布病是《中華人民共和國傳染病防治法》中規(guī)定的乙類傳染病,《中華人民共和國動物防疫法》將其列為二類動物疫病。其危害貫穿畜牧業(yè)經(jīng)濟(jì)發(fā)展、人類健康及社會穩(wěn)定,具有多維度、多層次的破壞性。
1布魯氏菌病的常用檢測方法
1.1血清學(xué)檢測
目前常用的血清學(xué)檢測方法包括虎紅平板凝集試驗(RBPT)、試管凝集試驗(SAT)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)等。RBPT操作簡便、快速,但特異性較低,容易出現(xiàn)假陽性結(jié)果;SAT準(zhǔn)確性較高,但操作繁瑣、耗時較長;ELISA雖然具有較高的靈敏度和特異性,但試劑成本較高,對實驗室條件要求較嚴(yán)。此外,不同檢測方法的結(jié)果存在差異,給布病的確診和防控帶來困難。例如,在對同一批牛羊血清的檢測中,RBPT檢測出的陽性率為 15% ,而SAT檢測出的陽性率僅為 10% ,兩者結(jié)果存在較大差異[3]。
1.2病原學(xué)檢測
病原分離培養(yǎng)是診斷布病的金標(biāo)準(zhǔn),但布魯氏菌生長緩慢,培養(yǎng)條件苛刻,需要在含 5%~10% 二氧化碳的環(huán)境中培養(yǎng),且布魯氏菌生長緩慢,培養(yǎng)周期長達(dá)2~4周,難以在規(guī)定時間內(nèi)得出檢測結(jié)果,容易錯過最佳治療時機(jī),延誤疫情防控工作。同時,病原學(xué)檢測存在生物安全風(fēng)險,需要進(jìn)行嚴(yán)格的實驗室防護(hù)。
1.3分子生物學(xué)檢測
主要有聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)和熒光定量PCR(qPCR),PCR具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、檢測速度快等優(yōu)點,但對實驗室設(shè)備和技術(shù)人員要求較高,若操作人員未嚴(yán)格按照技術(shù)規(guī)程進(jìn)行操作,則會導(dǎo)致樣本污染和出現(xiàn)試驗誤差,從而影響檢測結(jié)果。qPCR是在PCR的基礎(chǔ)上添加熒光基團(tuán),通過實時監(jiān)測熒光信號來實現(xiàn)定量分析病毒核酸的含量,且在靈敏度、特異性、自動化程度和避免污染等方面具有顯著優(yōu)勢。
2布魯氏菌病檢測工作現(xiàn)狀
2.1群眾重視程度低
第一,畜牧獸醫(yī)部門的檢測。一是部分養(yǎng)殖場(戶)對布病認(rèn)識不足,重視程度不夠,通常不主動配合農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門開展布病防控工作,存在漏檢現(xiàn)象,導(dǎo)致不能及時發(fā)現(xiàn)疫情隱患,造成疫情發(fā)生并擴(kuò)散。二是一些養(yǎng)殖場(戶)對牲畜樣本采集不上心,更舍不得多抽自家牲畜的血液,導(dǎo)致了采血部位不當(dāng)、采血量不足、采血耗材選擇不當(dāng)、樣本保存和運(yùn)輸條件不符合要求等問題,影響了檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。有研究表明,樣本采集不規(guī)范導(dǎo)致檢測結(jié)果假陰性或假陽性的比例可高達(dá) 20%[4] L
第二,醫(yī)療機(jī)構(gòu)的檢測。一是公眾對布病的認(rèn)知度較低,主動進(jìn)行檢測的意識不強(qiáng)。二是部分醫(yī)療機(jī)構(gòu)對布病的診斷能力不足,特別是基層醫(yī)療機(jī)構(gòu),缺乏必要的檢測設(shè)備和專業(yè)技術(shù)人員,容易導(dǎo)致漏診和誤診。在某基層醫(yī)院的病例回顧中發(fā)現(xiàn),一名長期從事牛、羊養(yǎng)殖的患者因反復(fù)發(fā)熱就診,基層醫(yī)院最初誤診為普通感冒,后經(jīng)上級醫(yī)院會診才確診為布病,既延誤了患者的治療時機(jī),又不能及時阻止布病的傳播蔓延。
2.2實驗室條件方面
