飼糧添加大豆異黃酮對產蛋后期蛋雞生產的影響

摘 要： 旨在研究飼糧添加三種不同大豆異黃酮（SIF）產品對產蛋后期蛋雞產蛋性能、蛋品質、血清指標、卵巢功能和脛骨質量的影響。試驗選取產蛋率相近的66周齡海蘭褐蛋雞432只，隨機分為4個處理組，每組6個重復，每個重復18只雞。對照組飼喂基礎飼糧，試驗組在基礎飼糧中分別添加1種大豆異黃酮產品，即SIF1、SIF2、SIF3。預試期1周，正試期8周。結果表明：1）與對照組相比，飼糧中添加SIF1和SIF3可顯著提高1～4、5～8和1～8周的產蛋率（Plt;0.05）；2）與對照組相比，飼糧中添加SIF1和SIF3可顯著提高第4周和第8周雞蛋的哈氏單位（Plt;0.05），飼糧添加SIF1可顯著提高第8周雞蛋的蛋白高度（Plt;0.05）；3）與對照組相比，飼糧中添加SIF1可顯著降低血清MDA含量（Plt;0.05），飼糧中添加SIF1和SIF3可顯著提高血清中GSH-Px含量和E 2含量（Plt;0.05），飼糧中添加SIF3可顯著增加血清P 4含量和血清Ca含量（Plt;0.05）；4）與對照組相比，飼糧中添加SIF2和SIF3可顯著增加卵泡總數、初級卵泡數、次級卵泡數和小白卵泡數（Plt;0.05）；5）與對照組相比，飼糧中添加SIF1、SIF2和SIF3可顯著提高脛骨鈣和磷含量（Plt;0.05）。綜上，SIF可能通過增加卵巢卵泡數量，提高血清抗氧化能力、生殖激素含量和脛骨鈣磷含量，進而改善產蛋后期蛋雞生產性能和雞蛋品質，不同SIF產品的改善效果有所差異。

關鍵詞： 大豆異黃酮；產蛋后期；生產性能；蛋品質；蛋雞

中圖分類號：S831.5"""" 文獻標志碼：A"""" 文章編號： 0366-6964（2025）01-0295-12

Effects of Dietary Soybean Isoflavone Supplementation on Production of Laying Hens in

Late Laying Period

WANG" Beibei E-mail：277179119@qq.com；QIU Kai，E-mail：qiukai@caas.cn

高產蛋雞生產強度大，營養物質吸收代謝速度快，在產蛋后期易出現營養代謝疾病，如脂肪肝、骨質疏松癥等^［1］，導致產蛋性能、雞蛋品質下降，嚴重制約養殖效益^［2］。為此，維生素^［3］、礦物質^［4］、益生菌^［5］和類黃酮^［6］等功能性飼糧添加劑不斷被研發用于改善蛋雞健康。

大豆異黃酮（soybean isoflavones， SIF）主要存在于豆類、谷物、牧草、水果、蔬菜等植物性食物中，其主要活性成分為染料木黃酮和大豆黃酮^［7-8］。兩者均屬于多酚類化合物，具與17-β-雌二醇相似的結構^［9-10］。SIF能夠結合并激活雌激素受體，通過替代或干擾體內雌激素和雌激素受體而發揮激活或拮抗作用^［11］，已被廣泛證實具有雌激素、抗雌激素、抗氧化、免疫、抗癌等生物活性。有研究發現，飼糧添加10 mg·kg^-1 SIF顯著提高了產蛋后期京粉1號蛋雞蛋殼厚度和蛋殼強度，對產蛋率、雞蛋蛋白高度和哈氏單位沒有顯著影響^［12］。飼糧添加大豆黃酮10～100 mg·kg^-1顯著提高了56周齡海蘭褐蛋雞產蛋率、蛋殼厚度、蛋殼比例和蛋殼強度，對雞蛋蛋白高度和哈氏單位沒有顯著影響^［13］。飼糧添加1 000 mg·kg^-1染料木黃酮，可顯著提高490日齡羅曼蛋雞產蛋率、蛋殼相對質量、蛋殼厚度、蛋殼強度和哈氏單位^［14］。SIF是一種混合物，不同生產商的工藝不同，其活性成分含量及組成比例存在差異。目前，關于SIF對蛋雞生產性能和蛋品質作用效果的研究報道并不一致，在產蛋后期上的應用效果仍需進一步探討與明確。

為此，本試驗選取市場上3種具有代表性的SIF飼糧添加劑產品，探究相同添加濃度下（30 mg·kg^-1）不同大豆異黃酮產品（SIF1、SIF2、SIF3）對產蛋后期蛋雞生產性能、蛋品質、血液生化指標、卵巢功能和脛骨質量的影響，為SIF產品在產蛋后期蛋雞飼糧中的科學應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗設計

試驗采用單因素隨機區組設計。選取432只66周齡的健康海蘭褐蛋雞，隨機分為4組，每組6個重復，每重復18只雞（每籠飼養3只蛋雞）。對照組飼喂玉米-豆粕型基礎飼糧，試驗組分別飼喂添加1種大豆異黃酮產品的基礎飼糧，即SIF1、SIF2、SIF3。基礎飼糧參考NRC（1994）和《雞飼養標準》（NY/T33—2004）配制，配方組成及營養水平見表1。飼養試驗共計9周，預試期1周，正試期8周，試驗開始前飼喂正常的蛋雞全價料，1周內逐漸替換為試驗飼糧。

