血清神經調節蛋白1、葉酸在超早產兒腦損傷早期診斷、病情及預后評估中的價值研究

［摘 要］目的 探究血清神經調節蛋白1、葉酸在超早產兒腦損傷早期診斷、病情及預后評估中的價值。方法 選取2020年1月至2022年12月河北省秦皇島市婦幼保健院收治的超早產兒128例為研究對象，其中60例超早產腦損傷患兒設為研究組，68例健康超早產兒設為對照組，采用格拉斯哥昏迷分級法（GCs）評估研究組患兒腦損傷程度，并將其分為輕度組23例、中度組19例及重度組18例；研究組患兒經治療后根據預后情況分為預后良好組43例和預后不良組17例。酶聯免疫吸附法（ELISA）檢測血清中神經調節蛋白1水平；電化學發光免疫法測定血清中葉酸水平；Spearman分析神經調節蛋白1、葉酸相關性及兩者與腦損傷程度的相關性；采用受試者工作特征（ROC）曲線分析血清中神經調節蛋白1、葉酸水平對早期診斷及預后的診斷價值。結果 研究組血清神經調節蛋白1、葉酸表達水平低于對照組，差異具有統計學意義（t值分別為6.894、8.947，Plt;0.001）；輕度組、中度組、重度組血清中神經調節蛋白1、葉酸表達水平依次降低，差異具有統計學意義（F值分別為18.051、64.521，Plt;0.001）；Spearman相關分析顯示，血清神經調節蛋白1、葉酸表達水平與腦損傷程度均呈負相關性（r值分別為-0.624、-0.539，Plt;0.05），血清神經調節蛋白1與葉酸表達水平呈正相關性（r=0.567，Plt;0.05）；預后良好組血清中神經調節蛋白1、葉酸表達水平高于預后不良組，差異具有統計學意義（t值分別為8.685、9.419，Plt;0.001）；血清中神經調節蛋白1、葉酸及聯合診斷超早產兒腦損傷發生的曲線下面積（AUC）分別為0.864、0.821、0.934，聯合診斷效能更好（Z值分別為2.869、3.603，P＜0.05）；血清中神經調節蛋白1、葉酸及聯合預測超早產兒腦損傷患兒預后不良的AUC分別為0.848、0.871、0.979，聯合預測效能更好（Z值分別為2.616、2.688，P＜0.05）。結論 超早產兒腦損傷患者血清中神經調節蛋白1、葉酸水平降低，與腦損傷程度呈負相關，兩者對超早產兒腦損傷早期診斷、不良預后發生具有一定的診斷價值。

［關鍵詞］神經調節蛋白1；葉酸；超早產兒；腦損傷；診斷；預后

Doi：10.3969/j.issn.1673-5293.2025.03.008

［中圖分類號］R174.1""" ［文獻標識碼］A

［文章編號］1673-5293（2025）03-0054-06

Clinical values of serum neuregulin-1 and folic acid for early diagnosis，evaluation of disease

condition and prediction of prognosis of brain injury in extremely preterm infants

JIANG Shuping，ZHU Hongbin，WU Shaojun，ZHANG Ling，YANG Huichan，GAO Caiyun，WEI Xuexu