第一,檢測人員專業(yè)素質(zhì)參差不齊。部分檢測人員缺乏系統(tǒng)的布病檢測知識和技能培訓(xùn),不熟練掌握各種檢測方法的原理、操作步驟和結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)等,容易出現(xiàn)操作失誤和結(jié)果誤判,導(dǎo)致檢測結(jié)果出現(xiàn)偏差。
第二,實驗室質(zhì)量控制不完善。一些實驗室缺乏完善的質(zhì)量控制體系,對檢測試劑的質(zhì)量把關(guān)不嚴(yán)、儀器設(shè)備維護(hù)保養(yǎng)不到位、不同批次的檢測試劑混用、檢測環(huán)境設(shè)施不完善等現(xiàn)象偶有發(fā)生,有時甚至?xí)l(fā)生使用過期試劑進(jìn)行檢測的情況,嚴(yán)重影響了檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,導(dǎo)致檢測結(jié)果的有效性和可靠性無法得到保證。
2.3部門協(xié)作和信息共享方面
農(nóng)業(yè)農(nóng)村、衛(wèi)生健康、市場監(jiān)管等部門之間在布病檢測工作中存在協(xié)作不夠緊密的問題,會出現(xiàn)部門之間溝通不暢和信息共享不及時、不全面的情況,導(dǎo)致人間或畜間布病疫情的預(yù)警和防控滯后,等陸續(xù)出現(xiàn)多例人類布病患者時,才引起相關(guān)部門的重視。
3推動布魯氏菌病檢測工作的決策建議
3.1加強(qiáng)宣傳教育,增強(qiáng)布病防控意識
第一,針對養(yǎng)殖場(戶)。通過連續(xù)舉辦多期布病防控培訓(xùn)班,邀請專家為養(yǎng)殖場(戶)講解布病相關(guān)知識,發(fā)放宣傳資料、現(xiàn)場指導(dǎo)等方式,向養(yǎng)殖場(戶)宣傳布病的危害、規(guī)范采樣和防控布病的重要性,提高其對布病檢測的重視程度,不斷增強(qiáng)對布病檢測的主動配合度。
第二,針對公眾。利用電視、廣播、畫報、網(wǎng)絡(luò)等媒體,廣泛宣傳布病的防治知識,提高公眾對布病危害的認(rèn)知度和自我防護(hù)意識,引導(dǎo)公眾意識到對布病進(jìn)行檢測的重要性。例如某地畜牧獸醫(yī)部門印發(fā)了一系列關(guān)于布病防治的宣傳畫報,并在群眾比較集中的各個公共場所分發(fā)了上萬份布病防控宣傳資料,取得了良好的宣傳效果,使公眾對布病的認(rèn)知度大幅提升。
3.2規(guī)范檢測流程,提高檢測質(zhì)量
第一,樣本采集和處理。制定統(tǒng)一的樣本采集和處理規(guī)范,加強(qiáng)對采樣人員特別是基層防治員的培訓(xùn),建立樣本登記和交接制度,規(guī)范檢測采樣流程和操作標(biāo)準(zhǔn),確保樣本的采集部位、數(shù)量及保存和運(yùn)輸條件等符合標(biāo)準(zhǔn)要求,不斷提高樣本的針對性和有效性,并保證其可追溯性。
第二,檢測方法選擇和操作。根據(jù)檢測目的和樣本類型,結(jié)合實驗室人員素質(zhì)及儀器配置的實際情況,合理選擇檢測方法。初篩,可采用RBPT等簡便、快速的檢測方法;確診,應(yīng)采用SAT、ELISA和分子生物學(xué)檢測等方法,采用兩種血清學(xué)檢測方法檢測,結(jié)果均為陽性后方可確診。加強(qiáng)對檢測人員的操作培訓(xùn),嚴(yán)格按照檢測的操作規(guī)程進(jìn)行操作,記錄檢測過程中的關(guān)鍵信息,如試劑批號、檢測時間、溫度等。通過對檢測人員進(jìn)行定期的操作培訓(xùn)和考核,不斷提高檢測人員的技能操作和掌握結(jié)果判定的熟練度,使檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性得到了有效保障。
