作用。方法：小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、芒種花醇提取物大、小劑量組，水提取物大、小劑量組和醇提物加胡黃連醇提物組，分別連續(xù)7天灌胃給予相應(yīng)的受試藥物，末次給藥后造模小鼠一次性腹腔注射5％CCL花生油10ml／kg染毒，12h后取血檢測(cè)AST、ALT、LDH。結(jié)果：與正常對(duì)照組比較，模型組小鼠AST、ALT升高；與模型對(duì)照組比較，給藥組AST、ALT值均有降低，LDH值部分降低或改變。結(jié)論：芒種花不同提取物對(duì)CCl所致肝損傷小鼠模型有一定保護(hù)作用。
　　關(guān)鍵詞：芒種花；四氯化碳；肝損傷；保護(hù)
　　中圖分類號(hào)：R285.5　文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A
　　文章編號(hào)：1007－2349(2007)11－0035－02
　　
　　芒種花為金絲桃科西南金絲桃(Hypericun heny；Levl.etvan)的干燥地上部分，又名栽秧花、土連翹。其性味苦、辛、寒。有清熱解毒、利尿解痙之功效。民間用于肝炎、利膽、感冒、痢疾等疾病。筆者用芒種花兩種不同溶媒提取物對(duì)四氯化碳所致肝損傷小鼠模型進(jìn)行血清學(xué)改變的實(shí)驗(yàn)觀察，以探索發(fā)現(xiàn)和評(píng)價(jià)芒種花提取物的保肝作用。
　　
　　1 材料與方法
　　
　　1．1 芒種花與胡黃連的藥材，購(gòu)自云南省藥材公司，云南中醫(yī)中藥研究所新藥中心提供提取物。
　　1．1．1 芒種花的醇提取 稱取生藥材1400g，加90％9000ml乙醇浸泡12h后，回流提取1h，過濾，濾液另器保存，再向藥渣中加入70％8000ml乙醇回流提取1h，過濾。合并兩次濾液，濃縮至流浸膏(800m1)。并將其置于60℃烘箱中恒溫烘至于浸膏(1g干浸膏相當(dāng)于4.6g生藥)。
　　1．1．2 芒種花的水提取 稱取生藥材1400g，加9000ml水浸泡12h后，加熱煮沸1h，過濾，濾液另器保存，再向藥渣中加入9000ml水煮沸1h，過濾。合并兩次濾液，濃縮至流浸膏(400m1)，并將其置于60℃烘箱中恒溫烘至于浸膏(1g干浸膏相當(dāng)于5.4g生藥)。1．1．3 胡黃連的提取　稱取生藥材1000g，加90％8000ml乙醇浸泡12h，過濾，濾液另器保存，再向藥渣中加入70％8000ml乙醇回流提取1h，過濾。合并兩次濾液，濃縮至流浸膏(980m1)，并將其置于60℃烘箱中恒溫烘至于浸膏(1g干浸膏相當(dāng)于4.9g生藥)。
　　1．2 試驗(yàn)動(dòng)物 清潔級(jí)ICR種小鼠，體重(20±2)g，雌雄各半，合格證號(hào)：滇實(shí)動(dòng)證第2004009號(hào)，動(dòng)物及飼料由云南省昆明醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
　　1．3 試驗(yàn)器材 小鼠灌胃器，常用手術(shù)剪刀，鑷子，試管，(ALCYON300)全自動(dòng)生化儀，離心機(jī)，恒溫水浴。
　　1．4 藥物與試劑 芒種花醇提液，芒種花水提液，胡黃連醇提液。6.14％花生油CCl4(批號(hào)：4870903－6)。AST檢測(cè)試劑盒(批號(hào)字2004第3060165號(hào))，ALT檢測(cè)試劑盒(批號(hào)字2004第3060162)，LDH檢測(cè)試劑盒(批號(hào)字2004第3060212)。以上試劑盒均由四川省邁克科技有限公司提供。