（Department of Neonatology，Qinhuangdao Municipal Maternal and

Child Health Hospital，Hebei Qinhuangdao 066000，China）

［Abstract］ Objective To investigate clinical values of serum neuregulin-1 and folic acid for early diagnosis，evaluation of disease condition and prediction of prognosis of brain injury in extremely preterm infants. Methods A total of 128 extremely preterm infants who admitted to Qinhuangdao Municipal Maternal and Child Health Hospital，Hebei province from January 2020 to December 2022 were selected as study subjects.60 extremely preterm infants with brain injury were assigned to study group，and 68 healthy extremely preterm infants were divided into control group.Glasgow coma scale （GCs） was applied to evaluate degree of brain injury of extremely preterm infants in the study group，further they were stratified into mild brain injury group （n=23），moderate brain injury group （n=19） and severe brain injury group （n=18）.After treatment，these extremely preterm infants in the study group were divided into good prognosis group （n=43） and poor prognosis group （n=17） according to prognoses of the extremely preterm infants.Enzyme linked immunosorbent assay （ELISA） was applied to detect serum level of neuregulin-1，and electrochemiluminescence immunoassay （ECLIA） was applied to detect serum level of folic acid.Spearman correlation analysis was applied to analyze correlation between neuregulin-1 and folic acid，and correlations of the two indexes with severity of brain injury of the extremely preterm infants.Receiver operating characteristic （ROC） curve was applied to analyze diagnostic and predictive values of serum levels of neuregulin-1 and folic acid for early diagnosis and prognosis of the disease. Results The expression levels of serum neuregulin 1 and folic acid in the study group were lower than those in the control group，and the differences were statistically significant （t=6.894 and 8.947 respectively，both Plt;0.001）.The expression levels of neuregulin 1 and folic acid in serum of the extremely preterm infants in the mild brain injury group，the moderate brain injury group and the severe brain injury group decreased successively，and the differences were statistically significant （F=18.051 and 64.521 respectively，both Plt;0.001）.Spearman correlation analysis showed that the expression levels of neuregulin 1 and folic acid in serum were both negatively correlated with degree of brain injury （r＝-0.624 and -0.539 respectively，both Plt;0.05），and neuregulin 1 and folic acid were positively correlated each other （r=0.567，Plt;0.05）.The expression levels of neuregulin 1 and folic acid in serum of the extremely preterm infants in the good prognosis group were higher than those in the poor prognosis group，and the differences were statistically significant （t=8.685 and 9.419 respectively，both Plt;0.001）.The areas under the curve （AUCs） of serum neuregulin 1，folic acid and combination of the two indexes for diagnosing brain injury of the extremely preterm infants were 0.864，0.821 and 0.934 respectively，indicating that the diagnostic efficacy of the combination of the two indexes was better （Z=2.869 and 3.603 respectively，both Plt;0.05）.The AUCs of serum neuregulin 1，folic acid and the combination of the two indexes for predicting poor prognosis of the extremely preterm infants with brain injury were 0.848，0.871 and 0.979 respectively，indicating that the

predictive efficacy of the combination of the two indexes was better （Z=2.616 and 2.688 respectively，both Plt;0.05）. Conclusion The serum levels of neuregulin-1 and folic acid of the extremely preterm infants with brain injury descend，and the two indexes are negatively correlated with degree of brain injury.So，the two indexes have certain diagnostic values for early diagnosis and prediction of poor prognosis of these extremely preterm infants with brain injury.

［Key words］ "neuregulin-1;folic acid;extremely preterm infant;brain injury;diagnosis;prognosis

早產在全球發病率較高，由于大腦不成熟、圍產期窒息、產前感染/炎癥、慢性缺氧等不良因素可誘發腦損傷，繼而導致患兒死亡或遺留神經系統后遺癥，其風險與出生時的發育程度成反比^［1］。腦損傷是超早產兒（妊娠lt;28周）的常見并發癥，給家庭和社會帶來沉重的負擔^［2］。因此，尋找能夠早期診斷超早產兒腦損傷，同時可以評估病情、改善預后的生物標志物具有重要意義。神經調節蛋白1是一種神經營養生長因子，研究表明，內源性神經調節蛋白1可減輕急性腦損傷動物模型中的腦組織損傷（急性缺血性中風，神經毒素暴露相關腦損傷），起神經保護作用^［3］。葉酸是一種必需的B族維生素，在DNA合成和細胞分裂中發揮作用，以支持生長和胎兒發育^［4］。研究表明，葉酸缺乏可導致胎兒神經管缺陷和貧血，也可導致高同型半胱氨酸血癥，進而增加腦血管疾病的風險^［5］。鑒于超早產兒腦損傷患者血清神經調節蛋白1、葉酸水平與超早產兒腦損傷早期診斷、疾病嚴重程度及不良預后報道較少，本研究將對此進行探討。

1對象與方法

1.1研究對象

選取2020年1月至2022年12月河北省秦皇島市婦幼保健院收治的128例超早產兒為研究對象。納入標準：①胎齡lt;28周；②單胎妊娠；③孕期無嚴重并發癥。排除標準：①先天性畸形、遺傳因素導致腦損傷；②中樞神經疾病；③住院期間感染低血糖腦病或膽紅素腦病。所有研究對象的家屬均知情同意，本研究獲得本院倫理委員會審核批準（批準號：QHDFY-20230310A05）。

根據顱腦磁共振成像（magneticresonance imaging，MRI）和超聲檢查結果分為研究組（超早產腦損傷患兒60例）和對照組（健康超早產兒68例）。研究組男29例，女31例；平均胎齡（26.98±2.34）周；平均體質量（0.98±0.15）kg；生產方式：順產28例、剖宮產32例。對照組男30例，女38例；平均胎齡（26.87±2.15）周；平均出生體重（0.99±0.17）kg；生產方式：順產32例、剖宮產36例。兩組基本資料差異無統計學意義（Pgt;0.05），具有可比性。

