一例豬圓環病毒病的診斷

摘要：豬圓環病毒病是豬圓環病毒引起豬的一種多系統功能障礙性疾病。病豬主要特征為體質下降、生長發育不良、消瘦、貧血、黃疸、呼吸困難、淋巴結腫大、內臟器官和皮膚廣泛病變等。2024年5月在安徽省合肥市某黑毛豬場部分黑毛豬開始咳嗽，后面出現氣喘癥狀，食欲下降，消瘦。筆者通過對病豬的臨床癥狀及剖檢組織病變分析觀察，經過實驗室的細菌型檢查、藥敏實驗、PCR檢測最終確定為豬圓環病毒病并發細菌感染。文章對該病發生的原因、如何診斷和鑒別進行了分析，并提出一些防控措施，希望有助于該病的診斷和防治。

關鍵詞：豬圓環病毒；PCR檢測；診斷

豬圓環病毒隸屬于圓環病毒科圓環病毒屬，是目前發現的最小的一種動物病毒。豬圓環病毒為無囊膜環狀、共價閉合的雙鏈DNA病毒^[1]。該病毒對雞、牛、羊等多種動物及人的紅細胞均無凝集作用，病毒顆粒大小在17 nm左右。按其核酸序列和抗原性不同，將其分為4個亞型：PCV1，PCV2，PCV3，PCV4。

PCV1是1970年在豬腎臟上皮細胞中首次被發現的，其基因組長度不超過1 800 bp，與PCV2，PCV3，PCV4類似。起初，PCV1僅被視為無致病性污染物。然而，隨著研究的深入，我國科學家在2008年第一次利用PCV1抗體的免疫過氧化物酶單細胞實驗檢測發現，257例全國樣本中，PCV1抗體在臨床上的檢出率為19 %左右。近年來數據表示PCV1是一種廣泛存在的病毒，但感染率不高。PCV2病毒是在20世紀晚期由加拿大的科學家首次發現的。自該毒株被發現后，國內外不斷有關于其感染情況的報告，其中最早在1997年在我國被發現。PCV2a，PCV2b，PCV2c，PCV2d，PCV2e，PCV2f分別為PCV2的六種基因型。PCV2是目前唯一能導致豬多器官功能衰竭綜合癥的病原體，同時也與豬皮炎、腎病綜合征、豬繁殖和呼吸道綜合征、仔豬震顫等疾病有著緊密的聯系。PCV3在美國首先被發現，其基因組長度在20 000 bp左右。中國是繼美國后，又一個報告了PCV3的國家^[2]。 PCV3感染在國內的分布較廣，感染率呈逐年上升的趨勢。前期研究表明，PCV3與PCV2具有很強的相似性，可導致斷奶仔豬多系統綜合癥等豬圓環病毒病相關癥狀，并與其它豬病原體共感染。PCV4是最晚發現的 PCV，其全基因組約1 770 bp，在湖南省第一次發現的PCV4亞型，但目前國內外關于PCV4基因分型的報道很少，且體外培養的病例更是罕見。迄今，PCV4主要在中國，日本，韓國等國家均有分布，但仍未出現大范圍檢測和大量陽性的病例。

豬圓環病毒病，其發病季節沒有明顯的季節性，以呼吸道、消化道和胎盤為主要傳播媒介，傳播途徑主要為呼吸道、消化道和胎盤，感染的豬和流產的胎兒都是傳播的媒介。該疾病在各年齡階段都容易發生，尤以仔豬最多，6-12周時最多見。

1 病例介紹

在2024年5月，安徽省合肥市某黑毛豬場部分黑毛豬開始咳嗽，后面出現氣喘癥狀，食欲下降，消瘦等臨床癥狀。筆者觀察到該養殖場對糞便沒有進行及時合理處理，導致糞便隨意排放，養殖環境臟亂差，豬場飼料單一，品質極差，很難滿足豬的日常營養需求。筆者詢問場主黑毛豬免疫情況，得知該豬場豬沒有進行任何疫苗免疫。

2 臨床癥狀及剖檢組織病變

2.1臨床癥狀

該病豬發熱，消瘦、食欲下降并呼吸困難和水腫。體表檢查發現腹股溝淺淋巴結腫大（見圖1A），全身有大小不等的褐色實變區（見圖2B）。

2.2剖檢組織病變

剖檢病豬后肉眼可見，該病豬心臟脂肪漿液化（見圖2A）肺彌漫性病變（見圖2B）脾臟腫大（見圖2C）腎皮質發白（見圖2D）胃出血（見圖2E）喉頭出血（見圖2F）。

3 實驗室檢查

3.1 細菌學檢查

在無菌操作的前提下，將肺臟、肝臟做切口，涂布于蓋玻片上，革蘭氏染色進行鏡檢。鏡檢結果有革蘭氏陽性菌和陰性菌。將肺臟、肝臟研磨，進行三區劃線接種于血平板，37 ℃恒溫培養12 h以上，挑取單菌落做革蘭氏染色鏡檢。

