氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法快速測定植物油中17種鄰苯二甲酸酯含量

摘 要：本文采用氣相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜結(jié)合多反應(yīng)監(jiān)測模式，建立了一種快速測定植物油中17種鄰苯二甲酸酯的檢測方法。試驗(yàn)采用含飽和正己烷的乙腈超聲提取、低溫冷凍離心方式對前處理?xiàng)l件進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明，17種鄰苯二甲酸酯在20～1 000 μg·L-1線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.995，方法檢出限為1.37～36.8 μg·kg-1。加標(biāo)回收率為85.9%～108.4%，精密度為0.79%～8.30%。該方法前處理簡單快速，回收率和精密度較高，可用于植物油中17種鄰苯二甲酸酯含量的快速測定。

關(guān)鍵詞：氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法；鄰苯二甲酸酯；快速檢測

Abstract： This article uses gas chromatography triple quadrupole tandem mass spectrometry with multi reaction monitoring mode to establish a rapid detection method for 17 phthalates in vegetable oil. The experiment used acetonitrile with saturated n-hexane for ultrasonic extraction and low-temperature freeze centrifugation to optimize the pretreatment conditions. The results showed that there was a good linear relationship between 17 phthalates in the range of 20～1 000 μg·L-1， with correlation coefficients greater than 0.995. The detection limit of the method was 1.37～36.8 μg·kg-1. The recovery rate of spiked samples is 85.9% to 108.4%， and the precision is 0.79% to 8.30%. This method has simple and fast pretreatment， high recovery rate and precision， and can be used for rapid determination of 17 phthalates in vegetable oils.

Keywords： gas chromatography-tandem mass spectrometry; phthalates; rapid detection

鄰苯二甲酸酯是一類常見的脂溶性增塑劑，因其成本較低，常被用于提升材料的延展性和可加工性[1]。植物油中的鄰苯二甲酸酯污染主要源自原料污染、加工過程的引入、包裝材料的增塑劑遷移以及非法添加行為[2]。目前，檢測植物油中鄰苯二甲酸酯的方法主要包括色譜技術(shù)（如液相色譜法、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、氣相色譜法和氣相色譜-質(zhì)譜法）、光譜分析、免疫分析和電化學(xué)檢測等[3]。《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中鄰苯二甲酸酯的測定》（GB 5009.271—2016）中的氣相色譜-質(zhì)譜法（Gas Chromatography-Mass Spectrometry，GC-MS）因其高靈敏度和準(zhǔn)確性而被廣泛采用。該方法的樣品前處理通常涉及使用有機(jī)溶劑進(jìn)行超聲提取，然后通過固相萃取進(jìn)行凈化。但固相萃取柱不僅成本較高，而且操作過程較為煩瑣，容易在過程中引入新的污染。因此，本試驗(yàn)旨在建立一種簡便、高效，且能準(zhǔn)確測定食用油中常見的17種鄰苯二甲酸酯的檢測方法，該方法采用的氣相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)相較于傳統(tǒng)的氣相色譜-質(zhì)譜技術(shù)，具有更高的靈敏度和更強(qiáng)的抗干擾能力，可以有效減少樣品基質(zhì)干擾，從而提高檢測的準(zhǔn)確性和

可靠性。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

日常檢測中收集的陰性空白樣本（山茶油）；植物油樣本44份，市售。

17種鄰苯二甲酸酯混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（1 000 μg·mL-1），包括鄰苯二甲酸二甲酯（DMP）、鄰苯二甲酸二乙酯（DEP）、鄰苯二甲酸二烯丙酯（DAP）、鄰苯二甲酸二異丁酯（DIBP）、鄰苯二甲酸二正丁酯（DBP）、鄰苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯（DMEP）、鄰苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯（BMPP）、鄰苯二甲酸二（2-乙氧基）乙酯（DEEP）、鄰苯二甲酸二戊酯（DPP）、鄰苯二甲酸二己酯（DHXP）、鄰苯二甲酸丁基芐基酯（BBP）、鄰苯二甲酸二（2-丁氧基）乙酯（DBEP）、鄰苯二甲酸二環(huán)己酯（DCHP）、鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）、鄰苯二甲酸二苯酯（DPHP）、鄰苯二甲酸二正辛酯（DNOP）和鄰苯二甲酸二壬酯（DNP），天津阿爾塔；正己烷、乙腈，均為色譜純，上海安譜。

1.2 儀器與設(shè)備

TQ-8050NX氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀，島津；BSA124S萬分位電子分析天平，賽多利斯；WADS-1018超聲提取儀，鑫萬德盛；IKA VORTEX 3渦旋振蕩儀，IKA；H1850R冷凍離心機(jī)，湘儀。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

取100 μL17種鄰苯二甲酸酯的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（1 000 μg·mL-1）于10 mL容量瓶，用正己烷定容，配制溶液的濃度為10 μg·mL-1。再用正己烷逐級稀釋成濃度分別為20 μg·L-1、50 μg·L-1、100 μg·L-1、200 μg·L-1、500 μg·L-1和1 000 μg·L-1的標(biāo)準(zhǔn)系列工作液。

