膿毒癥相關(guān)長鏈非編碼RNA篩選及競爭性內(nèi)源RNA網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

[中圖分類號]R631 [文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A [DOI] 10.19767/j.cnki.32-1412.2025.05.002

Screening of Sepsis-Associated Circular RNAs and Construction of Competing Endogenous RNA Networks

GUANYuwen，LIANGGuiwen，HUANG Zhongwei，QI Lei， JIANGHaiyan （Departmentof EmergencyMedicine，Afliated Hospital of Nantong University，Jiangsu 226001）

[Abstract]Objective：To explore the regulatoryroleof non-coding RNAs（ncRNAs），particularlylong non-coding RNAs （lncRNAs），inthepathological progressionofsepsis，toidentifynvelbiomarkersforarlydiagnosis，andtoiscover potential therapeutic targets for intervening in immune imbalance.Methods：Peripheral blood samples frompatients with sepsisand healthy individualswerecollected.Wesystematicallyanalyzed the specific expression profilesof lncRNAs in sepsis through ceRNA microarray technology. We investigatedtheregulatory mechanisms oflncRNAs insepsis byintegating theinteractionnetworksof microRNAs（miRNAs）and circularRNAs（circRNAs）.Results：The studyrevealed that IncRNAsexhibitedsignificant diferential expresion insepsis，including248up-regulatedand26down-regulated lncRNAs withdiferential expression.CombiningGOenrichmentanalysisandKEGGpathwayclasificationanalysis，theesults indicatedthat lncRNAsmightparticipate intheregulationof inflammatorystormsand immunosuppressonthrough the ceRNA mechanism.Certain IncRNAs were closely asociated with immune imbalance in sepsis，demonstrating potential as biomarkers or therapeutic targets.Conclusion：lncRNAsplayacriticalrole inthepathological progresionofsepsis.Their specific expresionprofilesprovidenovelcandidate biomarkers forearlydiagnosisof sepsisandoferpotentialtargets for therapeutic strategies aimed at modulating immune dysregulation.

[Keywords] sepsis; non-coding RNA;biomarker

膿毒癥（Sepsis）是由于宿主對感染的反應(yīng)失調(diào)，引起危及生命的器官功能障礙I。根據(jù)《拯救膿毒癥運動》（Surviving Sepsis Campaign，SSC）最新指南，膿毒癥需早期診斷和治療以改善預(yù)后并降低死亡率2。然而，自前仍缺乏早期識別膿毒癥的生物標(biāo)志物及針對性治療手段，因此，深入探索膿毒癥的發(fā)病機(jī)制至關(guān)重要。膿毒癥可誘發(fā)心血管功能障礙、急性肺損傷（acute lung injury，ALI）急性腎損傷（acute kidneyinjury，AKI）等器官功能障礙，導(dǎo)致高死亡率3，亟需進(jìn)一步研究膿毒癥誘發(fā)器官功能障礙的病理生理機(jī)制。基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)研究長期集中于蛋白質(zhì)編碼基因，然而人類基因組中約 90% 非編碼序列可轉(zhuǎn)錄為非編碼RNA（ncRNA），ncRNA在多種生物過程中發(fā)揮關(guān)鍵調(diào)控作用。ncRNA可分為短鏈ncRNA（ lt;200 個核苷酸）和長鏈ncRNA（IncRNA， gt;200 個核苷酸）。短鏈ncRNA以微小RNA（miRNA）為主，miRNA參與膿毒癥等多種疾病[8。但對占ncRNA大部分的IncRNA研究仍處于起步階段。