　　1．5 試驗(yàn)方法　取小鼠70只，雌雄各半，將小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組，造模組，芒種花醇提取物大、小劑量組，芒種花水提取物大、小劑量組，芒種花醇提取物+胡黃連醇提取物組。每組10只小鼠。正常對(duì)照組給予基礎(chǔ)飼料和滅菌飲用水不用CCL染毒；造模對(duì)照組給予基礎(chǔ)飼料和滅菌飲用水喂養(yǎng)7天后，一次性給腹腔注射5％CCl花油10ml／k8染毒；芒種花醇提取物大劑量組(2.55g提取物／kg.d)、小劑量組(0.85g提取物／y/jG/gb7vYmfopRSxbxz2A==kg.d)，芒種花水提取物大劑量組(2.16g提取物／kg.d)、小劑量組(0.72g提取物／kg.d)，芒種花醇提取物(2.55g提取物／kg.d)+胡黃連醇提取物組(0.93g提取物／kg.d)，造模前各受試組小鼠口服灌胃每日1次，灌胃體積10ml／ks連續(xù)灌胃給藥7天，第7天灌胃各受試組動(dòng)物均以1次性腹腔注射5％CCl花生油染毒，12h后，將各組小鼠稱重后，受試各組再行口服灌胃給藥1次。30min后，受試給藥組與染毒12h后造模組，正常對(duì)照組，同時(shí)經(jīng)股動(dòng)脈取血，取血清測(cè)定各組動(dòng)物AST、ALT、LDH值。所得數(shù)據(jù)均用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，用t檢驗(yàn)處理數(shù)據(jù)。
　　
　　2 結(jié)果
　　
　　2．1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 見表1。
　　結(jié)果表明，芒種花醇提物大、小劑量組，水提物大、小劑量組和醇提物加胡黃連醇提物組與造模組相比較，谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)指標(biāo)均有所明顯降低(P＜0.01)，乳酸脫氫酶(LDH)指標(biāo)，除醇提物大劑量組和水提物小劑量組外，實(shí)驗(yàn)給藥組與造模組相比較有所降低(P＜0.01)，門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)指標(biāo)。與造模組比較，均有降低(P＜０.01)，差異有顯著意義。模型組與空白對(duì)照組比較AL了、AST指標(biāo)有明顯增高。表明實(shí)驗(yàn)給藥組對(duì)因CCL所至的肝損傷小鼠模型血清學(xué)AS了、ALT、LDH指標(biāo)均有所降低和改變。
　　
　　
　　3 討論
　　
　　CCL為選擇性肝臟毒物，主要用于動(dòng)物肝損傷模型建立。目前認(rèn)為與CCL自身和其自由基代謝產(chǎn)物有關(guān)，可使細(xì)胞膜系統(tǒng)發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整性，干擾細(xì)胞代謝，引起細(xì)胞損傷，小鼠CC乙染毒12h后，出現(xiàn)動(dòng)物血清中AS丁、ALT、LDH活性增高，CCl染毒致肝損傷小鼠模型是一種經(jīng)典造模方法。一次性染毒多用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)性急性肝損傷的研究，本實(shí)驗(yàn)用芒種花提取物以預(yù)防口服給藥對(duì)一次性CCl染毒致肝損傷小鼠的動(dòng)物模型的影響進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)觀察。結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)各組動(dòng)物血清ALT指標(biāo)與模型組比較均為降低；實(shí)驗(yàn)組除醇提取物大劑量組和水提取物小劑量組外，其它實(shí)驗(yàn)組血清LDH指標(biāo)與模型組比較均有降低；同時(shí)實(shí)驗(yàn)組血清AS7指標(biāo)與模型組比較均有降低趨向。模型組與空白對(duì)照比較，和AST、ALT值高于空白組，表明CCl染毒后，小鼠已造成一定的肝損傷。對(duì)于LDH指標(biāo)數(shù)據(jù)值情況，初步分析。可能與血清量少和溶血有關(guān)，但從數(shù)值分析看有一定的改變趨向關(guān)聯(lián)性，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果所示表明，芒種花水提取物、醇提取物、醇提取物+胡黃連醇提取物均對(duì)因CCl致急性肝損傷小鼠模型血清學(xué)指標(biāo)有影響或不同程度降低，提示有一定的保肝作用，其機(jī)理有待進(jìn)一步研