1. 預混料為每千克飼糧提供：VA，12 500 IU；VD 3，4 125 IU；VE，15 IU；VK，2 mg；VB "1 mg；VB "8.5 mg；VB 6，8 mg；VB 1 5 mg；泛酸鈣，50 mg；煙酸，32.5 mg；生物素，2 mg；葉酸，5 mg；膽堿，500 mg；Mn，65 mg；I，1 mg；Fe，60 mg；Cu，8 mg；Zn，66 mg，植酸酶350 IU。2. 營養成分均為計算值

1. The premix provided the following per kg of the diet： VA，12 500 IU；VD 3，4 125 IU；VE，15 IU；VK，2 mg；VB "1 mg；VB "8.5 mg；VB 6，8 mg；VB 1 5 mg；Calcium pantothenate，50 mg；Nicotinic acid，32.5 mg；biotin，2 mg；folic acid，5 mg；choline，500 mg；Mn，65 mg；I，1 mg；Fe，60 mg；Cu，8 mg；Zn，66 mg，phytase 350 IU. 2. Nutrient levels were calculated values

1.2 飼養管理

本試驗采用密閉式雞舍三層立體籠養，將24個重復均勻分布于室內各個位置。早晚補光，16 h·d^-1光照，強度20 lx。室內相對濕度50%～80%，自然通風和縱向負壓通風相結合。自由采食和飲水；專人管理，每日15：00點撿蛋；每日清理雞糞1次，每周帶雞消毒1次；依照本地區商品蛋雞常規防疫制度免疫。

1.3 樣品采集與指標測定

1.3.1 生產性能

每天以重復為單位記錄產蛋數、日產蛋總重量、死亡和淘汰雞數，每周以重復為單位記錄飼糧消耗量1次。每日觀察并記錄糞便情況。計算出每周和全期的產蛋率、平均日采食量、平均蛋重、料蛋比等生產性能指標。

1.3.2 蛋品質

分別于正試期第28、56天每重復采5枚雞蛋，每重復上、中層左側雞籠各隨機選擇2枚，底層左側籠隨機選擇1枚。采用蛋形指數儀測定蛋形指數，蛋殼厚度測定儀（Egg Force Shell Thickness，Orka Technoligy Ltd）測定蛋殼厚度，蛋殼強度分析儀（Egg Force Reader，Orka Technoligy Ltd）測定蛋殼強度，采用SONOVA 蛋品質自動分析（Egg Analyzer TM，Orka Technology Ltd.）測定雞蛋濃蛋白高度、哈氏單位。

1.3.3 血液指標

正試期第56天，從每個重復中隨機選擇1只接近該重復平均體重的蛋雞（不同處理組單次采血盡量挑選同一層籠位的蛋雞，每次采血不選擇同一籠蛋雞），翅靜脈采血10 mL，3 000 r·min^-1離心10 min制備血清，置-20℃冰箱保存待用。

1.3.3.1 抗氧化指標：

采用南京建成生物工程研究所生產的試劑盒測定，包括總抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA），貨號分別為：A015-2-1、A001-3-2、A005-1-2、A003-1-2。

1.3.3.2 激素：

使用ELISA試劑盒測定黃體生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）、雌二醇（E 2）和孕酮（P 4），貨號分別為：ML07675、DKM4607A、ML08305、DKM9422A。

1.3.3.3 鈣、磷：

使用南京建成試劑盒測定血清中鈣、磷含量，貨號分別為：C004-2-1、C006-1-1。

1.3.4 卵巢功能

于正試期第56天，將“1.3.3”中挑選的蛋雞屠宰。摘取卵巢，迅速放入配制好的Davidson’s AFA固定液中，期間更換一次固定液，制備切片后觀察并記錄各級卵泡數量。每例卵巢組織脫水、石蠟包埋，4 μm連續切片30張（切片方向與卵巢系膜平行），取序號為10、20、30的切片進行HE染色，進而對每張HE染色切片進行初級卵泡細胞和次級卵泡細胞（只記錄細胞核直徑≤1 mm的次級卵泡細胞）計數；從染色切片中隨機選取10張，每張分別測量20個初級卵泡細胞和次級卵泡細胞細胞核直徑（共計200個），分別計算初級卵泡細胞、次級卵泡細胞細胞核平均直徑。

根據Abercrobies的公式：P=A·M/（M+L），求出每個卵巢上的初級卵泡總數、次級卵泡總數和萎縮次級卵泡數，并求出次級卵泡萎縮率。

初級卵泡的判定：卵泡周圍顆粒細胞為單層；次級卵泡的判定：卵泡周圍顆粒細胞為多層；萎縮次級卵泡（直徑≤1 mm）的判定：顆粒細胞與卵泡基底膜脫離或顆粒細胞萎縮。

公式中，P為卵巢中初級或次級卵泡總數，A=所查切片平均每張卵泡數量·切片數量，M為每張切片厚度（4 μm），L為初級或次級卵母細胞核平均直徑（μm）。所查切片平均每張卵泡數量來自于該例樣本3張切片計數的平均值；切片數量=脫水后卵巢組織厚度（μm）/每張切片厚度（4 μm）。小白卵泡、大白卵泡、小黃卵泡、大黃卵泡的區分，則是根據卵泡的大小和顏色，對卵泡進行分類。分為：小白卵泡（lt;2.00 mm），大白卵泡（2.00～4.00 mm），小黃卵泡（4.00～10.00 mm），大黃卵泡（＞10.00 mm）。