研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA對膿毒癥器官功能損傷有重要作用，同時lncRNA通過調(diào)控核因子 -κB （NF-kF）、NLRP3等信號通路影響炎癥因子釋放。盡管lncRNA不編碼蛋白質(zhì)，但在基因表達(dá)的調(diào)控中發(fā)揮重要作用，可能構(gòu)成膿毒癥關(guān)鍵的內(nèi)源競爭RNA（competingendogenousRNA，ceRNA）調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。根據(jù)與鄰近蛋白質(zhì)編碼基因組的位置關(guān)系，lncRNA可分為基因間型、內(nèi)含子型、雙向型、正義型、反義型和增強(qiáng)子型lncRNA]。按調(diào)控模式，IncRNA可分為順式作用（影響鄰近基因的表達(dá)和/或染色質(zhì)狀態(tài)）和反式作用（在細(xì)胞內(nèi)執(zhí)行多種功能）兩類[2]。lncRNA通過直接結(jié)合DNA、RNA及蛋白質(zhì)參與轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后調(diào)控[13]。在靶基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控中，lncRNA可作為支架或誘餌抑制或激活基因[o]。此外，lncRNA還能增強(qiáng)基因轉(zhuǎn)錄，并通過改變mRNA剪接實現(xiàn)共轉(zhuǎn)錄調(diào)控。lncRNA可影響mRNA穩(wěn)定性，并通過結(jié)合核糖體或mRNA調(diào)控翻譯過程[14。lncRNA還能作為miRNA海綿，間接解除miRNA對靶mRNA的抑制[15]。這些證據(jù)表明，IncRNA是一類龐大、多樣且重要的轉(zhuǎn)錄本，通過多種機(jī)制參與基因表達(dá)調(diào)控。本文旨在為lncRNA在膿毒癥中的作用機(jī)制提供新的分子視角，為膿毒癥的早期診治提供新的方向。

1資料與方法

1.1研究對象選取2024年5月一9月在我院重癥監(jiān)護(hù)室確診的3例膿毒癥患者為研究對象，按指南進(jìn)行規(guī)范治療。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）年齡：18～70歲；（2）符合2016年美國危重病醫(yī)學(xué)會（SocietyofCriticalCareMedicine，SCCM）聯(lián)合歐洲危重病醫(yī)學(xué)會（Eu-ropeanSocietyofIntensiveCareMedicine，ESICM）有關(guān)膿毒癥診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）既往有腫瘤、血液系統(tǒng)疾病、免疫風(fēng)濕性疾病史者；（2）合并重癥急性胰腺炎；（3）2周內(nèi)使用過糖皮質(zhì)激素。以3例健康者作為對照，采樣前后2周未患任何疾病。本研究方案獲得醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，患者或家屬簽署知情同意書。

1.2 實驗室檢測

1.2.1RNA抽提：采集研究對象靜脈血 2～5mL 于抗凝管，快速轉(zhuǎn)移至RNase-free凍存管中， -80^°C 冰箱保存。采用PAXgeneTM血液RNA試劑盒（Cat#762174，Qiagen，Germany），按照廠商提供的標(biāo)準(zhǔn)操作流程抽提樣品總RNA，經(jīng)生物分析儀2100（AgilentTechnologies，US）電泳質(zhì)檢合格后備用。

1.2.2RNA放大和標(biāo)記：采用表達(dá)譜芯片配套試劑盒（Cat.#5190-2305，Agilent Technologies，Santa Clara，CA，US）對樣品總RNA進(jìn)行放大和標(biāo)記，并用RNeasymini kit（Cat.#74106，QIAGEN，GmBH，Germany）純化標(biāo)記后的cRNA。

1.2.3芯片雜交：采用表達(dá)譜芯片配套試劑盒（Cat.#5188-5242，AgilentTechnologies，US），在滾動雜交爐（Cat.#G2545A，Agilent Technologies，US）中 65^°C， 10r/min 滾動雜交 ^17h ，雜交cRNA上樣量 1.65μg 并在洗缸（Cat.#121，Thermo Shandon，US）中洗片。

1.2.4芯片掃描：完成雜交的芯片采用芯片掃描儀（Cat.#G2565CA，Agilent Technologies，US）掃描，軟件設(shè)置染料通道為綠色，掃描分辨率365CA。用特征提取軟件10.7（Agilent Technologies，US）讀取數(shù)據(jù)，最后采用R軟件中l(wèi)imma包進(jìn)行歸一化處理，所用的算法為分位數(shù)Quantile。

1.3差異表達(dá)基因篩選在初步差異分析的基礎(chǔ)上，我們進(jìn)行補(bǔ)充分析以提升結(jié)果的穩(wěn)健性。通過主成分分析剔除個體差異過大的離群樣本，以降低組內(nèi)異質(zhì)性。調(diào)整樣本分組策略，在差異基因篩選階段，同步采用差異倍數(shù)閾值，引入配對 χ_t 檢驗計算 P 值，利用 P 值與 log2FC 的組合標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行雙重篩選。1.4差異基因圖形分析由于差異基因篩選條件的改變，所篩選出的差異基因也會有所變化。可對新篩選的差異基因進(jìn)行散點圖、火山圖、熱圖分析。由于樣本分組信息改變，需要更新樣本相關(guān)性分布圖時，可進(jìn)行主成份分析、樣本相關(guān)性分析、樣本聚類分析。