根據格拉斯哥昏迷分級法（Glasgow coma scale，GCs）從睜眼（分數范圍1～4）、語言（分數范圍1～5）和運動（分數范圍1～6）評估研究組患兒腦損傷程度^［6］。GCs越低腦損傷越嚴重，分為輕度組23例（GCs≥13分）、中度組19例（GCs≥9分）及重度組18例（GCslt;9分）。

1.2研究方法

1.2.1血清中神經調節蛋白1、葉酸水平檢測

空腹采集研究對象的靜脈血靜置30 min，采用xinyan22-013高速離心機（上海欣言生物科技有限公司），3 000r/min離心20 min，分離出上清，樣本放置Forma 89000系列立式超低溫冰箱（廣州東銳科技有限公司）保存。酶聯免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）檢測血清中神經調節蛋白1水平，ELISA試劑盒（SBJ-H0510）購于南京森貝伽生物科技有限公司；電化學發光免疫法（electrochemiluminescence immunoassay，ECLIA）測定血清中葉酸水平，葉酸測定試劑盒（YDLC-15427）購于上海羽哚生物科技有限公司。

1.2.2預后評估

研究組患兒根據預后情況分為預后良好組43例和預后不良組17例。糾正胎齡40周采用Bayley嬰幼兒發展量表（Bayley Scales of Infant andToddler Development-Ⅱ Edition，BSID-Ⅱ）評估患兒運動發育指數及智力發育指數，運動發育指數及智力發育指數都≥70分為發育正常，任意一項lt;70分為發育異常。預后良好組患兒表現為基本生命體征平穩、體重快速增長、運動發育指數及智力發育指數都≥70分；預后不良組患兒救治無效死亡或運動發育指數及智力發育指數其中一項lt;70分。

1.3統計學方法

用SPSS 25.0軟件分析數據。計數資料用例數（n）和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗；計量資料以均數±標準差（x-±s）表示，兩組間行t檢驗； Spearman相關分析神經調節蛋白1、葉酸之間的相關性及兩者與腦損傷程度的相關性；繪制受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線分析血清中神經調節蛋白1、葉酸水平對超早產腦損傷患兒早期診斷和預后預測的臨床價值。Plt;0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1對照組和研究組血清中神經調節蛋白1、葉酸表達比較

研究組血清神經調節蛋白1、葉酸表達水平低于對照組，差異具有統計學意義（t值分別為6.894、8.947，Plt;0.001），見表1。

2.2不同腦損傷程度患者血清中神經調節蛋白1、葉酸表達比較

輕度組、中度組、重度組血清中神經調節蛋白1、葉酸表達水平依次降低，差異具有統計學意義（F值分別為18.051、64.521，Plt;0.001），見表2。

2.3血清神經調節蛋白1、葉酸相關性及兩者與腦損傷程度的相關性

Spearman相關分析顯示，血清神經調節蛋白1、葉酸表達水平與腦損傷程度均呈負相關性（r值分別為-0.624、-0.539，Plt;0.05），血清神經調節蛋白1與葉酸表達水平呈正相關性（r=0.567，Plt;0.05）。

2.4預后良好組和預后不良組血清中神經調節蛋白1、葉酸表達水平比較

預后良好組血清中神經調節蛋白1、葉酸表達水平高于預后不良組，差異具有統計學意義（t值分別為8.685、9.419，Plt;0.001），見表3。

2.5血清中神經調節蛋白1、葉酸表達對超早產兒腦損傷的診斷價值

以超早產兒是否發生腦損傷（是=1，否=0）為狀態變量，以血清神經調節蛋白1、葉酸水平為檢驗變量繪制ROC曲線。結果顯示，血清神經調節蛋白1診斷腦損傷發生的曲線下面積（area under curve，AUC）為0.864（95%CI：0.792～0.918），敏感度為90.00%，特異度為75.00%，截斷值為19.26pg/mL；葉酸診斷腦損傷發生的AUC為0.821（95%CI：0.744～0.833），敏感度為83.33%，特異度為70.59%，截斷值為7.17ng/mL；兩者聯合檢測的AUC為0.934（95%CI：0.876～0.970），敏感度為82.67%，特異度為88.24%，聯合診斷效能更好（Z值分別為2.869、3.603，P＜0.05），見圖1和表4。

2.6血清中神經調節蛋白1、葉酸表達對腦損傷患兒預后的預測價值

以超早產腦損傷患兒預后情況（預后不良=1，預后良好=0）為狀態變量，以血清神經調節蛋白1、葉酸水平為檢驗變量繪制ROC曲線。結果顯示，血清中神經調節蛋白1診斷不良預后發生的AUC為0.848（95%CI：0.732～0.928），敏感度為76.47%，特異度為83.72%，截斷值為14.96pg/mL；葉酸診斷不良預后發生的AUC為0.871（95%CI：0.760～0.944），敏感度為94.12%，特異度為74.42%，截斷值為5.62ng/mL；兩者聯合檢測的AUC為0.979（95%CI：0.904～0.995），敏感度為90.12%，特異度為93.02%，聯合診斷效能更好（Z值分別為2.616、2.688，P＜0.05），見圖2和表5。