1.3.5 脛骨質量

采集脛骨，左脛骨去除肌肉和軟骨后測量長度，用質構儀測定骨骼強度，斷裂的脛骨在105℃干燥箱中干燥48 h，乙醚脫脂72 h，之后在電磁爐上碳化，然后在550℃馬弗爐中灰化16 h，用電子分析天平稱量脛骨的灰分重量，最后將灰分溶解在高氯酸和硝酸中，測定脛骨中的鈣磷。右脛骨，采用X-射線法測定骨骼密度（BMD）和骨礦含量（BMC）。

1.4 數據分析

試驗數據用Excel進行整理，并將4個處理組進行歸類，用SPSS 27統計軟件的ANOVA程序進行單因素方差分析，采用Duncan’s法進行差異顯著性分析，顯著水平為Plt;0.05。

2 結 果

2.1 不同大豆異黃酮產品對產蛋后期蛋雞生產性能的影響

由表2可知，與對照組相比，飼糧中添加SIF1和SIF3均顯著提高了1～4、5～8和1～8周產蛋后期蛋雞的產蛋率（Plt;0.05）。飼糧添加SIF對平均蛋重、平均日產蛋重、平均日采食量及料蛋比均無顯著影響（Pgt;0.05）。

2.2 不同大豆異黃酮產品對產蛋后期蛋雞雞蛋品質的影響

由表3可知，與對照組相比，飼糧中添加SIF1和SIF3均顯著提高了第4周和第8周雞蛋的哈氏單位（Plt;0.05）。與對照組相比，飼糧中添加SIF1顯著提高了第8周雞蛋的蛋白高度（Plt;0.05）。飼糧添加SIF對蛋形指數、蛋殼厚度、蛋殼強度及蛋黃顏色均無顯著影響（Pgt;0.05）。

2.3 不同大豆異黃酮產品對產蛋后期蛋雞血清抗氧化指標的影響

由表4可知，與對照組相比，飼糧中添加SIF1顯著降低了血清MDA含量（Plt;0.05）。與對照組相比，飼糧中添加SIF1和SIF3均顯著提高了血清中GSH-Px含量（Plt;0.05）。飼糧添加SIF對血清SOD及T-AOC均無顯著影響（Pgt;0.05）。

2.4 不同大豆異黃酮產品對產蛋后期蛋雞血清激素指標的影響

由表5可知，與對照組相比，飼糧中添加SIF1和SIF3均顯著提高了血清E 2含量（Plt;0.05）。與對照組相比，飼糧中添加SIF3顯著增加了血清P 4含量（Plt;0.05）。飼糧添加SIF對血清LH及FSH均無顯著影響（Pgt;0.05）。

2.5 不同大豆異黃酮產品對產蛋后期蛋雞血清鈣磷含量的影響

由表6可知，與對照組相比，飼糧中添加SIF3顯著提高了血清鈣含量（Plt;0.05）。飼糧添加SIF對血清P無顯著影響（Pgt;0.05）。

2.6 不同大豆異黃酮產品對產蛋后期蛋雞卵巢功能的影響

由圖1和表7可知，與對照組相比，飼糧中添加SIF2和SIF3均顯著增加了卵泡總數、初級卵泡數、次級卵泡數和小白卵泡數（Plt;0.05）。飼糧添加SIF對次級卵泡萎縮率、大白卵泡數、小黃卵泡數及大黃卵泡數均無顯著影響（Pgt;0.05）。

2.7 不同大豆異黃酮產品對產蛋后期蛋雞脛骨質量的影響

由表8可知，與對照組相比，飼糧中添加SIF1、SIF2、SIF3均顯著提高了脛骨鈣和磷含量（Plt;0.05），其中SIF3效果較好。飼糧添加SIF對脛骨長度、脛骨強度、脛骨密度、脛骨骨曠鹽及脛骨灰分均無顯著影響（Pgt;0.05）。

3 討 論

3.1 飼糧添加不同大豆異黃酮產品對產蛋后期蛋雞生產性能的影響

蛋雞的生產性能在產蛋后期迅速下降，對養殖戶造成嚴重的經濟影響。因此，需要提高產蛋后期的產蛋量，以延長生產周期。研究表明，飼糧中添加6 mg·kg^-1 SIF可顯著提高產蛋后期羅曼蛋雞產蛋率^［15］。飼糧添加10～100 mg·kg^-1大豆黃酮可顯著提高產蛋后期海蘭褐蛋雞產蛋率^［13］。飼糧添加1 000 mg·kg^-1染料木黃酮，可顯著提高490日齡羅曼蛋雞產蛋率^［14］。SIF作為一種激動劑占據空缺的雌激素結合位點，從而導致全身雌激素效應增加，上調促性腺激素受體mRNA表達，改善蛋雞卵泡發育，并在產蛋高峰期后提高產蛋性能^［16］。本研究結果與之前報道一致，飼糧添加SIF1和SIF3均顯著提高了產蛋后期蛋雞產蛋率。SIF對生產性能的作用可能取決于蛋雞品種、生理條件以及添加劑量和持續時間。

