miRNA靶向Wnt/β-catenin信號通路調節骨肉瘤研究進展

中圖分類號：R738.1 文獻標識碼：A文章編號：1006-1959（2025）12-0171-09

DOI：0.3969/j.issn.006-959.05..037

Research Progress of miRNA Targeting Wnt/β-catenin Signaling Pathway to Regulate Osteosarcoma

JIANGDengchen'，WANGXingsheng2，XUSihong2，WANGXiaoqiang2，DANGZeliang2，PENGPei2，QIQisun （1.ClinicalCollgeofTaditioalineseMedicine，GansuUnversityofneseedicine，Lanzhouoo，Gansu，Cina; 2.Trauma Center，Gansu ProvinceHospital of TCM，Lanzhou 73Oo5O，Gansu，China）

Abstract：Osetodeie andtheunderlyinmoleularmecanismseainporlyuderstodOverthepastdcade，oughtesuvivalandprogosisofosteoso patientsveodtalateoietassisotasaesftleereis toidentifyoelosteosacoaomakestoevelosifaedterapidcsindestadingsteosacoasoleulasm haverevealedthatsregadsndteWnt/βateinsialinataoltiveliveoresioetastasisddug resistance.Moreover，miRNAs can modulate the Wnt/β -catenin pathway through multiple mechanisms to promote or inhibit osteosarcoma progression andalterdrugesistane.Somemslsofocompetitieedogeousnetwoks（ceNETs）ithiRAsndlRAs.Tiseveeploste roles of miRNAs targeting the Wnt/β- catenin pathway in osteosarcoma and their associated ceNETs，aiming to provide a theoretical foundation for future research.

KeyWords：Osteosarcoma; miRNA; Wnt/β -catenin;Signalingpathway

骨肉瘤（osteosarcoma，OS）是一種原發性骨骼惡性腫瘤，發病率呈雙峰型，高峰期為18歲和60歲，男性稍多見，長骨的干端區域是骨骼中最活躍的部位，也是OS生長的主要部位，其中肉瘤細胞形成未成熟骨或類骨組織。OS源自原始間充質細胞，根據腫瘤的特征和主要的基質分化（成骨細胞、成纖維細胞、成軟骨細胞、小細胞、毛細血管擴張性高級表面和骨外）可將其分為不同亞型。隨著現代醫學的發展，OS患者治療效果雖有所改善，但復發轉移仍是治療中的難點。其發病機制涉及多種信號通路、關鍵基因、調節性miRNA及其靶向基因。其中 Wnt/β- catenin信號通路在OS中廣泛激活，與OS的侵襲和轉移高度相關，其異常激活能夠影響OS細胞基因轉錄并對細胞周期產生促進作用，從而導致細胞增殖和存活，以 Wnt/β -catenin途徑為靶點進行治療有望解決OS中的難點。而隨著對微小分子的不斷研究，發現miRNA是強有力的調節劑，對人體生理及病理狀態下都有著廣泛調節作用，并已被證明驅動致癌途徑，參與細胞中多種信號通路。在OS中miRNA更是能在多水平上靶向 Wnt/β -catenin通路，進而對OS細胞的增殖、調亡、轉移、侵襲以及耐藥性產生影響。miRNA對 Wnt/β -catenin信號通路的靶向可能是未來OS研究中一種潛在的治療策略。因此，本文就miRNA 靶向骨肉瘤 Wnt/β -catenin信號通路的研究進展作一綜述，以期為骨肉瘤相關研究提供更多的理論基礎。

1Wnt /β -catenin信號通路與骨肉瘤

Wnt信號通路是發育過程中必不可少的通路，它可控制多種生物學功能并參與細胞增殖、遷移、極化和分化等多種細胞過程。該信號通路高度保守，Wnt 信號通路的突變或去調控常與腫瘤發生、化療耐藥性或復發有關4。在大多數癌癥經常檢測到 Wnt 信號通路的激活。 Wnt 信號通路通常分為經典 Wnt 信號通路（ Wnt/β -catenin信號通路）和非經典 Wnt 信號通路（ Wnt/PCP 信號通路和 Wnt/Ca²⁺ 信號通路）5。經典 Wnt 通路通過調節轉錄共激活因子 β -catenin的功能發揮作用，而非經典通路則獨立于 β -catenin發揮作用。 Wnt/β? -catenin信號通路與多種癌癥類型密切相關，其異常激活能夠導致細胞增殖和腫瘤發生，在OS中 Wnt/β -catenin信號通路的異常激活能加快OS的惡性進展。

