快速檢測技術在獸醫實驗室疫病診斷中的應用探討

近年來，受各種動物疫病的發生與威脅的影響，動物養殖產業發展受到嚴重沖擊。特別是近年來非洲豬瘟、禽流感等多種重大傳染性疾病的廣泛傳播，對動物養殖產業造成毀滅性的打擊。獸醫實驗室在開展動物疫病診斷期間，借助快速診斷技術能夠及時發現動物疫病的發生并快速應對，提供防控方案，從而將動物疫病的危害與發生流行控制在最低程度。

1獸醫實驗室工作內容概述

1.1獸醫實驗室概述

獸醫實驗室是指從事動物疫病的診斷、病原體種類檢測、動物產品殘留檢測、免疫學檢測及動物健康監控的機構，通常是由獸醫學院、大型動物相關企業、農業農村部門、獸醫研究機構等部門設立及運營[。獸醫實驗室在動物疫病診斷方面，可以依據收集的動物臨床樣品，包含血液、組織、排泄物等，通過處理后實施分析、檢測，從而確定動物疫病致病源種類，尋求發病原因，從而為精準制定治療防控方案提供依據。獸醫實驗室在開展動物疫病種類檢測時，需要通過分子生物學技術、細菌培養、血清學檢測等措施，進而達到精準確診的效果，不同檢測方式在檢測時間、檢測效果上存在差異。快速檢測技術作為獸醫實驗室多種檢測技術中的一大類，其具有高效、操作便捷等優點，包含酶聯免疫吸附檢測技術、膠體金免疫試紙檢測技術等。

1.2獸醫實驗室監測內容

獸醫實驗室可以開展多種動物健康方面的檢測管理，通常包含病原體檢測、血液檢測、組織病理學檢測、免疫學檢測、藥物濃度檢測等5個方面2

病原體檢測：獸醫實驗室可以通過收集動物樣品，例如組織、排泄物等，對其致病病原體進行檢測，檢測內容包含細菌、病毒、真菌、寄生蟲等，為動物疫病確診提供關鍵依據。常見檢測方法包含培養、酶聯免疫吸附試驗、聚合酶鏈反應試驗等。

血液檢測：收集動物的血液樣品，送至獸醫實驗室進行動物血液參數的檢測分析，例如動物血液中紅細胞計數、白細胞計數、血小板計數等，幫助獸醫更為精準地了解動物的健康情況，從而達到疾病的確診效果。

組織病理學檢測：該技術是指對獲取的動物體內器官組織等樣品開展病理學觀察、檢測，可以用于對動物炎癥、病理變化等多方面觀察，進而對動物的疾病種類、治療效果及預后評估等提供參考依據。

免疫學檢測：獸醫實驗室在開展免疫學檢測時，通常包含動物體內某種抗體檢測、細胞免疫檢測等。通過對動物體內抗體水平數據的獲取，評估動物是否感染某種致病源或是否接種過特定疫苗及疫苗接種效果。

藥物濃度檢測：對于使用藥物治療過的動物，特別是應用抗生素治療的動物，通過獲取動物血液、尿液等作為樣品，對其樣品內的藥物濃度進行檢測，從而確保用藥范圍的科學性，避免用藥過多出現藥物殘留超標或用藥過少影響治療效果。

2快速檢測技術在獸醫實驗室疫病防控中的作用

2.1病原體鑒定與檢測

獸醫實驗室在進行動物疫病診斷期間，借助快速檢測技術，可以實現對動物體內的致病原種類的快速診斷。在進行快速診斷時，通過獲取發病動物的體液、排泄物、血液等，實施擴增診斷，明確致病源的病原體種類，例如某種或多種細菌、病毒、寄生蟲等，從而達到確診效果[3。快速診斷技術的應用，對動物疫病的及時診斷、治療具有關鍵性作用，還可以幫助養殖場實現動物疫病的針對性預防及控制管理。

2.2流行病學調查

獸醫實驗室可以借助快速檢測技術對動物疫病的病原開展檢測及種類的鑒定，包含各種病毒、細菌、支原體、寄生蟲等病原。通過對病原的分離、鑒定等，可以明確動物疫病致病原因，并對其展開流行病學特性分析及溯源。通過對發病動物樣品的收集及檢測，對動物疫情開展針對性監測，掌握不同地區、不同動物的疫病發生信息。通過收集的信息、數據進行統計、分析處理，實現對周邊地區動物疫情的提前預警，科學控制動物疫病的擴散。在動物疫情流行期間，為控制疫病的進一步擴展，獸醫實驗室能夠協助養殖場開展動物流行病學調查。通過分析采集的發病動物樣品信息，明確疫病的主要傳播途徑、病原體傳播范圍及傳播的適宜環境條件，從而針對性制定防控管理方案。