3.2 飼糧添加不同大豆異黃酮產品對產蛋后期蛋雞雞蛋品質的影響

產蛋后期，蛋雞代謝紊亂和生理功能退化，雞蛋品質下降^［17］，SIF可通過增加卵黏蛋白的含量來增加蛋白高度^［18］，從而提高蛋品質。有研究證實，大豆黃酮能提高哈氏單位，改善蛋品質^［19］。飼糧中添加30 mg·kg^-1大豆黃酮可顯著提高產蛋后期海蘭褐蛋雞第4周和第8周雞蛋的哈氏單位^［20］。飼糧添加1 000 mg·kg^-1染料木黃酮，可顯著提高490日齡羅曼蛋雞雞蛋的哈氏單位^［14］。本試驗結果表明，與對照組相比，飼糧中添加SIF1和SIF3顯著提高了第4周和8周雞蛋的哈氏單位，飼糧中添加SIF1顯著提高了第8周雞蛋的蛋白高度，與前人結果相同。也有類似研究，日糧中添加抗氧化劑（迷迭香提取物^［21］、茶多酚^［17］）可以提高產蛋后期雞蛋的哈氏單位。蛋殼的厚度和強度能在一定程度上反映機體對鈣的吸收代謝能力，尤其是產蛋后期的蛋雞，機體對鈣的吸收代謝能力降低，容易降低蛋殼強度，從而影響蛋品質^［22-23］。飼糧添加10 mg·kg^-1 SIF可顯著提高產蛋后期京粉1號蛋雞所產雞蛋的蛋殼厚度和蛋殼強度^［12］。飼糧添加SIF可顯著提高產蛋后期鵪鶉蛋的蛋殼厚度和蛋殼強度^［24］。SIF通過調節蛋雞破骨細胞，從而改善鈣的代謝，提高蛋殼質量^［25-26］。本試驗結果表明，飼糧添加3種SIF產品對蛋殼厚度和蛋殼強度均沒有顯著影響，與前人研究結果不一致，可能與添加時間、劑量以及試驗動物有關，具體原因有待進一步研究。

3.3 飼糧添加不同大豆異黃酮產品對產蛋后期蛋雞血清抗氧化指標的影響

產蛋后期蛋雞由于卵巢衰老和氧化應激引起的激素變化，生產性能隨著年齡的增長而逐漸下降^［27］。抗氧化酶包括SOD、CAT和GSH-Px。SOD催化超氧化物自由基轉化為氧氣和過氧化氫^［28］，CAT和GSH-Px可以將過氧化氫轉化為水^［29］，GSH-Px也分解一氧化氮和過氧亞硝酸鹽^［30］。T-AOC是評估機體抗氧化功能的綜合指標^［31］。MDA是脂質過氧化的副產物，也是氧化應激的主要標志。因此，氧化應激的發生通常伴隨著體內抗氧化酶活性的變化^［32-33］。有研究發現，80日齡蛋雞肝GSH、T-SOD、GSH-Px和T-AOC的活性低于幼齡蛋雞，MDA含量則相反^［34］。許多研究表明，黃酮類化合物具有減輕氧化應激的作用。槲皮素屬于黃酮類化合物，可降低鵪鶉肝的MDA含量，減輕氧化應激^［35］。飼糧添加SIF可顯著提高產蛋后期京粉1號蛋雞血清GSH-Px水平，降低MDA水平^［36］。本研究顯示，SIF1和SIF3均顯著提高了血清GSH-Px含量，降低了血清MDA含量，與前人研究結果相似。SIF通過終止自由基的連鎖反應、清除自由基，提高機體抗氧化能力^［37］。

3.4 飼糧添加不同大豆異黃酮產品對產蛋后期蛋雞血清激素指標的影響

FSH和LH統稱促性腺激素，具有促進卵泡發育成熟的作用，共同促進雌激素分泌。雌激素是家禽雌性生殖發育的主要調節因子，當體內內源性E 2濃度較低時，SIF可能作為激動劑占據空缺的雌激素結合位點，從而增加全身雌激素效應^［38］。在蛋雞中，雌激素狀態反映在血清中的E 2水平上，血清E 2水平在一定程度上指示卵巢卵泡發育。隨著蛋雞產蛋日齡的增加，機體內的雌激素濃度逐漸降低，從而導致卵泡的生成和成熟數量越來越少，產蛋率越來越低。SIF被證明能提高產蛋后期蛋雞血清的雌激素濃度^［18］。飼糧添加染料木黃酮可顯著提高產蛋后期棲嶺草雞種母雞血清中E 2和P 4含量^［39］。本研究表明，與對照組相比，飼糧中添加SIF1和SIF3均顯著提高了血清E 2濃度；飼糧添加SIF3顯著提高了血清P 4濃度。SIF可與下丘腦、垂體的雌激素受體結合，從而改善生殖機能^［40］，這可能是SIF提高產蛋性能的原因。綜上，SIF可提高機體血清激素濃度。