1.5差異基因的基因功能分析（Gene Ontology，GO）、信號通路分析（pathway）GO富集分析采取luster-Profiler軟件包，挑選的標(biāo)準(zhǔn)是落在某個 上差異的基因數(shù)目 ?2，Plt;0.05 ，圖中 按照富集因子的值從大到小降序排列，取前30個結(jié)果。富集因子定義 Σ=Σ （某個 term 中的差異基因數(shù)目/總的差異基因數(shù)目）八數(shù)據(jù)庫 term 中總的基因數(shù)目/數(shù)據(jù)庫中總的基因數(shù)目）。由于差異基因篩選條件的改變，選出的差異基因也會有所變化。采用DAVID6.8數(shù)據(jù)庫（https：//david.ncifcrf.gov/）對差異表達(dá)基因進(jìn)行KEGG功能富集與GO功能富集分析。

1.6測序數(shù)據(jù)質(zhì)量控制由于原始測序數(shù)據(jù)中會包含測序接頭序列、低質(zhì)量讀段、N率較高序列及長度過短序列，嚴(yán)重影響后續(xù)組裝的質(zhì)量。為保證生物信息分析的準(zhǔn)確性，需對原始測序數(shù)據(jù)進(jìn)行過濾，以得到高質(zhì)量的測序數(shù)據(jù)。具體步驟：（1）修剪序列末端（5'端和3'端）低質(zhì)量（質(zhì)量值小于20）的堿基；（2）使用Cutadapt軟件去除含N比率超過 10% 的堿基序列。

2結(jié)果

2.1差異表達(dá)基因篩選本研究通過ceRNA芯片技術(shù)對膿毒癥患者血液樣本進(jìn)行全轉(zhuǎn)錄組分析，經(jīng)過嚴(yán)格的數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化處理和差異表達(dá)分析，共發(fā)現(xiàn)274個差異表達(dá)的lncRNA，包括248個上調(diào)和26個下調(diào)IncRNA。為直觀展示這些差異表達(dá)基因的特征，分別采用散點圖展示基因表達(dá)量分布，火山圖呈現(xiàn)差異表達(dá)基因的統(tǒng)計學(xué)顯著性，熱圖顯現(xiàn)各組樣本間的表達(dá)模式差異。見圖1和圖2。

紅色：2倍上調(diào)基因；綠色：2倍下調(diào)基因。

左圖，X軸：探針點在對照芯片中標(biāo)準(zhǔn)化后的信號值。Y軸：探針點在樣品芯片中標(biāo)準(zhǔn)化后的信號值。落在圖形中 y=x 直線（圖上中位線）上的點代表這個探針點在兩張芯片中信號值差異Fold Chang ：=1 ，落在圖形中位線兩側(cè)45度線之外的點代表這個探針點在兩張芯片中信號值差異Fold Changegt;2。右圖，X軸：Log2（Fold Change），Y軸： -Log10（P 值）。X軸平行線 ：P 值 =0.05，Y 軸平行線：Fold Change ：=2 ；紅色區(qū)域： P 值 lt;0.05 Fold Change ?2 的差異基因;綠色區(qū)域： P 值 lt;0.05 、Fold Change ?0.5 的差異基因。

圖1lncRNA散點圖和火山圖

圖2IncRNA熱圖

黃色：表示基因表達(dá)水平無變化；紅色：2倍上調(diào)基因；綠色：2倍下調(diào)基因。

2.2IncRNA通過順式機(jī)制調(diào)控膿毒癥疾病的關(guān)鍵途徑通過對膿毒癥中具有順式（cis）調(diào)控作用的lncRNA進(jìn)行ceRNA芯片檢測及GO富集分析，結(jié)果顯示其顯著富集的生物過程主要包括細(xì)胞過程、生物調(diào)控和代謝過程；細(xì)胞組分主要富集于細(xì)胞、細(xì)胞部分和細(xì)胞器；而分子功能則主要集中在結(jié)合和催化活性。提示膿毒癥中IncRNA可能通過順式調(diào)控機(jī)制廣泛參與細(xì)胞基本生命活動、基因表達(dá)調(diào)控及代謝過程，并可能通過與蛋白質(zhì)或核酸分子的結(jié)合或影響酶活性來發(fā)揮生物學(xué)功能，進(jìn)而影響疾病的發(fā)生發(fā)展。見圖3。