3.2 藥敏試驗

取100 ul制成的菌液于培養基表面，用涂布棒快速涂覆，以保證培養基的均勻分布。在37 ℃恒溫培養箱中放置3分鐘，將藥敏片整齊地平放在平皿上，藥敏片與平皿內緣之間的間距不得低于13 nm，相鄰兩層之間的間距不得低于24 nm。粘貼完畢后，在標簽上寫上藥敏片名字，然后將平板翻轉，置于37 ℃的溫箱中進行24 h的培養。用游標卡尺測制抑菌圈的直徑，并做好統計。

3.3 PCR檢測

采集病豬血液，加入含抗凝劑的試管，提取DNA進行豬圓環病毒病和非洲豬瘟檢測，反轉錄進行豬藍耳病和豬瘟檢測。以核算為模版，進行PCR擴增，PCR擴增程序（見表1）。

4 結果與分析

（1）細菌學檢查結果。三區接種的血平板上挑取菌落做鏡檢結果該豬分別感染革蘭氏陰性桿菌和革蘭氏陽性球菌（見圖3），確定該豬細菌性感染。

（2）藥敏試驗結果（見表2）。

（3）PCR檢測結果。該病毒經PCR擴增后，凝膠電泳驗證結果豬圓環病毒病檢測為陽性，藍耳、豬瘟、非瘟檢測均為陰性（見圖4）。

綜上所述，根據該病豬臨床癥狀、剖檢病變以及PCR結果最終診斷為豬圓環病毒并發細菌感染。

5 綜合防治措施

5.1 加強日常飼養管理

優良的飼養管理狀況能使豬更好地成長。在這方面要強化飼養管理，主要是通過平時的飼喂和管理來增強豬的免疫力，預防疾病的侵入，降低疾病的發病率。另外，要注意日常的飼養管理，要做到科學喂養，合理搭配，保證豬的生長發育需要的各種營養素和微量元素得到保證，還可以添加一些能夠維持豬只腸道機能的益生菌。應加強對新、斷乳豬群體的監督，以降低該病的發病率。還要對養殖場內的生豬養殖密度進行合理的規劃，確保養殖場內的通風和光照等情況，確保生豬的健康成長。

5.2 強化生物安全

養殖場應保持干凈整潔衛生狀況，及時清理糞便和殘余飼料，定期消毒圈舍衛生環境。嚴格規范的引種。對病情嚴重、無治療價值的患豬及早撲殺并無害化處理^[3]。對有治療價值的患豬及時隔離治療，并由專人管理。對環境進行消毒時優選3 %氫氧化鈉溶液、5 %石灰水等；對空舍進行消毒時優選甲醛、戊二醛噴霧消毒或福爾馬林熏蒸消毒，確保達到最佳消毒效果^[4]。

5.3 免疫預防

預防和控制豬圓環病毒感染的重要環節是疫苗免疫。在日常免疫工作中，要把預防接種工作納入日常免疫計劃。病毒滅活疫苗、嵌合病毒滅活疫苗、亞單位疫苗等是豬圓環病毒病疫苗的主要種類。在接種的過程中，一定要嚴格遵守疫苗接種的步驟，同時要時刻保持生物安全防控的狀態，要嚴格遵循一頭豬一針，在接種疫苗的過程中，要對所要注射的部位進行消毒^[5]。養殖場要嚴格按照免疫規程做好免疫工作，防止出現該病，給養豬業帶來巨大的經濟損失。

5.4 藥物治療

目前還沒有針對豬圓環病毒病的特異性治療藥物。治療的原則是提高患病豬的自身免疫力，防止繼發感染。可以選擇將某些中草藥制劑混合在飼料中，然后喂給患病的豬，這樣可以刺激患病的豬的免疫細胞分泌更多的干擾素，從而提高機體的抗體生成^[6]。對患豬每千克體重肌注頭孢喹肟0.1 mL和黃芪多糖0.1～0.2 mL，同時全群日糧中也做添加，飲水中添加多維和電解質，增強豬群整體的抗病能力。若發生繼發性感染，可考慮混合使用抗生素。

6 討論

豬圓環病毒病的防治要以防為主，養多于防，防治結合，加強生物安全措施和飼養管理，阻斷外來病原的入侵，阻斷病毒的傳染路徑，優化飼養環境，疫苗免疫，才能實現對豬圓環病毒的有效防治。

參考文獻：

[1] 楊世興.安徽省豬圓環病毒病分子流行病學調查[D].安徽農業大學，2006.

[2] 任勇.豬圓環病毒病的流行現狀與防治措施[J].豬業科學，2024，41 （08）：27-29.

[3] 周茂旦.一起斷乳仔豬圓環病毒病的診治報告[J].福建畜牧獸醫，2023，45（02）： 78-79.

[4] 甘科勝.豬圓環病毒病的臨床表現及防治措施[J].鄉村科技，2022，13（22）：103-105.

[5] 曾皓然，喻維維，賀閃閃.豬圓環病毒病的診斷與防治[J].農業技術與裝備，2023，（12）：138-140.

[6] 陳春梅.豬圓環病毒病的診斷及防治方法[J].畜禽業，2023，34（10）：90-92.