3.5 飼糧添加不同大豆異黃酮對產品產蛋后期蛋雞血清鈣磷含量的影響

鈣在骨骼和蛋殼形成中起著重要作用。SIF已被證明可降低破骨細胞中的細胞內鈣濃度^［41］，這意味著可用于骨和蛋殼形成的鈣量增加。在本研究中，飼糧添加SIF1和SIF3顯著提高了血清鈣含量。研究發現，飼糧添加大豆黃酮后產蛋后期海蘭褐蛋雞血清鈣、磷含量提高^［42］。給174日齡迪卡蛋雞飼糧添加大豆黃酮3周，血清總鈣水平和堿性磷酸酶活性提高，骨骼鈣化水平增加^［43］，說明大豆黃酮可以維持蛋雞鈣磷代謝的平衡。飼糧添加SIF可顯著提高產蛋后期鵪鶉血清鈣和磷水平^［24］。這表明SIF可提高骨形成率和蛋殼質量，因為腸道鈣吸收得到了改善^［44］。

3.6 飼糧添加不同大豆異黃酮產品對產蛋后期蛋雞卵巢功能的影響

隨著蛋雞年齡的增長，產蛋數量增加，卵巢中的活性氧水平增加^［45］，抗氧化酶的活性降低，導致卵泡閉鎖率增加和產蛋性能下降^［46］。本試驗結果顯示，與對照組相比，飼糧添加SIF2和SIF3顯著增加了卵巢總卵泡數、初級卵泡數、次級卵泡數、小白卵泡數。研究發現，飼糧添加15 mg·kg^-1 SIF顯著提高產蛋后期海蘭褐蛋雞各級卵泡數，且極顯著提高大白卵泡和初級卵泡數，同時極顯著降低小黃卵泡、大白卵泡、次級卵泡的閉鎖率^［47］。飼糧添加10 mg·kg^-1大豆黃酮可顯著增加產蛋高峰后ISA蛋雞小黃卵泡數和大白卵泡數^［16］，大豆黃酮可刺激蛋雞卵巢中的生殖細胞增殖。SIF（染料木黃酮和大豆黃酮）除了改善產蛋性能外，還可作為雌激素受體激動劑，上調雌激素受體和卵泡刺激素受體mRNA表達，以促進卵泡發育并增加小黃卵泡數^［48-49］。本試驗結果與上述結果相似，即SIF可調節卵泡發育并提高產蛋后期蛋雞的生產性能。

3.7 飼糧添加不同大豆異黃酮產品對產蛋后期蛋雞脛骨質量的影響

日糧中的鈣主要通過小腸中十二指腸以及腎吸收到血液中，經血液循環被骨骼和子宮吸收。成熟的骨骼一般處于破骨細胞和成骨細胞的動態平衡狀態，當體內鈣收支不平衡時會導致破骨運動大于成骨運動，骨骼的鈣含量下降，進而導致骨質疏松^［50］。產蛋后期蛋雞雌激素水平及蛋殼腺雌激素受體水平下降，會導致十二指腸吸收能力下降，因此需從骨骼中動員破骨細胞以維持產蛋時鈣需要，這會導致骨強度降低、骨質疏松癥發生率增高^［51］。研究發現，飼糧添加染料木黃酮可顯著提高產蛋后期LBB蛋雞脛骨Ca和P水平^［52］，增強脛骨強度^［53］。飼糧添加10 mg·kg^-1大豆黃酮可顯著提高產蛋后期伊莎褐蛋雞血漿Ca和降鈣素水平，提高骨密度^［54］。在本研究中，飼糧添加SIF顯著提高了脛骨Ca和P水平，與前人研究結果一致。綜上，SIF通過內分泌途徑促進產蛋后期蛋雞腸道鈣質吸收，降低骨動員與轉換，改善鈣磷代謝，從而提高脛骨質量。

4 結 論

在本試驗條件下，蛋雞飼糧添加3個大豆異黃酮產品（SIF1、SIF2、SIF3）均可通過緩解氧化應激，增強內分泌，促進卵泡發育，改善脛骨質量，從而提高產蛋后期蛋雞的生產性能和蛋品質，其中，SIF1和SIF3的作用效果較好。

參考文獻（References）：

［1］ YUE Q X，CHEN Y，CHEN H，et al.Transcriptome profile reveals novel candidate genes associated with bone strength in end-of-lay hens［J］.Anim Biotechnol，2023，34（7）：3099-3107.

［2］ WANG W W，WANG J，ZHANG H J，et al.Transcriptome analysis reveals mechanism underlying the differential intestinal functionality of laying hens in the late phase and peak phase of production［J］.BMC Genomics，2019，20（1）：970.

［3］ GAN L P，ZHAO Y Z，MAHMOOD T，et al.Effects of dietary vitamins supplementation level on the production performance and intestinal microbiota of aged laying hens［J］.Poult Sci，2020，99（7）：3594-3605.

