課外實驗示例——ＡＢＯ血型鑒定

1.實驗目的。

為加深和鞏固學生對輸血與血型方面知識的了解，掌握ABO血型鑒定和輸血的原理，在學過“血液”一節后，教師可組織學生開展“ABO血型鑒定”的課外實驗。實驗中，常會出現因學生怕血、取血方法不當和實驗操作不嚴格而影響實驗效果的現象，這就要求教師進行較為詳細的講解和示范，以確保實驗的成功。

2.實驗原理。

人體的紅細胞中含有A、B兩種凝集原。若紅細胞里含有凝集原A，則血型為A；若紅細胞里含凝集原B，則血型為B；若紅細胞中同時含有A、B兩種凝集原，血型就是AB；若紅細胞不含凝集原，血型就是O。在人的血清中含有抗A、抗B兩種凝集素。A型血的人，血清中含抗B凝集素；B型血的人，血清中含抗A凝集素；O型血的人，血清中同時含抗A和抗B凝集素；AB型血的人，血清中不含凝集素。如果凝集原A遇到抗A凝集素，或凝集原B遇到抗B凝集素時，紅細胞就會發生凝集現象。

3.材料用具。

A型和B型標準血清、90%生理鹽水、70%酒精棉球、碘酒棉球、顯微鏡、載玻片、采血針等。

4.方法步驟。

①取一干凈的載玻片，在兩端分別標上A和B，再取兩個牙簽，分別標上A和B。用一只小滴管吸取標準血清A，放在載玻片的A端，再用另一只小滴管吸取標準血清B，放在載玻片的B端。

②用70%的酒精對采血針和小指肚（或耳垂）進行擦拭消毒后，用采血針刺破皮膚，血液從傷口流出，用一個干凈的小滴管吸取一滴鮮血，放到一個干凈的小試管中，加入0.5-1ml0.9%的生理鹽水進行稀釋；然后用一個消毒的干凈玻璃棒從小試管中蘸取已稀釋的血液，在A、B標準血清中各加一滴，并用牙簽充分攪勻。用碘酒棉球壓住取血的傷口，進行止血。

③15min后，把載玻片放在低倍鏡下檢查，半小時左右可做最后判斷。不同的人血液反應的速度不同，有經驗的化檢員，不需要鏡檢就可以正確做出血型判斷。但是，初學者必須借助鏡檢才能正確地鑒定。

④在顯微鏡下觀察時，若只在B血清內發生紅細胞的凝集反應，則被檢查者為A型血；若只在A血清內發生紅細胞的凝集反應，則被檢查者為B型血；如果A、B兩種血清都發生了凝集反應，被檢查者為AB型血；如果兩種血清都不發生凝集反應，被檢查者為O型血。

5.分析討論。

在實驗中，發生凝集反應后，紅細胞聚集在一起，形成大小不等的塊狀，而未發生凝集反應的紅細胞則分布均勻。輸血時，如果受血者和獻血者的血型不合，輸血后紅細胞會凝集成團，阻礙血液循環，給受血者帶來嚴重后果，甚至死亡。因此輸血時應以輸同型血為原則。異型之間輸血，只有在緊急情況下，不得已才采用。在通常情況下，由于考慮到人類的血型系統種類較多，為了慎重起見，即使在血型相同的人之間進行輸血，也應該先進行交叉配血實驗，即不僅把獻血的紅細胞與受血者的血清進行血型配合試驗，還要把受血者的紅細胞與獻血者的血清進行血型配合試驗，兩者都沒有凝集反應，才能進行輸血。

實驗中應特別注意的是：使用的兩個牙簽、兩個小滴管切忌混用；取血時要待取血部位和采血針上的酒精揮發完以后再取血；用采血針刺破皮膚后，要讓血液自然流出，不能擠壓。

責任編輯 李婧