Wnt/β -catenin通路主要包括 Wnt 配體（ Wnt 家族蛋白 Wnt1，Wnt2，Wnt3，Wnt3a，Wnt8b 和 Wntl0b 等） ?，Wnt 家族蛋白受體[主要受體特異性卷曲跨膜受體Frizzled蛋白（Fzd）和核心受體低密度脂蛋白受體相關蛋白5/6（LRP5/6）]、細胞質折疊蛋白（di-shevelled，Dsh）、軸蛋白（Axin）、糖原合成激酶3β（GSK-3β）酪蛋白激酶1（CK1）、腺瘤性息肉病大腸蛋白（APC）和 β 連環蛋白（ β -catenin）[8。在沒有Wnt 配體的情況下， Wnt/β -catenin通路處于靜止狀態， β -catenin由 GSK-3β、CK1、 APC和Axin形成的“蛋白質復合物\"螯合降解。 Wnt/β -catenin通路激活時 Wnt 配體與蛋白受體結合激活Dsh，Dsh的表達使“蛋白質復合物”失活， β -catenin在胞質內積累進入細胞核從而與轉錄因子T細胞因子/淋巴增強因子家族成員（TCF/LEF）CREB結合蛋白（CBP）等相互作用，從而激活細胞-骨髓細胞瘤病病毒癌基因（ Φ（c-Myc） ）、基質金屬蛋白酶（MMPs）、血管內皮生長因子（VEGFs） ? CyclinD1等靶基因的轉錄[1]。

經典 Wnt 信號通路與OS密切相關， β -catenin在OS組織中的陽性表達率為 70% ，但由于該通路高度復雜， Wnt/β. -catenin信號通路與OS相互作用的具體分子機制還需進一步研究。但有研究指出，OS致瘤性和轉移性播散中起關鍵作用。ChenC等[12]的實驗指出骨肉瘤細胞系具有多種經典和非經典Wnt 信號配體的差異表達，并且骨肉瘤細胞中 Wnt 配體的表達以經典 Wnt 配體為主，骨肉瘤細胞中6種經典 Wnt 配體中的5種顯著增加，刺激 Wnt3a 能夠促進骨肉瘤細胞的存活，并在進一步實驗證明出經典 Wnt 信號通路的異常激活可驅動OS細胞增殖并促進存活。GeY等[]采用山藥提取物diosgenin（DIO）對MG-63細胞進行干預，發現低濃度DIO 能夠抑制 Wnt/β- -catenin信號通路，進而調節MG-63細胞的增殖和分化。對于骨肉瘤轉移的關鍵步驟上皮間質轉化（EMT），最近的研究指出轉化生長因子β（TGFβ ）可能是EMT的主要誘導劑[4]，，而 Wnt/β- catenin 通路也表現出對EMT的下游調節， Wnt/β- catenin/EMT軸性調節能促進癌轉移以及腫瘤細胞的惡性行為[15]。另外，骨形態發生蛋白-2（BMP-2）與Fibulin-3也通過 Wnt/β -catenin途徑促進OS細胞中EMT，并增強OS 的轉移和惡性程度[16，17]。在ZengQ等[8的實驗證明USP7能夠直接與 β -catenin結合來激活 Wnt/β? -catenin通路，誘導OS中EMT并促進OS 細胞轉移。除此之外，OS的發生、發展、轉移也與 β -Catenin密切相關， β -Catenin的表達可能是OS細胞侵襲和轉移的關鍵。一項對521例OS患者的研究指出[19]，， β -catenin過表達與骨肉瘤的遠處轉移和總體存活率有關，該研究證實 β -Catenin可作為OS預后生物標志物潛力。FanS等2研究證明CPE-8N 的過表達增加了OS 細胞中 c-myc 和核 β -catenin的水平，CPE-SN促進了OS細胞中Wnt/β -catenin信號通路的激活。而進一步的實驗表明通過對 β? -catenin的表達抑制能夠降低CPE-8N表達以及OS細胞的遷移侵襲能力。因此， Wnt/β- catenin信號通路與OS的發生、發展、侵襲和轉移密切相關，其信號通路的表達在OS中被廣泛激活， β -Catenin的表達水平更與OS侵襲轉移存在密切聯系[21]。