［4］ KIM C H，JEONG S H，LIM S J，et al.Effect of organic or inorganic mineral premix in the diet on laying performance of aged laying hens and eggshell quality［J］.Animals （Basel），2022，12（18）：2378.

［5］ LV J，GUO L J，CHEN B X，et al.Effects of different probiotic fermented feeds on production performance and intestinal health of laying hens［J］.Poult Sci，2022，101（2）：101570.

［6］ GOLIOMYTIS M，SIMITZIS P，PAPALEXI A，et al.Influence of citrus flavonoids on laying hen performance，inflammatory immune response，egg quality and yolk oxidative stability［J］.Br Poult Sci，2019，60（3）：272-278.

［7］ MESSINA M.Soy and health update：evaluation of the clinical and epidemiologic literature［J］.Nutrients，2016，8（12）：754.

［8］ LI P，LIU Y F，GAO M K，et al.Dietary soy saponin improves antioxidant and immune function of layer hens［J］.J Poult Sci，2022，59（3）：197-205.

［9］ RIZZO G.Soy-based tempeh as a functional food：evidence for human health and future perspective［J］.Front Biosci （Elite Ed），2024，16（1）：3.

［10］ 王丹媚.β-葡萄糖苷酶水解大豆異黃酮及其在提高土雞品質中的探究［D］.金華：浙江師范大學，2022.

WANG D M.Hydrolysis of soybean isoflavones by β-glucosidase and its application in improving the quality of local chickens［D］.Jinhua：Zhejiang Normal University，2022.（in Chinese）

［11］ LI L L，WANG Y L，WANG H H，et al.Protective effects of genistein on the production performance and lipid metabolism disorders in laying hens with fatty liver hemorrhagic syndrome by activation of the GPER-AMPK signaling pathways［J］.J Anim Sci，2023，101：skad197.

［12］ 田何芳，金永燕，莊智威，等.大豆異黃酮對產蛋后期京粉1號蛋雞產蛋性能、蛋品質、血漿生化指標和抗氧化能力的影響［J］.中國家禽，202 43（12）：38-43.

TIAN H F，JIN Y Y，ZHUANG Z W，et al.Effects of soybean isoflavones on laying performance，egg quality，plasma biochemical indicators and antioxidant capacity in jingfen No.1 laying hens at the late phase of production［J］.China Poultry，202 43（12）：38-43.（in Chinese）

［13］ 蔡 娟，顧 歡，常玲玲，等.大豆黃酮在蛋雞飼料中的安全性評價：生產性能、蛋品質和繁殖器官發育［J］.動物營養學報，2013，25（3）：635-642.

CAI J，GU H，CHANG L L，et al.Safety of daidzein in laying hens：performance，egg quality and reproductive organ development［J］.Chinese Journal of Animal Nutrition，2013，25（3）：635-642.（in Chinese）

［14］ 陳常秀，李永洙.染料木素對后期蛋雞生產性能及蛋品質的影響［J］.西北農林科技大學學報：自然科學版，201 39（9）：53-57.

CHEN C X，LI Y Z.Effect of genistein on performance，egg quality and antioxidant status in postpeak hens［J］.Journal of Northwest Aamp;F University： Natural Science Edition，201 39（9）：53-57.（in Chinese）

［15］ 王紅琴，李鴻俊，楊 旭，等.大豆異黃酮對產蛋后期蛋雞產蛋性能及品質影響［J］.中國畜禽種業，2019，15（11）：174-175.

WANG H Q，LI H J，YANG X，et al.Effects of soybean isoflavone on laying performance and quality of laying hens in late laying period［J］.The Chinese Livestock and Poultry Breeding，2019，15（11）：174-175.（in Chinese）

［16］ LIU H Y，ZHANG C Q.Effects of daidzein on messenger ribonucleic acid expression of gonadotropin receptors in chicken ovarian follicles［J］.Poult Sci，2008，87（3）：541-545.

［17］ 周建民，武書庚，王 晶，等.產蛋后期蛋雞生理特點與營養調控［J］.中國家禽，202 43（3）：74-82.

ZHOU J M，WU S G，WANG J，et al.Physiological characteristics and nutritional regulation of aged laying hens［J］.China Poultry，202 43（3）：74-82.（in Chinese）

［18］ QIANG T Y，WANG J P，DING X M，et al.The improving effect of soybean isoflavones on ovarian function in older laying hens［J］.Poult Sci，2023，102（10）：102944.

［19］ ZHANG L，ZHONG G，GU W J，et al.Dietary supplementation with daidzein and Chinese herbs，independently and combined，improves laying performance，egg quality and plasma hormone levels of post-peak laying hens［J］.Poult Sci，202 100（6）：101115.

［20］ 張 玲，鐘 光，顧文婕，等.飼糧添加大豆黃酮對產蛋后期蛋雞產蛋性能、蛋品質和血漿激素指標的影響［J］.動物營養學報，2020，32（9）：4110-4115.

ZHANG L，ZHONG G，GU W J，et al.Effects of dietary daidzein on laying performance，egg quality and plasma hormone indices of laying hens during late laying cycle［J］.Chinese Journal of Animal Nutrition，2020，32（9）：4110-4115.（in Chinese）

［21］ ZHANG L H，GE J W，GAO F，et al.Rosemary extract improves egg quality by altering gut barrier function，intestinal microbiota and oviductal gene expressions in late-phase laying hens［J］.J Anim Sci Biotechnol，2023，14（1）：121.