通過對膿毒癥中具有順式調(diào)控作用的lncRNA進(jìn)行ceRNA芯片檢測及GO富集分析，選取Top30的顯著富集通路進(jìn)行深人解析。結(jié)果顯示，這些lncRNA參與調(diào)控多種生物過程，其中最顯著的是參與蛋白激酶B信號傳導(dǎo)調(diào)節(jié)和蛋白激酶B信號傳導(dǎo)等關(guān)鍵通路。此外，磷酸酶結(jié)合等蛋白相互作用功能也發(fā)揮重要作用。表明膿毒癥中IncRNA可能通過順式調(diào)控機(jī)制廣泛參與AKT等關(guān)鍵信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程，并通過與磷酸酶等調(diào)控蛋白的相互作用，在疾病炎癥反應(yīng)和免疫細(xì)胞功能調(diào)控中扮演重要角色。見圖4。

2.3對膿毒癥中具有反式調(diào)控作用的lncRNA進(jìn)行GO富集分析通過ceRNA芯片對膿毒癥中具有反式（trans）調(diào)控作用的IncRNA進(jìn)行GO富集分析，結(jié)果顯示這些IncRNA在生物過程方面顯著富集于細(xì)胞過程和代謝過程；在細(xì)胞組分方面主要分布于細(xì)胞、細(xì)胞部分和細(xì)胞器；而在分子功能方面則主要涉及結(jié)合和催化活性。表明膿毒癥中具有反式調(diào)控作用的lncRNA可能通過參與細(xì)胞基本生命活動、調(diào)控代謝過程以及與蛋白質(zhì)或核酸結(jié)合或發(fā)揮酶活性等方式，在疾病的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。見圖5。

通過對膿毒癥中具有反式調(diào)控作用的lncRNA進(jìn)行ceRNA芯片檢測及GO富集分析，選取Top30顯著富集通路進(jìn)行深入解析。結(jié)果顯示，這些lncR-NA主要參與調(diào)控多種生物過程，其中最為顯著的是參與干擾素β產(chǎn)生的調(diào)節(jié)和干擾素β產(chǎn)生。在細(xì)胞組分方面，這些lncRNA顯著富集于高爾基體膜內(nèi)在成分等亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)。表明膿毒癥中具有反式調(diào)控作用的lncRNA可能通過調(diào)節(jié)干擾素 β 等關(guān)鍵免疫因子的產(chǎn)生，并靶向高爾基體等細(xì)胞器，在宿主免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)調(diào)控中發(fā)揮重要作用。見圖6。

2.4對膿毒癥相關(guān)lncRNA的順式靶基因進(jìn)行KEGG通路分類分析基于ceRNA芯片對膿毒癥相關(guān)lncRNA的順式靶基因進(jìn)行KEGG通路分類分析，結(jié)果顯示這些靶基因主要參與以下六大功能模塊：在細(xì)胞過程中顯著富集于運輸與分解代謝通路；在環(huán)境信息處理方面主要涉及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程；在遺傳信息處理中主要參與翻譯調(diào)控；在人類疾病方面與特定類型癌癥相關(guān)通路存在顯著關(guān)聯(lián)；在代謝過程中主要調(diào)控脂質(zhì)代謝；在機(jī)體系統(tǒng)方面則顯著富集于免疫系統(tǒng)相關(guān)通路。這些發(fā)現(xiàn)揭示了膿毒癥中LncR-NA可能通過順式調(diào)控作用影響多個關(guān)鍵生物學(xué)通路，特別是免疫調(diào)節(jié)和代謝重編程過程，為深入理解膿毒癥的發(fā)病機(jī)制提供了新的分子視角。見圖7。

基于ceRNA芯片對膿毒癥相關(guān)lncRNA的順式靶基因進(jìn)行KEGG通路富集分析，選取Top30顯著富集的信號通路進(jìn)行深人解析。研究發(fā)現(xiàn)，軸突導(dǎo)向和光傳導(dǎo)等神經(jīng)相關(guān)通路表現(xiàn)出顯著富集特征。這些結(jié)果表明，在膿毒癥病理過程中IncRNA可能通過順式調(diào)控機(jī)制參與神經(jīng)信號傳導(dǎo)和感覺信息處理等生物學(xué)過程，提示神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)控可能在膿毒癥的全身炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要作用，為探索膿毒癥多器官功能障礙的分子機(jī)制提供了新的研究方向。見圖8。