2miRNA與Wnt/β-catenin

2.1miRNA生物學特性miRNA也稱為微小RNA，是由內源基因編碼的小單鏈非編碼RNA（18＼～24個核苷酸）。其生物發生自細胞核開始，于細胞質結束，通過多種方式遷移到細胞外，在細胞間通訊中發揮作用[22]。有研究指出[23]，miRNA調節1/3的人類基因并參與許多重要的生命過程。大約 90% 的miRNA通過與 _Ago2，NPM1 （核磷蛋白1）和高密度脂蛋白等蛋白質形成復合物遞送至受體細胞產生作用24]。而另外 10% 的miRNA由外泌體微泡包裹，通過內吞攝取、膜融合或與細胞表面的特定受體整合進入鄰近細胞。miRNA的表達經受嚴格調控，在細胞增殖、調亡、發育和代謝等許多發育過程中發揮作用，并且也在許多疾病狀態中發揮作用[25]。

2.2 miRNA對 Wnt/β -catenin通路的調控自2008年以來，miRNA已被確定為癌癥的生物標志物[2，并隨著對miRNA的不斷研究，發現miRNA對生命活動中的多種信號通路都存在調節關系，如：PI3K/Akt、Wnt、NF- ??κB 、Notch、MAPK等，這些信號通路也與OS發展和微環境改變存在著密切關系[2]。對于（204號 Wnt/β -catenin通路，miRNA的失調能夠在癌癥中誘導其通路的傳導活性，而miRNA的表達又受到 Wnt 信號傳導的控制[28。miRNA通過靶向 Wnt 配體/受體及配體/受體相關蛋白、 _.β -catenin、 β -catenin相互作用復合物，在多水平上激活或抑制 Wnt 通路。在對miRNA與 Wnt/β -catenin通路相關研究中發現，miR-122和-148a能夠靶向 Wnt1 來抑制 Wnt 途徑，miR-185-3p和 miR-324-3p 靶向 Wnt2b 抑制腫瘤發展， miR-200 簇被鑒定為靶向 β -catenin以抑制癌癥進展，FZD3、FZD5、DVL3、FRAT2和CK2A2被驗證為miR-29家族的直接靶標[3。而對于 GSK-3β 、CK1、APC和Axin形成的\"蛋白質復合物”，研究證實MiR-155在多種癌癥中對APC進行負調控3]，GSK- .3β 能被miR-26a和miR-1290靶向， miR-544a 能靶向Axin2來減少CDH1表達，誘導EMT表型[33]。除此之外，一些miRNA也能夠通過靶向 Wnt 通路轉錄因子、多種 Wnt 信號通路組分及其他信號通路中的組分來調控 Wnt/β -catenin通路，如miR-218、MiR-139、MiR-19b、miR-144等。由此可見，miRNA可在多個步驟激活或抑制經典 Wnt 通路。另外也有研究分析指出[34]， Wnt/β -catenin通路的激活能夠結合一些miRNA的啟動子并激活轉錄來增加miRNA的表達，一些miRNA與 Wnt/β -catenin信號通路之間也存在相互反饋回路。但總體而言， Wnt/β -catenin激活和miRNA介導的基因調控是驅動腫瘤發生及變化的相互因果關系，對腫瘤發生發展及惡性程度改變有著重要的調控作用。

3miRNA靶向Wnt/β-catenin通路對OS的影響

miRNA可在多個步驟激活或抑制 Wnt/β- catenin通路，同樣在OS中miRNA通過對 Wnt/β- catenin通路中各個結構的靶向，表現出對 Wnt/β- catenin通路的促進或是抑制作用，從而對OS發生發展以及耐藥性產生調節。

