布魯氏菌病在奶山羊場的流行特征與實驗室診斷方法比較

布魯氏菌病（Brucellosis）是一種由布魯氏菌引起的，具有傳染性的人獸共患病，母畜主要特征為不孕、流產、產死胎；公畜主要特征為睪丸炎，關節炎，部分動物還會出現神經損傷等；人類感染該病后出現反復發熱、乏力、關節疼痛等癥狀，嚴重威脅著公共衛生安全]。世界動物衛生組織（OIE）將布魯氏菌病列人法定報告的動物疫病名單，我國也將該病列入二類動物疫病。在奶山羊養殖領域，布魯氏菌病的危害尤為顯著。感染布魯氏菌的奶山羊，生殖系統會遭受嚴重破壞，母羊常出現流產、早產、死胎以及不孕等問題，嚴重影響奶山羊的繁殖效率，使得奶山羊場的犢羊出生率降低，直接阻礙奶山羊種群的擴大與更新2。為提高布魯氏菌病診斷效率，本文以布魯氏菌病在奶山羊場的流行特征與實驗室診斷方法展開研究，旨在為廣大學者提供參考幫助及建議。

1布魯氏菌病在奶山羊場流行特征

1.1傳染源

奶山羊布魯氏菌病傳染源主要集中于病羊、帶菌羊。感染布魯氏菌的奶山羊臨床表現并無明顯特征，但體內攜帶布魯氏菌，屬于疾病傳染隱患的奶山羊群體。如奶山羊場母羊患有布魯氏菌病，母羊極易出現流產現象。此外，布魯氏菌會隨流產物、胎衣等排出，具有極高的細菌含量和傳染性。根據鳳翔區動物疫病預防控制中心2023一2024年監測數據，全區奶山羊場布魯氏菌病平均陽性率為 0.39% 其中隱性感染羊占陽性病例的 68% 。病羊和帶菌羊是主要傳染源，尤其在母羊流產高發期，約 75% 的布魯氏菌污染事件與流產胎兒、胎衣處置不當有關。鳳翔區某規模化奶山羊場2023年因未規范處理流產胎衣，導致場內 12% 的奶山羊感染，奶山羊排泄物攜帶病菌的高傳染性[3]。

1.2傳播途徑

第一，消化道傳播。消化道傳播為布魯氏菌病在奶山羊場常見的傳播途徑，如奶山羊場飼料儲存條件不佳，通風不良、濕度較大，容易滋生細菌，飼料被病羊接觸污染，從而增加了其他奶山羊經消化道感染的風險。根據調查，在使用開放式草料堆放區的奶山羊場中，飼料受糞便污染率達 31% ，其中青貯飼料污染率最高。飲用未經消毒水源的奶山羊，布魯氏菌感染風險較使用凈化水的奶山羊高2.3倍。

第二，皮膚黏膜傳播。直接接觸病羊及其排泄物、分泌物，如在給病羊進行助產、接羔、擠奶、治療等操作時，若工作人員未采取有效防護措施，如未佩戴手套、口罩、防護服等，布魯氏菌可通過皮膚微小傷口、破損處或黏膜，如眼結膜、口腔黏膜等進入人體或其他奶山羊體內。

第三，呼吸道傳播。奶山羊養殖環境中，尤其是通風條件較差的羊舍內，當病羊出現咳嗽、打噴嚏或甩頭等動作時，會將含有布魯氏菌的飛沫排放到空氣中并形成氣溶膠。健康奶山羊在呼吸過程中，吸入含有病菌氣溶膠，極易感染布魯氏菌病。

第四，經產道感染。如果給奶山羊做人工授精時，使用的公羊精液中帶有布魯氏菌，或者是患病的公羊和健康的奶山羊進行交配，那么其均易引起母羊感染布魯氏菌病。給母羊分娩操作不當、助產時也會造成奶山羊生殖道黏膜破損，易感染布魯氏菌。

2實驗室診斷方法對比研究

2.1實驗材料

收集鳳翔區2024年158個行政村（散養戶以村為單位）、37個規模羊場（養羊大戶）的奶山羊場血清樣品，共計收集6327份。實驗試劑選用國內知名試劑，如虎紅平板凝集抗原（哈爾濱某生物科技股份有限公司）、試管凝集抗原（蘭州某生物制品所）、布魯氏菌ELISA檢測試劑盒（青島某生物技術公司）。

2.2實驗方法

第一，虎紅平板凝集試驗。虎紅平板凝集試驗作為布魯氏菌病常用的血清學檢測方法，該試驗原理基于抗原抗體特異性結合反應，虎紅平板凝集試驗所用抗原為酸性帶色抗原，可抑制血清中IgM類抗體凝集活性。本次試驗參照鳳翔區動物疫病診斷實驗室標準操作流程，在 20～25°C 室溫下進行， 4min 內觀察結果，試驗方法步驟如下：一是采用干燥干凈的玻片或玻璃板，在其上面劃分 4cm2 格。二是將被檢血清和虎紅平板凝集抗原各取 0.03mL 滴入格子當中，使用混合棒進行劇烈混勻。三是操作前將被檢血清和抗原置于室溫下孵育 30～60min ，保證反應的正常進行。四是每次試驗中設陰性血清和陽性血清作為對照以保持試驗的準確性。五是受檢血清呈現可見肉眼凝集，即為陽性；反之則為陰性，顯示為均勻粉紅色。