第三,實驗室質(zhì)量控制。一是建立完善的實驗室質(zhì)量控制體系,定期對檢測試劑、儀器設(shè)備進(jìn)行驗證、校準(zhǔn)和保養(yǎng),開展室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評工作,確保檢測結(jié)果受到儀器設(shè)備和檢測試劑的影響降到最小。二是加強(qiáng)實驗室生物安全管理,配備必要人員及實驗室的防護(hù)設(shè)備和設(shè)施,規(guī)范實驗室廢棄物處理,最大程度提高實驗室生物安全級別。通過參加室間質(zhì)評活動,不斷改進(jìn)自身的檢測技術(shù)和質(zhì)量控制水平,使檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性得到行業(yè)認(rèn)可。
3.3加強(qiáng)檢測人員培訓(xùn),提升專業(yè)素質(zhì)
第一,開展定期培訓(xùn)。制定實驗室檢測人員培訓(xùn)計劃,定期組織開展布病檢測理論和實踐技能培訓(xùn),邀請專家進(jìn)行授課和現(xiàn)場操作指導(dǎo),不斷提高檢測人員的專業(yè)知識和操作技能。
第二,建立考核機(jī)制。建立實驗室檢測人員考核制度,對培訓(xùn)后的人員進(jìn)行考核,考核合格者頒發(fā)合格證書,實行持證上崗。定期進(jìn)行能力評估,定期組織檢測人員開展實驗室檢測能力比對試驗,對不合格者進(jìn)行再培訓(xùn)或調(diào)整工作崗位。使檢測人員的工作積極性和責(zé)任心明顯增強(qiáng),能有效提高實驗室檢測工作質(zhì)量。
3.4加強(qiáng)部門間協(xié)作,實現(xiàn)信息共享
建立農(nóng)業(yè)農(nóng)村、衛(wèi)生健康、市場監(jiān)管等部門之間的聯(lián)合協(xié)作機(jī)制,明確各部門的職責(zé)分工,加強(qiáng)溝通協(xié)調(diào)。建立布病疫情信息共享平臺,及時傳遞畜間和人間布病相關(guān)信息,實現(xiàn)信息互通。加強(qiáng)跨部門聯(lián)合執(zhí)法,共同開展布病防控工作,形成防控合力,對違法違規(guī)行為進(jìn)行嚴(yán)厲打擊,能有效抑制布病的發(fā)生。
3.5加大投入,改善檢測條件
各級政府應(yīng)重視布病檢測工作,加強(qiáng)對基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)和獸醫(yī)實驗室的建設(shè)和支持,加大經(jīng)費(fèi)投入力度,給基層實驗室配套必要的檢測儀器、設(shè)備和試劑,不斷改善實驗室條件,有效提高其檢測能力和水平。同時,鼓勵科研機(jī)構(gòu)和企業(yè)開展布病檢測新技術(shù)、新方法的研究和應(yīng)用,提高布病檢測的效率和準(zhǔn)確性。
結(jié)語
布魯氏菌病檢測工作中存在檢測對象、檢測方法、檢測人員、實驗室儀器設(shè)備和部門之間協(xié)作等多個方面的短板。針對這些情況,需要采取加強(qiáng)宣傳教育、規(guī)范檢測流程、加強(qiáng)人員培訓(xùn)、加強(qiáng)部門協(xié)作、加大經(jīng)費(fèi)投入等綜合措施,方可不斷提高布病檢測的質(zhì)量和水平,為布病的防控工作提供有力保障,從而推動人畜共患病防治工作更上一層樓。
參考文獻(xiàn):
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[2]張帥,李晶,王強(qiáng),等.布魯氏菌病檢測技術(shù)研究進(jìn)展[J」.中國動物檢疫,2024,41(5):78-82.
[3]謝小慧,高玉紅,李冰,等.不同血清學(xué)檢測方法在布魯氏菌病診斷中的比較研究[J].中國獸醫(yī)科學(xué),2022,52(6):765-770.
[4]李建柱,劉芳,張志強(qiáng),等.樣本采集因素對布魯氏菌病檢測結(jié)果的影響[J].動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2023,44(7):123-126.
收稿日期:2025-03-14
作者簡介:曹普東(1979—),男,壯族,本科,高級獸醫(yī)師。研究方向:動物防疫、動物疫病檢測(診斷)。
*通訊作者:王成高(1982—),男,彝族,本科,高級畜牧師。研究方向:動物防疫、畜禽良種繁育。