3.1miRNA靶向 Wnt 配體/受體及相關蛋白對OS的影響 經典 Wnt 信號通路中配體（ Wnt 家族蛋白Wnt1，Wnt2，Wnt3，Wnt3a，Wnt8b 和 Wntl0b ）和受體（Fzd、LRP5/6）受MiRNA的靶向，能夠對OS產生不同影響。miRNA對經典 Wnt 通路中配體的靶向多表現為抑制配體表達水平，降低信號通路活性來對OS產生抑制。ChenM等35采用七氟烷處理U2OS和MG63細胞的研究發現， miR-203 抑制U2OS細胞中Wnt2b 的表達，抑制 miR-203 減弱了七氟烷對Wnt2b 表達的抑制作用， miR-203/Wnt2b/Wnt/β- catenin軸能夠對骨肉瘤細胞增殖和侵襲產生抑制作用。而 Wnt3a 被確定為 miR-1236-3p 的靶標，miR-1236-3p能夠靶向 Wnt3a 降低 Wnt/β? -catenin激活，從而抑制OS進展。另外，一些miRNA通過對經典 Wnt 通路配體的靶向表現在抑制OS和調節OS對腫瘤藥物耐藥性上。ZhiW等3發現miR-140過表達降低了阿霉素處理的OS細胞的耐藥性，而Wnt1 是 miR-140 的靶標， miR-140 能夠通過抑制Wnt1表達直接調節 Wnt/β- catenin信號傳導來抑制OS細胞增殖并增強藥物敏感性。對于信號通路中的相關受體，miRNA的靶向調節則顯示出兩面性。一方面miRNA對受體的靶向調節能夠促進OS發展，LiC等[38對OS的研究中發現 miR-93-3p 能夠促進FZD7表達，從而引起 Wnt/β- 連環蛋白的激活來促進OS進展;另一方面，miRNA對受體的靶向也能夠抑制OS，WangJ等3研究指出在OS組織中，miR-520b與FZD8表達呈負相關， miR-520b 通過下調FZD8使 Wnt/β- catenin通路失活從而抑制細胞增殖、遷移和侵襲。 Wnt/β -catenin通路中一些與配體受體產生相互作用的蛋白結構也能夠被miR-NA靶向，進而影響 Wnt/β -catenin通路活性，調節OS發展。WIF1蛋白是一種能夠與經典 Wnt 配體發生物理相互作用，從而抑制 Wnt/β. -catenin通路的蛋白結構[40]，CaiW等[前期研究發現 miR-552-5p 在OS組織和細胞系中過表達，采用MG63和U2OS細胞對 miR-552-5p 的進一步研究指出 miR-552-5p 直接靶向 Wnt 抑制因子 1（WIF1）_mRNA"的3UTR，并表現出對WIF1的抑制，從而促進OS增殖、遷移和侵襲。LiW等42也指出MiR-374a通過靶向WIF1，激活 Wnt/β -Catenin通路促進骨肉瘤遷移。分泌型卷曲相關蛋白1（SFRP1）可以通過中斷 Wnt 配體與Fzd受體之間的相互作用來阻斷 Wnt 信號通路，從而成為 Wnt 信號通路的負調節因子。 MuY 等[43]發現HOS和U2OS細胞中 miR-27a 表達升高以及分泌型卷曲相關蛋白1（SFRP1）表達降低，SFRP1被證實是 miR-27a 的靶基因，沉默 miR-27a 抑制骨肉瘤進展可能是通過上調SFRP1使 Wnt/β -catenin信號通路失活實現的。此外，一些miRNA在不同OS細胞中也可能存在相反的作用， YangX 等[44的研究指出miR-183能夠與LRP6的3UTR相互作用，通過抑制 LRP6-Wnt/β. -catenin信號通路降低了MG63細胞的活性，但在U20S細胞中敲低內源性miR-183則顯著增強了這些能力。可見，miRNA對 Wnt 配體/受體及相關蛋白的靶向多呈雙向調節，通過對經典 Wnt 通路活性的影響來對OS產生促進或抑制作用，雖然miRNA靶向 Wnt 配體多表現為抑制通路活性，但隨著進一步的研究可能會發現靶向 Wnt 配體并對經典 Wnt 通路產生促進的miRNA，未來的研究也應對OS多細胞系中進行研究論證，以闡釋miRNA靶向治療的更多潛在價值。