［22］ 高惠林，王前光，劉 秋.大豆黃酮的作用機制及在蛋雞養殖中的應用研究［J］.湖北農業科學，201 50（3）：550-552，556.

GAO H L，WANG Q G，LIU Q.Research overview on action mechanism of daidzein and its application in the cultivation of layers［J］.Hubei Agricultural Sciences，201 50（3）：550-552，556.（in Chinese）

［23］ 張 玲，鐘 光，張 堯，等.大豆黃酮對余干烏骨雞產蛋后期產蛋性能和蛋品質的影響［J］.中國家禽，2020，42（4）：63-66.

ZHANG L，ZHONG G，ZHANG Y，et al.Effects of daidzein on laying performance and egg quality in post-peak yugan black-bone laying hens［J］.China Poultry，2020，42（4）：63-66.（in Chinese）

［24］ SAHIN N，ONDERCI M，BALCI T A，et al.The effect of soy isoflavones on egg quality and bone mineralisation during the late laying period of quail［J］.Br Poult Sci，2007，48（3）：363-369.

［25］ 倪迎冬，洪文杰，任靈芝，等.大豆黃酮對母雞蛋品質及后代仔雞肉品質的影響［J］.畜牧獸醫學報，2007，38（11）：1188-1194.

NI Y D，HONG W J，REN L Z，et al.Effects of dietary daidzein on egg quality and meat quality of the offspring of broiler breed hens during the late period of laying cycle［J］.Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica，2007，38（11）：1188-1194.（in Chinese）

［26］ DE MATOS R.Calcium metabolism in birds［J］.Vet Clin North Am Exot Anim Pract，2008，11（1）：59-82.

［27］ LIU L M，ZHANG G Q，QU G，et al.Effects of dietary Lactobacillus rhamnosus GG supplementation on the production performance，egg quality，eggshell ultrastructure，and lipid metabolism of late-phase laying hens［J］.BMC Vet Res，2023，19（1）：150.

［28］ ABREU I A，CABELLI D E.Superoxide dismutases-a review of the metal-associated mechanistic variations［J］.Biochim Biophys Acta，2010，1804（2）：263-274.

［29］ DEVINE P J，PERREAULT S D，LUDERER U.Roles of reactive oxygen species and antioxidants in ovarian toxicity［J］.Biol Reprod，2012，86（2）：27.

［30］ TONG L Y，CHUANG C C，WU S Y，et al.Reactive oxygen species in redox cancer therapy［J］.Cancer Lett，2015，367（1）：18-25.

［31］ CADENAS E，DAVIES K J.Mitochondrial free radical generation，oxidative stress，and aging［J］.Free Radic Biol Med，2000，29（3-4）：222-230.

［32］ BIAZUS A H，DA SILVA A S，BOTTARI N B，et al.Fowl typhoid in laying hens cause hepatic oxidative stress［J］.Microb Pathog，2017，103：162-166.

［33］ DA ROSA G，DA SILVA A S，SOUZA C F，et al.Impact of colibacillosis on production in laying hens associated with interference of the phosphotransfer network and oxidative stress［J］.Microb Pathog，2019，130：131-136.

［34］ LIU X T，LIN X，MI Y L，et al.Age-related changes of yolk precursor formation in the liver of laying hens［J］.J Zhejiang Univ Sci B，2018，19（5）：390-399.

［35］ ARSLAN A S，SEVEN I，MUTLU S I，et al.Potential ameliorative effect of dietary quercetin against lead-induced oxidative stress，biochemical changes，and apoptosis in laying Japanese quails［J］.Ecotoxicol Environ Saf，2022，231：113200.

［36］ 程千惠，汪智云，王煥斌，等.25-羥維生素D 3、維生素C、大豆異黃酮對雞蛋殼質量及鈣代謝的影響［J］.飼料工業，2024，45（2）：66-76.

CHENG Q H，WANG Z Y，WANG H B，et al.Effects of 25-hydroxyvitamin D 3，vitamin C，and soybean isoflavone on chicken eggshell quality and calcium metabolism［J］.Feed Industry，2024，45（2）：66-76.（in Chinese）

［37］ 林廈菁，茍鐘勇，范秋麗，等.大豆異黃酮對黃羽肉種母雞產蛋、繁殖性能及血漿生化指標的影響［J］.中國畜牧獸醫，2023，50（11）：4454-4462.

LIN X J，GOU Z Y，FAN Q L，et al.Effects of soy isoflavone on laying and reproductive performance，plasma biochemical indices of lingnan yellow-feathered broiler breeder hens［J］.China Animal Husbandry amp; Veterinary Medicine，2023，50（11）：4454-4462.（in Chinese）

［38］ SETCHELL K D R，CASSIDY A.Dietary isoflavones：biological effects and relevance to human health［J］.J Nutr，1999，129（3）：758S-767S.

［39］ 魏全偉，呂增鵬，胡晨輝，等.飼糧中添加染料木黃酮對產蛋后期種母雞繁殖性能的影響［J］.南京農業大學學報，202 44（5）：936-942.