第二，試管凝集試驗。試管凝集試驗作為常見血清學診斷方法，目前在布魯氏菌病檢測中應用廣泛。本次試驗：嚴格按照《布魯氏菌病防治技術規范》稀釋血清和抗原，在37 °C 溫箱反應20h后判定結果，具體試驗步驟如下：一是對被檢血清進行稀釋，稀釋好血清后，向各管中加入 0.5mL 已稀釋為1：20的抗原，并振搖均勻，使各反應管反應總量為 1mL 。二是試驗設陰性血清對照、陽性血清對照和抗原對照，陰性血清和陽性血清稀釋及抗原方法與被檢血清相同，陽性血清最高稀釋度應超過其效價滴度，抗原對照則是在0.5mL 稀釋液中加入 0.5mL 抗原。

第三，酶聯免疫吸附試驗。酶聯免疫吸附試驗（enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA）基于抗原抗體特異的結合性反應，依靠酶標記和免疫吸附的原理而進行檢測。該方法作為目前布魯氏菌病常用的診斷方法，主要有間接ELISA法和競爭ELISA法兩種方式。本次試驗選取間接ELISA法，即將抗原吸附到固相載體上形成固相抗原。

2.3診斷方法比較分析

第一，敏感性對比。通過對不同方法診斷布魯氏菌病的敏感性進行對比，具體數據如下。

表1布魯氏菌病不同診斷方法敏感性對比表

一是虎紅平板凝集試驗的操作非常便捷、迅速，虎紅平板凝集試驗對奶山羊布魯氏菌病檢敏感性良好，可大批量初篩陽性質檢樣本，尤其適合于大批量羊群初篩。但是虎紅平板凝集試驗也存在不足，在樣品中抗體含量少時容易遺漏陽性樣本。

二是試管凝集試驗是經典血清學診斷方法，但敏感性不高，實際檢測時，早期發病或者隱性感染羊因血清中抗體水平不高，試管凝集試驗對陽性羊的檢出靈敏度不高，極易發生漏檢，從而延誤疫情發現和控制時機。

三是酶聯免疫吸附試驗，能夠檢出較低含量的抗體，在布魯氏菌病的早期診斷發現隱性感染者方面具有顯著優勢。間接ELISA方法步數較多，極易在操作中因操作失誤出現誤差，影響檢測結果。

第二，特異性對比。通過對不同方法診斷布魯氏菌病的特異性進行對比，具體數據如下。

表2布魯氏菌病不同診斷方法特異性對比表

一是虎紅平板凝集試驗特異性相對較低，由于其檢測主要是IgM抗體，易受到動物體內其他IgM抗體干擾，導致結果判定不準確，只能作為初篩方法。

二是試管凝集試驗特異性相對較高，能夠較為準確地檢測出布魯氏菌抗體。但該試驗受診斷菌不穩定、易出現自凝影響，如果電解質濃度和pH不適當，也可引起非特異性凝集，出現假陽性結果。

三是ELISA因使用競爭ELISA可避免布魯氏菌病與類似病原菌的競爭反應，能準確區別布魯氏菌抗體與其他病原菌抗體，提高特異性。ELISA間接法雖然整體特異性較好，但因二抗可能與樣品中的其他蛋白質產生非特異性反應，增加交叉反應，而使其特異性不如ELISA間接法。

結語

綜上所述，以布魯氏菌病在奶山羊場的流行特征與實驗室診斷方法比較研究顯示，其流行特征呈現多方面的特點。傳染源主要為病羊和帶菌羊，其可通過多種途徑傳播，消化道、皮膚黏膜、呼吸道和生殖道傳播均為常見的傳播途徑，導致疫情在奶山羊場中極易擴散。對實驗室診斷方法進行分析發現，虎紅平板凝集試驗操作簡便、檢測快，適合大規模初篩，但結果易受人為因素和抗原制備條件影響，且無法區分自然感染和疫苗免疫抗體。試管凝集試驗能半定量檢測抗體，特異性相對較高，但操作繁瑣，敏感性不足，易出現假陽性結果。酶聯免疫吸附試驗靈敏度高、特異性強、可高通量檢測，但操作復雜，成本高，對操作人員技術要求也較高。地區應綜合自身實際情況，合理選擇診斷方法，以此來提高診斷效率，保障奶山羊場養殖效益的提升。

參考文獻：

[1]王海霞.2021—2023年平頂山地區布魯氏菌病流行病學調查分析[J].罕少疾病雜志，2025，32（05）：165-167.

[2]路靜，閆小芹，楊佳冰，等.寧夏牛羊養殖場戶布魯氏菌病知信行調查及影響因素分析[J].智慧農業導刊，2025，5（09）：37-42.

[3]張令.盤州市中小型規模養羊場布魯氏菌病的防控措施探討[J].吉林畜牧獸醫，2025，46（04）：100-102.

收稿日期：2025-06-06

作者簡介：李保軍（1978一），男，漢族，本科，獸醫師。研究方向：動物疫病預防控制及實驗室檢測。