3.2miRNA靶向 β -catenin β -catenin相互作用復合物對OS的影響 YuM 等[45發現miR-107在骨肉瘤組織和細胞系中的表達降低，通過體外實驗指研究出，miR-107能夠降低 β -catenin中3UTR熒光素酶活性，使OS 細胞中 β -catenin、Cyclin D1和c-Myc蛋白水平下降，降低OS細胞增殖并抑制OS細胞的侵襲和遷移。可見， β -Catenin作為 Wnt/β- catenin通路的重要因子，miRNA對 β -catenin的靶向調節能夠對通路的下游表達產生作用，并影響OS侵襲和轉移，而在后續實驗中證明 β -catenin的過表達能夠反向抑制miR-107在OS中的作用，也一定程度說明即使 Wnt/β -catenin通路上游沉默， β- catenin表達后仍能激活通路下游，促進 Wnt/β- catenin通路活性并在OS中產生作用。一項黃芩素干預骨肉瘤細胞系Saos-2的研究中發現4，黃芩素和miR-25降低 β -catenin和Axin2的表達，同時增加GSK-3β的表達。miR-25的下調降低了 GSK-3β 的表達，而 β -catenin和Axin2的表達增加， miR-25 可能是一種潛在的 Wnt/β -catenin通路抑制劑。該實驗雖然揭示了 miR-25 能夠降低 Wnt/β -catenin通路活性從而抑制OS，但miR-25與 GSK-3β?β- catenin和Axin2之間具體靶向關系還需進一步研究。除此之外，許多研究也指出miRNA與 GSK-3β 、CK1、APC和Axin形成的\"蛋白質復合物\"之間的具體靶向關系。 QuF 等[47的OS 細胞實驗顯示 GSK-3β 是 miR-26a 的靶標， miR-26a 的異位表達通過直接結合3UTR來抑制 GSK-3β ，兩者呈負相關，過表達miR-26a能夠抑制 GSK-3β 激活 Wnt/β? -catenin促進OS 增殖、遷移和侵襲。 WuZ 等[48發現miR1205靶向 Wnt/β- catenin信號通路的負調節因子APC2，miR-1205能夠對APC2表達產生抑制，進而促進OS。ChenX等[49研究證實Axin1是 miR-31-5p 的靶基因，其強烈表達抑制Axin1的轉錄，下調 miR-31- 5p能夠促進Axin1轉錄來降低 Wnt/β -catenin信號通路活性，進而抑制OS細胞的增殖、侵襲和致瘤性。可見，miRNA靶向 β -catenin相互作用的蛋白復合物對OS也具有著雙向調節的作用，另外一些miRNA也能夠對 β -catenin相互作用的蛋白復合物產生多個靶向。如JinH等[5在研究中指出上調miR-135b能促進OS腫瘤干細胞活性，提升肺轉移和復發幾率，而在進一步的實驗中指出 miR-135b 的過表達同時靶向 Wnt/β -catenin和Notch信號通路的多個負調節因子，包括 GSK-3β?1α 和Tet3。目前研究中miRNA對 β -catenin和 β? -catenin相互作用的蛋白復合物展示出了雙向調節的特性，但 β- catenin及其復合物作為 Wnt/β -catenin通路中的關鍵部分，miRNA的靶向調節可能存在更深遠的研究價值。

3.3miRNA靶向 Wnt 通路轉錄因子、 Wnt 信號通路多種組分及其他信號通路中的組分影響OSmiRNA除了對 Wnt/β -catenin信號軸傳導中的靶向外，也能夠對其上下游轉錄因子及對其他信號通路的靶向，影響 Wnt/β -catenin通路，進而調節 05 SunL等[51]對 miR-429 在OS組織和OS細胞系（MG-63、_{U20S，Saos-2} 中的作用進行研究分析，發現miR-429對OS進展表現出抑制作用，而熒光素酶報告分價證頭HUAAy定mI-4Zy的且妝靶協，HUAAy是一種同源框（HOX）基因，能夠調節膠質瘤細胞生長中的 Wnt/β -catenin通路并調節OS細胞的增殖和凋亡， miR-429 通過靶向HOXA9基因下調 Wnt/ β -catenin途徑抑制OS進展。miRNA對其他信號通路中組分的靶向，不僅展現出對 Wnt/β? -catenin通路的影響，也能夠對OS轉移的關鍵步驟上皮間質轉化（EMT）產生調節。有研究指出MGAT是一種新型Wnt/β- catenin通路靶標[52]，而 miR-331-3p 通過抑制MGAT1發揮關鍵腫瘤抑制因子的作用，導致Wnt/β -Catenin通路受到抑制并降低OS細胞的增殖；并可以通過 Bcl-2/Bax 途徑導致細胞凋亡增加，并通過EMT抑制遷移和侵襲能力[53]。此外，miR-377-3p 也可以通過靶向CUL1調節EMT和 Wnt/β- catenin，抑制OS發展[54]。ZhuD等[55研究表明miR-199b-3p抑制了OS 細胞的生長、遷移和侵襲，而參與 Akt通路的CCDC88A被定性為 miR-199b-3p 的直接靶點， MiR-199b-3p 與CCDC88A的 3^′-UTR 相互作用抑制OS中的EMT和 Wnt/β- catenin信號通路。可見，EMT發展不僅有 Wnt/β. -catenin通路參與，更與多種通路間存在聯系，一些miRNA對于其他通路組分的靶向調節不僅能夠影響 Wnt/β- catenin通路活性，更對OS發展中的EMT產生調控。而miRNA對于 Wnt/β -catenin通路下游基因的靶向不僅顯示出對 Wnt/β. -catenin通路多因子的表達水平的改變，影響OS發生發展，更能夠對其耐藥性產生調節。Rongxin S等的實驗發現， miR-340- 5p 直接與 STAT3基因的 3^′. -UTR相互作用，并呈負相關調節。提升 miR-340-5p 表達可以使U2OS細胞中STAT3、 .β -catenin ?^c -Myc、TCF-4、CyclinD1和ROCK1表達水平顯著下降， miR-340-5p 通過靶向STAT3基因負調節 Wnt/β- catenin通路，從而抑制骨肉瘤發展。XueY等[5研究指出miR-22-3p能夠靶向 TCF7L2基因抑制 Wnt/β -catenin通路從而防止OS惡化。另外， MiR-329-3p 通過靶向 TCF7L1，通過負相關調節抑制OS發生和增殖[58。而miR-758通過靶向TCF4能夠抑制阿霉素耐藥OS 細胞中的Wnt/β? -catenin通路，并表現出阿霉素耐藥OS細胞的耐藥性降低和腫瘤受限[59]。可見，miRNA對經典Wnt 通路轉錄因子、下游組分及及其他信號通路組分的靶向，不僅影響著OS的發生發展，更對其EMT和耐藥性產生調節。