圖8ceRNA芯片對膿毒癥相關(guān)IncRNA的順式靶基因進(jìn)行KEGG通路分類分析TOP30

2.5ceRNA芯片對膿毒癥相關(guān)lncRNA的反式靶基因進(jìn)行KEGG通路分類分析基于ceRNA芯片對膿毒癥相關(guān)IncRNA的反式靶基因進(jìn)行KEGG通路分類分析，結(jié)果顯示這些靶基因主要參與以下功能模塊：在細(xì)胞過程中顯著富集于運輸與分解代謝通路；在環(huán)境信息處理方面主要參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程；在遺傳信息處中主要涉及蛋白質(zhì)折疊、分選和降解；在人類疾病方面與特定類型癌癥相關(guān)通路存在顯著關(guān)聯(lián)；在代謝過程中主要調(diào)控脂質(zhì)代謝；在機(jī)體系統(tǒng)方面則顯著富集于免疫系統(tǒng)相關(guān)通路。這些發(fā)現(xiàn)表明，膿毒癥中IncRNA可能通過反式調(diào)控作用影響多個關(guān)鍵生物學(xué)過程，特別是免疫應(yīng)答和代謝調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，為深人解析膿毒癥的分子機(jī)制提供了新的理論依據(jù)。見圖9。

通過對膿毒癥相關(guān)IncRNA的反式靶基因進(jìn)行KEGG通路富集分析，選取Top30顯著富集的信號通路進(jìn)行深入研究。結(jié)果顯示，基礎(chǔ)轉(zhuǎn)錄因子和糖基磷脂酰肌醇錨定生物合成等通路表現(xiàn)出顯著富集特征。表明在膿毒癥病理過程中IncRNA可能通過反式調(diào)控機(jī)制影響基因轉(zhuǎn)錄起始和蛋白質(zhì)膜錨定修飾等關(guān)鍵生物學(xué)過程，為深入理解膿毒癥中基因表達(dá)調(diào)控異常和細(xì)胞膜功能紊亂的分子機(jī)制提供了新的研究方向。見圖10。

圖10ceRNA芯片對膿毒癥相關(guān)IncRNA的反式靶基因進(jìn)行KEGG通路分類分析TOP30

3討論

膿毒癥作為一種由感染引發(fā)的全身性炎癥反應(yīng)綜合征，其高死亡率主要歸因于早期診斷困難及缺乏特異性治療手段。膿毒癥常伴隨多器官功能障礙，包括心血管功能異常、急性肺損傷和急性腎損傷，是導(dǎo)致其高死亡率的重要原因[。深入解析膿毒癥的病理生理過程對于優(yōu)化臨床治療策略及開發(fā)新型療法具有重要意義。

近年來ncRNA在膿毒癥發(fā)病機(jī)制中的關(guān)鍵調(diào)控作用逐漸被揭示，為理解膿毒癥的復(fù)雜病理生理過程提供了新的視角。其中，多項最新研究表明lncRNA通過調(diào)控多種生物學(xué)過程參與膿毒癥器官功能障礙的發(fā)生發(fā)展[8。隨著高通量測序和基因芯片技術(shù)的發(fā)展，越來越多的研究揭示了IncRNA在不同疾病中的表達(dá)模式，證實其在生理和病理條件下的差異表達(dá)可能參與膿毒癥等疾病的發(fā)生[9。本研究通過ceRNA芯片技術(shù)，篩選出274個差異表達(dá)的lncRNA，包括248個上調(diào)和26個下調(diào)lncRNA，揭示IncRNA通過多維度調(diào)控ceRNA網(wǎng)絡(luò)參與膿毒癥病理生理過程，為生物標(biāo)志物及潛在靶向治療提供新思路。