3討論

3.1血清神經調節蛋白1對超早產兒腦損傷影響的分析

超早產兒腦損傷的臨床癥狀和體征不明顯，目前頭顱超聲、核磁共振成像（magnetic resonance imaging，MRI）等神經影像學在檢測和評估超早產兒神經系統損傷方面起著關鍵作用，但頭顱超聲由于技術因素和身體限制可能導致圖像欠佳，導致診斷不正確，而MRI掃描時間長、新生兒配合困難，導致其使用受到限制^［7］。近年來一些研究發現，血液生物標志物可用來診斷超早產腦損傷和預測神經發育結局^［8］。神經調節蛋白1通過ErbB受體酪氨酸激酶家族的作用觸發信號轉導，參與神經系統發育和神經元損傷的恢復。研究發現，神經調節蛋白1在急性卒中期間對大腦皮層和白質（包括胼胝體和穹窿）均具有顯著的神經保護作用^［9］。神經調節蛋白1參與維持血腦屏障完整性和腦微血管細胞活力，并且在血紅素誘導的損傷和缺血的情況下具有細胞保護作用^［10］。神經調節蛋白1也被證明能夠調節Bcl-2等抗凋亡蛋白的表達，抑制細胞凋亡和促炎反應，并可抑制單核細胞浸潤、炎性細胞因子產生和星形膠質細胞活化^［11］。本研究發現，神經調節蛋白1在超早產兒腦損傷患者血清中低表達，并隨著腦損傷程度的加重，血清中神經調節蛋白1水平顯著降低，并與腦損傷程度呈負相關性。血管性癡呆患者的血清神經調節蛋白1水平下降，神經調節蛋白1與認知功能、神經功能和預后具有明顯相關性^［12］。

3.2葉酸對超早產兒腦損傷影響的分析

葉酸是一種水溶性B族維生素，與中樞神經系統的功能和發育密切相關，在受孕前后攝入足夠的葉酸可降低后代出現神經管缺陷的概率^［13］。葉酸已被證明可以降低首次卒中的風險并改善其不良預后^［14］。葉酸通過抑制N-甲基-d-天冬氨酸受體（N-methyl-D-aspartic acid receptor，NMDAR）的過度激活，增強突觸功能來改善認知功能障礙并改善缺血性腦損傷^［15］。葉酸狀態不足與神經退行性疾病和腦血管疾病風險增加之間存在關系^［16］。賈碧野等^［17］于2016年研究發現，急性缺血性腦卒中患者血清中葉酸水平降低，低水平的葉酸含量可作為急性缺血性腦卒中潛在的預后評估標志物。本研究發現，超早產兒腦損傷患者血清中葉酸水平降低，并隨著腦損傷程度的加重，血清中葉酸水平依次降低，并與腦損傷程度呈負相關性。

3.3血清神經調節蛋白1、葉酸對超早產兒預后影響的分析

本研究中發現，預后不良患者血清中神經調節蛋白1水平降低，神經調節蛋白1對超早產兒腦損傷不良預后發生具有一定的預測價值。結果提示血清中神經調節蛋白1表達水平降低可能是超早產兒腦損傷的標志，對腦損傷的早期診斷、病情和預后評估具有重要參考價值。預后不良患者血清中葉酸水平降低，葉酸對超早產兒腦損傷早期診斷、不良預后發生也具有一定的臨床價值，本研究聯合ROC曲線分析，神經調節蛋白1和葉酸聯合診斷AUC為0.979，均高于各自單一診斷，表明神經調節蛋白1聯合葉酸檢測的價值優于單獨檢測，為及時治療、緩解病情提供一定參考。

綜上所述，超早產兒腦損傷患者血清中神經調節蛋白1、葉酸水平降低，與腦損傷程度呈負相關性，兩者對超早產兒腦損傷早期診斷和預測預后不良均具有一定的臨床價值。但本研究依然存在不足之處，神經調節蛋白1、葉酸與超早產兒腦損傷的發生發展的具體作用機制尚不清楚，仍需在細胞和動物實驗中進一步闡明，這也是后續研究的方向。

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［專業責任編輯：艾 婷］

［中文編輯：郭樂倩；英文編輯：楊周岐］