4miRNA同其他非編碼RNA調控Wnt β -catenin通路對OS的影響

非編碼RNA包括lncRNA、circRNA、miRNA和tRNA等，是一類廣泛存在的基因，涉及多種生物學功能。其中lncRNA和miRNA控制腫瘤自噬、增殖、侵襲、遷移和轉移等生物學過程。SalmenaL等首次提出了競爭性內源RNA（ceRNA）機制，一些非編碼RNA與miRNA結合并充當miRNA海綿，從而調節miRNA的靶基因。miRNA作為發揮作用的媒介，部分lncRNA及circRNA可以作為ceRNA與miR-NA結合從而調控OS中 Wnt/β- catenin通路[61]。

4.1miRNA與lncRNA的聯系對OS的影響OS中lncRNA大多數充當miRNA的ceRNA，兩者通過競爭性結合來影響miRNA對OS中 Wnt/β? -catenin通路的靶向調節。JiangZ等發現在OS細胞中， miR- 577可作為SNHG1的ceRNA，而Inc-SNHG1過表達對骨肉瘤進展的促進作用需依賴于miR-577的活性抑制。進一步的研究發現 Wnt2b 是miR-577的靶標，lnc-SNHG1可以通過 miR-577 和 Wnt2b 促進OS進展。YaoQ等對OS患者腫瘤組織中LINC01128的表達進行分析，并結合體外細胞實驗與體內動物模型驗證發現，LINC01128通過海綿吸附miR-299-3p 解除其對MMP2的轉錄后抑制作用，導致MMP2表達上調，進而與MMP2協同激活 Wnt/β- catenin信號通路，最終促進OS進展。LiL等研究表明MEG3（一種長的非編碼RNA）和miR-184在骨肉瘤中異常表達，實驗分析指出MEG3負調節 miR-184 并抑制 β -catenin、TCF4和 _c-MYC 表達水平，過表達MEG3抑制OS進展，并且MEG3的作用能被miR-184逆轉。因此，miR-184是MEG3的ceRNA，兩者協同調節OS的增殖、遷移和凋亡。可見，lncRNA作為ceRNA與miRNA形成競爭性調節網絡對OS中 Wnt/β? -catenin通路的調節能夠產生多方面影響，目前研究中因其信號軸的復雜性一些靶向關系還需進一步明確。miRNA與lncRNA相聯系除了促進OS外，一些miRNA與lncRNA也能夠抑制 05 GuanJ等研究發現UCA1敲除和miR-145過表達均抑制MG-63和U2OS細胞的惡性進展并誘導細胞凋亡，UCA1敲除導致miR-145增加，HM-GA1、β-catenin 和CyclinD1 減少，且UCA1和miR-145之間存在負相關，抑制UCA1可增加miR-145水平并降低HMGA1水平，從而在OS中發揮抗腫瘤作用。MALAT1和TUG1過表達能夠誘導 Wnt/ β -catenin信號通路的激活，而 miR-425-5p 通過直接結合MALAT1和TUG1來降低 Wnt/β -catenin信號通路活性，從而抑制OS細胞體外增殖、侵襲和遷移。LiR等研究指出AFAP1-AS1的過表達可對miR-4695-5p產生抑制作用，而 miR-4695-5p 靶向TCF4，miR-4695-5p能夠降低TCF4表達水平來抑制 Wnt/β -catenin通路。OS中miR-299-3p可以作為AFAP1-AS1的ceRNA，降低AFAP1-AS1表達能夠抑制體外OS細胞的增殖和侵襲。因此，miRNA與lncRNA相聯系多形成競爭性網絡調節，并且lncR-NA作為ceRNA調節miRNA靶向OS中 Wnt/β- catenin信號通路的過程中既可促進OS也能抑制OS發生發展。