3快速檢測技術在獸醫實驗室疫病診斷中的應用

快速檢測技術目前在獸醫實驗室動物疫病診斷中應用廣泛，下文以非洲豬瘟為例，對獸醫實驗室中對該病的快速檢測技術應用方式進行分析。

3.1通過病原檢測入手的快速檢測技術

第一，病毒分離培養檢測技術。病毒分離培養檢測技術是獸醫實驗室中最為常見、傳統的檢測技術。在操作前，先收集疑似發生非洲豬瘟的病豬樣品（包含血液、排泄物、組織樣品等），將樣品接種至單核細胞或適宜的原代細胞培養血中培養觀察。在培養過程中，依據培養血中病毒的增殖情況，添加相應的生長因子、血清等，經過48～72h的處理后，對培養出的病原物進行觀察，從而達到確診的效果。

第二，熒光抗體檢測技術。熒光抗體檢測技術應用在獸醫實驗室非洲豬瘟診斷中，具有檢測時間短、成本低等優勢。該技術應用時，是借助熒光色素結合抗體反應，將疑似發病非洲豬瘟的樣品固定在顯微鏡下，并加入血清，血清中被熒光素標記的抗體與非洲豬瘟抗原兩者進行結合，并表現出相應的特征。在獸醫實驗室下，操作該技術需要借助顯微鏡完成觀察，無法應用在養殖場內現場檢驗。

第三，紅細胞吸附檢測技術。非洲豬瘟病毒在侵染豬體后，會發生病毒吸附紅細胞的現象。因此，獸醫實驗室檢測時，可以從病豬的血液樣品中觀察到細胞受病毒影響表現出的特殊圖像。目前，紅細胞吸附檢測技術在非洲豬瘟快速檢測中較為常見，操作時間短，僅需4～10h即可達到確診效果。但隨著非洲豬瘟毒株的變異發展，存在部分毒株無紅細胞吸附的表現，因此，該技術逐漸被其他新型快速檢測技術所替代。

第四，核酸檢測技術。獸醫實驗室中有多種可以用于非洲豬瘟的核酸檢測技術，例如聚合酶鏈反應檢測技術、熒光定量聚合酶鏈反應檢測技術、微滴數字聚合酶鏈反應檢測技術、循環介導等溫擴增檢測技術等。其中，聚合酶鏈反應檢測技術，在獸醫實驗室中是對非洲豬瘟檢測應用最為廣泛的快速檢測技術之一，該技術檢測期間操作簡便、成本低、效果好、適用性較好。聚合酶鏈反應檢測技術是基于非洲豬瘟復雜的基因型進行設計，能夠對非洲豬瘟各類基因型病毒進行檢測，檢測范圍廣，敏感度高；熒光定量聚合酶鏈反應檢測技術，在獸醫實驗室中，檢測非洲豬瘟病毒的操作相對較為便捷，檢測結果精準度高。該技術是指在常規聚合酶鏈反應檢測技術的基礎上，加入熒光色素或熒光探針，借助熒光的反應對整個檢測過程進行記錄的技術。在實施期間，該技術在常規PCR基礎上加入熒光標記，實現對樣品的定量分析，促使其敏感度提升、效率增強。該技術針對非洲豬瘟病毒具有特異性，對豬口蹄疫病毒、禽流感病毒等其他病毒無交叉反應。熒光定量聚合酶鏈反應檢測技術檢測非洲豬瘟時間僅為 ^1h ，且精準度高，為非洲豬瘟疫病的防控極大地縮短確診時間，為疾病防控爭取時間。

3.2通過抗體檢測入手的快速檢測技術

第一，酶聯免疫檢測技術。酶聯免疫檢測技術用于非洲豬瘟抗體檢測期間，具有方便、速度快、大批量檢測的優點。目前，在國內獸醫實驗室中，該技術多以間接酶聯免疫檢測技術較為常見，研究學者使用PK205R作為包被抗原，建立了一種非洲豬瘟快速間接酶聯免疫檢測技術，該技術檢測特異性強、敏感度高，且檢測中變異系數小于 10% ，顯著提升非洲豬瘟實驗室檢測效率。

第二，膠體金免疫試紙檢測技術。膠體金免疫試紙檢測技術是借助膠體金顆粒作為非洲豬瘟免疫標記的原理，檢測后，可以僅憑人體肉眼分辨出檢測結果，無需借助各種儀器、設備，操作便捷、效率高。該技術應用期間，不會與其他病毒之間產生交叉反應，在基層獸醫實驗室或養殖場現場非洲豬瘟檢測環境中應用較為廣泛。目前，膠體金免疫試紙檢測技術對比酶聯免疫檢測技術，兩者檢測一致性較高，誤差較小。

結語

綜上所述，快速檢測技術在獸醫實驗室疫病檢測中的應用，可以幫助技術人員快速了解病原物的種類、明確病原物的流行病學特征，縮短病原確診時間，為動物疫病的預警、防控爭取時間，從而達到早發現、早治療、早防控的作用，促進我國動物養殖產業快速健康發展。

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收稿日期：2025-07-09

作者簡介：阿依努爾·肉孜（1976—），女，維吾爾族，本科，高級獸醫師。研究方向：動物疫病預防及檢測。