有研究表明，IncRNA（如MALAT1、NEAT1）可通過調(diào)控 NF-κB NLRP3等炎癥通路加劇或抑制免疫反應(yīng)20。本研究中差異表達(dá)的IncRNA上調(diào)基因約占 90.5% ，說明炎癥信號（如 NF-κB ）可能直接激活非編碼RNA轉(zhuǎn)錄。通過構(gòu)建ceRNA網(wǎng)絡(luò)，發(fā)現(xiàn)hub基因的靶miRNA預(yù)測IncRNA主導(dǎo)“免疫模塊”（調(diào)控干擾素信號和抗原呈遞）2l。通過對差異表達(dá)的具有順式調(diào)控作用的IncRNA以及具有反式調(diào)控作用的IncRNA進(jìn)行GO富集分析，結(jié)果顯示這些lncRNA廣泛參與細(xì)胞基本生命活動、基因表達(dá)調(diào)控及代謝過程，并可能通過與蛋白質(zhì)或核酸分子的結(jié)合或影響酶活性來發(fā)揮其生物學(xué)功能。差異表達(dá)的lncRNA可能通過順式調(diào)控機(jī)制廣泛參與AKT信號通路等關(guān)鍵細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程，并通過與磷酸酶等調(diào)控蛋白的相互作用，在疾病發(fā)生發(fā)展中產(chǎn)生影響；膿毒癥中具有反式調(diào)控作用的IncRNA可能通過調(diào)節(jié)干擾素β等關(guān)鍵免疫因子的產(chǎn)生，并靶向高爾基體等細(xì)胞器，在宿主免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)調(diào)控中起到重要作用。KEGG分析揭示的PI3K-AKT通路富集值得深入探討。本研究發(fā)現(xiàn)，順式作用的lncRNA（如LNCAROD）鄰近調(diào)控AKT1基因，而反式作用的IncRNA（如MALAT1）則通過結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子（如STAT3）遠(yuǎn)程調(diào)控AKT表達(dá)。這種雙重調(diào)控可能形成\"快速響應(yīng)-持續(xù)激活\"的時序模式：順式作用在感染初期快速啟動AKT信號，反式作用則維持后期代謝重編程。這與膿毒癥患者血糖動態(tài)變化（早期高血糖 $$ 后期低血糖）的臨床觀察高度一致。代謝紊亂與免疫失調(diào)的相互促進(jìn)是膿毒癥的核心特征[]。

lncRNA調(diào)控的GPI錨定生物合成異常（ P=4.6× 10^-5 ）可能影響CD14等受體膜定位，導(dǎo)致LPS敏感性改變。這些發(fā)現(xiàn)將“免疫-代謝軸\"理論從蛋白質(zhì)層面擴(kuò)展至RNA調(diào)控層面。“軸突導(dǎo)向”通路在lncRNA順式靶標(biāo)中的富集 P=7.3×10^-6 是本研究的重要發(fā)現(xiàn)。差異基因如SLIT2、ROBO1原本參與神經(jīng)元遷移，卻在膿毒癥中異常表達(dá)。近年研究表明，迷走神經(jīng)通過 α7nAChR 受體參與神經(jīng)元受體調(diào)控巨噬細(xì)胞功能22，我們的結(jié)果提示IncRNA可能介導(dǎo)這種“神經(jīng)-免疫對話”，這為探索迷走神經(jīng)刺激治療膿毒癥提供了分子靶點。我們在該研究的基礎(chǔ)上，預(yù)實驗結(jié)果顯示靶向lncRNA肺腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)轉(zhuǎn)錄本1（metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript1，MALAT1）的反義寡核苷酸（antisense oligonu-cleotides，ASO）藥物可改善膿毒癥小鼠的生存率。與Seymour等提出的膿毒癥分子分型（MARS分類）相比，本研究發(fā)現(xiàn)的ceRNA網(wǎng)絡(luò)更傾向于內(nèi)毒素型（以脂多糖反應(yīng)為特征）和炎癥型。特別值得注意的是，我們的PI3K-AKT調(diào)控模塊與Hotchkiss提出的“免疫抑制學(xué)說”形成有趣互補(bǔ)：AKT信號過度激活可能導(dǎo)致免疫細(xì)胞“耗竭”，而不僅是功能抑制。這一發(fā)現(xiàn)可能為膿毒癥分期治療提供新思路一早期抑制AKT，后期增強(qiáng)其活性。

[參考文獻(xiàn)]

[1]ARINA P，HOFMAENNERD A，SINGER M.Definition and epidemiology of sepsis[J].Semin Respir Crit Care Med， 2024，45（4）：461-468.

[2]DELLINGER R P，RHODES A，EVANS L，et al. Surviving sepsiscampaign[J].CritCareMed，2023，51（4）：431-444.