4.2miRNA與circRNA的聯系對OS的影響OS中circRNA表達異常導致腫瘤發生和細胞生物學功能的改變。ZhouZ等研究指出，沉默 能夠調節骨肉瘤細胞中 miR-377-3p 來抑制 Wnt/β- catenin通路。Circ_0003732可能通過調節miR-377-3p/CPEB1 軸和激活 Wnt/β -catenin信號通路抑制OS細胞的增殖、遷移、侵襲，并在體外觸發細胞凋亡，降低OS在體內的生長。另外，circRNA作為ceRNA不僅能夠影響 Wnt/β -catenin通路活性，調節OS發生發展，更可以使OS的耐藥性發生改變。DongL等研究指出miR-506-3p通過 Wnt/β -catenin信號通路在circUBAP2和SEMA6D對OS順鉑耐藥的調節中發揮重要作用，MiR-506-3p可以被cir-cUBAP2吸附并靶向SEMA6D，miR-506-3p過表達可以阻礙U2OS/CDDP和SaOS-2/CDDP細胞中順鉑耐藥并降低 Wnt/β. -catenin信號通路的活性。BaiY等[7發現miR-342-3p在阿霉素耐藥的OS組織和細胞中下調，并與OS組織中hsa_circ_0004674呈負相關調節，hsa_circ_0004674通過調節miR-342-3p/FBN1軸來增強 Wnt/β -catenin通路活性，miR-342-3p能夠靶向FBN1來抑制OS細胞對阿霉素的耐藥性。

5總結與展望

研究已證實miRNA靶向療法是阻礙OS侵襲性生物學行為的更有前景的方法。與其他類型的癌癥不同，OS沒有傳統的標記物，而miRNA能夠對Wnt/β. -catenin通路配體、受體、 β -catenin β -catenin相互作用復合物、轉錄因子等多水平的靶向來對OS細胞增殖、粘附、侵襲、遷移和轉移以及細胞凋亡進行調節，從而促進或抑制OS發展，并且有些miRNA也對OS耐藥性產生調節。在miRNA同其他非編碼RNA形成競爭性內源網絡方面，CircRNA、lncRNA與miRNA結合并充當miRNA海綿，從而調節miRNA的靶基因，并通過與miRNA的相互作用調節 Wnt/β -catenin通路，在OS發生和腫瘤進展中發揮重要的作用。因此，miRNA生物標志物的識別最終可能對該疾病具有預后或治療價值。目前miR-NA/Wnt/β -catenin軸對OS的調節雖然明確了部分靶向調節方式，但具體分子機制尚未完全明了，并且尚有許多未知miRNA通過相關通路調控骨肉瘤的發生和進展，一些miRNA介導的競爭性內源網絡也還有待進一步深入研究，另外在OS治療中外源性miRNA模擬物和抑制劑會啟動先天性免疫反應，導致許多細胞因子的表達增加，基于miRNA及相關通路研究OS還需要大量臨床樣本和實驗數據支持。盡管miRNA的臨床運用面臨許多挑戰，但不可否認的是miRNA可能是確定OS進展風險極具價值的生物標志物。miRNA對OS中 Wnt/β- catenin通路多靶點多水平上的調控，更是在未來解決OS治療難題上極具潛力的一種治療途徑。

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收稿日期：2024-04-22；修回日期：2024-05-14

編輯/王萌