WEI Q W，L Z P，HU C H，et al.Effects of dietary genistein supplementation on the reproductive performance of breeder hens in the late laying period［J］.Journal of Nanjing Agricultural University，202 44（5）：936-942.（in Chinese）

［40］ 張響英，唐現文，劉海霞，等.大豆黃酮對白羽番鴨繁殖性能及相關激素水平的影響［J］.家畜生態學報，2008，29（6）：43-45，52.

ZHANG X Y，TANG X W，LIU H X，et al.Effects of daidzein on breeding performance and related hormone levels in white muscovy ducks［J］.Acta Ecologiae Animalis Domastici，2008，29（6）：43-45，52.（in Chinese）

［41］ KAJIYA H，OKABE K，OKAMOTO F，et al.Protein tyrosine kinase inhibitors increase cytosolic calcium and inhibit actin organization as resorbing activity in rat osteoclasts［J］.J Cell Physiol，2000，183（1）：83-90.

［42］ 顧 歡，施壽榮，童海兵，等.大豆黃酮對產蛋后期蛋雞生產性能、血液指標和經濟效益的影響［J］.動物營養學報，2013，25（2）：390-396.

GU H，SHI S R，TONG H B，et al.Effects of daidzein on performance，blood parameters and economic benefits in laying hens during the late laying period［J］.Chinese Journal of Animal Nutrition，2013，25（2）：390-396.（in Chinese）

［43］ 孟 婷，韓正康，王國杰.大豆黃酮對初產蛋雞生產性能和血清生理生化指標的影響［J］.中國家禽，2002，24（13）：13-14.

MENG T，HAN Z K，WANG G J.Effect of diet supplemented with daidzein on the performance，serum physio-biochemical parameters in laying hens［J］.China Poultry，2002，24（13）：13-14.（in Chinese）

［44］ ARJMANDI B H，KHALIL D A，HOLLIS B W.Soy protein：its effects on intestinal calcium transport，serum vitamin D，and insulin-like growth factor-I in ovariectomized rats［J］.Calcif Tissue Int，2002，70（6）：483-487.

［45］ WANG J P，JIA R，GONG H J，et al.The effect of oxidative stress on the chicken ovary：involvement of microbiota and melatonin interventions［J］.Antioxidants （Basel），202 10（9）：1422.

［46］ 姜禮文，馮京海，張敏紅，等.不同周齡蛋雞卵巢機能及氧化還原狀態的變化研究［J］.中國畜牧獸醫，2013，40（10）：165-169.

JIANG L W，FENG J H，ZHANG M H，et al.Influence of age on ovary function and oxidative stress in laying hens［J］.China Animal Husbandry amp; Veterinary Medicine，2013，40（10）：165-169.（in Chinese）

［47］ 曹滿湖，羅理成，孫佳靜，等.大豆異黃酮對產蛋后期蛋雞卵巢機能的影響［J］.動物營養學報，2016，28（8）：2458-2464.

CAO M H，LUO L C，SUN J J，et al.Effects of daidzein on ovary function of hens during the late laying period［J］.Chinese Journal of Animal Nutrition，2016，28（8）：2458-2464.（in Chinese）

［48］ 胡晨輝.日糧染料木黃酮對種母雞繁殖性能及子代骨骼肌發育的影響［D］.南京：南京農業大學，2020.

HU C H.Effect of dietary genistein on reproductive performance of breeding hens and development of skeletal muscles and development of skeletal muscles of offspring broilers［D］.Nanjing：Nanjing Agricultural University，2020.（in Chinese）

［49］ SHEN Y R，WANG Q，SHAO D，et al.Effects of daidzein on egg production and gonadotropin related gene expression in the ovary and follicles of laying hens［J］.Eur Poult Sci，2016，80：1-8.

［50］ RACHNER T D，KHOSLA S，HOFBAUER L C.Osteoporosis：now and the future［J］.Lancet，201 377（9773）：1276-1287.

［51］ FLEMING R H，MCCORMACK H A，WHITEHEAD C C.Bone structure and strength at different ages in laying hens and effects of dietary particulate limestone，vitamin K and ascorbic acid［J］.Br Poult Sci，1998，39（3）：434-440.

［52］ LV Z P，YAN S J，LI G，et al.Genistein improves the reproductive performance and bone status of breeder hens during the late egg-laying period［J］.Poult Sci，2019，98（12）：7022-7029.

［53］ SABERIFAR T，SAMADI F，DASTAR B，et al.Enhancement of productive performance，bone physical characteristics，and mineralization of laying hens during the post-peak period by genistein［J］.Arch Razi Inst，202 76（2）：359-369.

［54］ 周振雷，侯加法，陶慶樹，等.大豆黃酮對產蛋后期蛋雞內分泌及骨代謝的影響［J］.中國獸醫學報，2007，27（3）：363-365.

ZHOU Z L，HOU J F，TAO Q S，et al.Effects of daidzein on the incretion and bone metabolism in cage layers during later cycle［J］.Chinese Journal of Veterinary Science，2007，27（3）：363-365.（in Chinese）

（編輯 范子娟）