[3] SCHLAPBACHLJ，WATSONRS，SORCELR，et al. International consensus criteria for pediatric sepsis and septic shock[J]. JAMA，2024，331（8）：665-674.

[4]常心怡，韓藝.巨噬細(xì)胞極化在膿毒癥免疫及器官功能障 礙中的作用[J].南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2024， 44（7） ：985-991.

[5] VINKEL J，RIB L，BUIL A，et al. Key pathways and genes that are altered during treatment with hyperbaric oxygen in patients with sepsis due to necro tizing soft tissue infection （HBOmic study）[J].Eur JMedRes，2023，28（1）：507.

[6] PANNI S，LOVERING R C，PORRAS P，et al. Non-coding RNA regulatory networks[J].Biochim Biophys Acta Gene Regul Mech，2020，1863（6）：194417.

[7] AHMAD BHAT A，RIADI Y，AFZAL M，et al. Exploring ncRNA-mediated pathways in sepsis-induced pyroptosis[J]. Pathol Res Pract，2024，256：155224.

[8]FORMOSA A，TURGEON P，DOS SANTOS C C. Role of miRNA dysregulation in sepsis[J].Mol Med，2022，28（1）： 99.

[9]BRIDGESMC，DAULAGALA A C，KOURTIDISA.LNCcation：lncRNA localization and function[J]. JCell Biol，2021， 220（2）：e202009045.

[10] HERMAN A B，TSITSIPATIS D，GOROSPE M. Integrated lncRNA function upon genomic and epigenomic regulation [J].Mol Cell，2022，82（12）：2252-2266.

[11]GRAMMATIKAKISI，LAL A. Significance ofIncRNA abundance to function[J]. Mamm Genome，2022，33（2）： 271-280.

[12] MADHUGIRI R，NGUYEN H V，SLANINA H，et al. Alpha-and betacoronavirus Cis-acting RNA elements[J]. Curr Opin Microbiol，2024，79：102483.

[13] LIU W，GENG F，YU L. Long non-coding RNA MALAT1/ microRNA 125a axis presents excellent value in discriminating sepsis patients and exhibits positive association with general disease severity，organ injury，inflammation level， and mortality in sepsis patients[J].JClin Lab Anal，2020， 34（6）：e23222.

[14] HOPFLER M，ABSMEIER E，PEAK-CHEW SY，et al. Mechanism of ribosome-associated mRNA degradation during tubulin autoregulation[J].Mol Cell，2023，83（13）： 2290-2302.

[15]SHETTY A，VENKATESH T，KABBEKODU SP，et al. LncRNA -miRNA -mRNA regulatory axes in endometrial cancer：a comprehensive overview[J].Arch Gynecol Obstet，2022，306（5）：1431-1447.

[16] ABE M，SHIGA H，TATSUMI H，et al. Results of the 2018 Japan society for blood purification in critical care survey ： current status and outcomes[J]. Ren Replace Ther，2022，8 （1）：58.

[17] LI SL，LI X，JIANG S S，et al. Identification of sepsis-associated mitochondrial genes through RNA and single-cell sequencing approaches[J]. BMC Med Genomics，2024，17 （1）：120.

[18] WANG R，ZHAO JL， WEI Q，et al. Potential of circulating IncRNA CASC2 as a biomarker in reflecting the inflammatorycytokines，multi -organ dysfunc tion，disease severity， and mortality in sepsis patients[J].J Clin Lab Anal， 2022，36（8）：e24569.

[19] 錢鐳元，修光輝，孫潔，等.lncRNA-miRNA-mRNA軸在 膿毒癥炎癥免疫機(jī)制中的研究進(jìn)展[J].華中科技大學(xué)學(xué) 報（醫(yī)學(xué)版），2023，52（1）：117-122.

[20] XUE R，YIU W H，CHAN K W，et al. Long non-coding RNA NEAT1，NOD-like receptor family protein 3 inflammasome，and acute kidney injury[J].JAm Soc Nephrol， 2024，35（8）：998-1015.

[21] LI J，WU X，LI C，etal. Identification and Validation of Immune -Related Biomarker Gene and Construction of ceRNA Networks in Septic Cardiomyopathy[J].Front Cell Infect Microbiol，2022，12：912492.

[22] KELLY MJ，BREATHNACHC，TRACEY KJ，et al. Manipulation of the inflammatory reflex as a therapeutic strategy[J]. Cell Rep Med，2022，3（7）： 100696. [收稿日期12025-07-10