1.3.2 試樣前處理

準(zhǔn)確稱取2.5 g食用植物油樣品于15 mL玻璃離心管中，加入10 mL含飽和正己烷的乙腈，渦旋1 min，超聲提取20 min后，置于-20 ℃冰箱中冷凍20 min，于-5 ℃冷凍離心機(jī)中，以2 000 r·min-1離心5 min。離心后的上清液轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣瓶中，上機(jī)檢測。

1.3.3 色譜條件

SH-I-5Sil MS毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）。柱溫程序：初始柱溫60 ℃，保持1 min，以20 ℃·min-1升至220 ℃，保持1 min，再以5 ℃·min-1升至250 ℃，保持1 min，再以20 ℃·min-1升至290 ℃，保持6 min；載氣：高純氮；流速：1.0 mL·min-1；進(jìn)樣口溫度：260 ℃；不分流進(jìn)樣模式；進(jìn)樣量：1 μL。

1.3.4 質(zhì)譜條件

電子轟擊電離源；電離能量：70 eV；離子源溫度：230 ℃；傳輸線溫度：280 ℃；溶劑延遲：6 min；監(jiān)測方式：多反應(yīng)監(jiān)測模式。17種鄰苯二甲酸酯多反應(yīng)監(jiān)測模式掃描離子參數(shù)見表1。

2 結(jié)果與分析

2.1 前處理?xiàng)l件的優(yōu)化

植物油經(jīng)過乙腈超聲提取處理后，通常會(huì)有一部分油脂溶解于乙腈中，這可能會(huì)干擾后續(xù)的色譜分析。本實(shí)驗(yàn)以乙腈溶液、添加飽和正己烷的乙腈溶液作為提取溶劑，以提取后常溫離心（常溫下以2 000 r·min-1的轉(zhuǎn)速離心5 min）和低溫冷凍離心（-20 ℃冰箱中冷凍20 min，于-5 ℃冷凍離心機(jī)中，以2 000 r·min-1的轉(zhuǎn)速離心5 min）為離心方式，考察不同提取溶劑和離心方式對17種鄰苯二甲酸酯回收率的影響。由表2可知，以添加飽和正己烷的乙腈溶液作為提取溶劑，結(jié)合低溫冷凍離心方式回收效果較好。原因可能是在乙腈中加入飽和正己烷可以有效促進(jìn)油脂的溶解。而采用低溫冷凍離心的方法可以進(jìn)一步加速油脂與溶劑的分離過程，使乙腈層變得澄清透明，從而減少了復(fù)雜基質(zhì)對結(jié)果的干擾[4]。

2.2 方法學(xué)驗(yàn)證

2.2.1 方法線性方程和檢出限

取1.3.1配制的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)行測定，以峰面積為縱坐標(biāo)，質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，以3倍信噪比確定檢出限。由表3可知，17種鄰苯二甲酸酯在20～1 000 μg·L-1線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.995；17種鄰苯二甲酸酯的檢出限為1.37～36.8 μg·kg-1，能夠滿足鄰苯二甲酸酯的檢測要求。

2.2.2 方法回收率和精密度

向陰性空白樣品中分別添加0.3 mg·kg-1（低水平）、0.6 mg·kg-1（中水平）和1.5 mg·kg-1（高水平）3個(gè)濃度的17種鄰苯二甲酸酯混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)行6次平行實(shí)驗(yàn)，按照1.3.2對樣品進(jìn)行前處理，再上機(jī)檢測，計(jì)算加標(biāo)回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，并進(jìn)行對比分析。由表4可知，在3個(gè)濃度添加水平下，樣品的平均回收率在85.9%～108.4%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（Relative Standard Deviation，RSD）在0.79%～8.30%，結(jié)果表明本方法的精密度和回收率符合《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測》（GB/T 27404—2008）要求[5]。

2.3 實(shí)際樣品測定

運(yùn)用本實(shí)驗(yàn)建立的方法對市售44個(gè)不同品種植物油樣品中的17種鄰苯二甲酸酯進(jìn)行檢測分析。結(jié)果顯示，DBP和DEHP檢出率較高，分別為68.18%和79.55%，DMP檢出率為2.27%，其余均未檢出。表明本方法適用于植物油中17種鄰苯二甲酸酯的檢測分析，且食品監(jiān)管機(jī)構(gòu)需加強(qiáng)對植物油的安全風(fēng)險(xiǎn)防控。

3 結(jié)論

本試驗(yàn)利用氣相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜結(jié)合多反應(yīng)監(jiān)測模式，建立了一種高效、快速測定植物油中17種鄰苯二甲酸酯的檢測方法。對前處理流程進(jìn)行簡化，即采用含飽和正己烷的乙腈超聲提取，并結(jié)合低溫冷凍離心。方法學(xué)驗(yàn)證結(jié)果表明，17種鄰苯二甲酸酯在20～1 000 μg·L-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.995，方法檢出限為1.37～

36.8 μg·kg-1，加標(biāo)回收率為85.9%～108.4%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.79%～8.30%。表明本方法精密度和準(zhǔn)確度較高，適用于植物油中17種鄰苯二甲酸酯的檢測分析，為提高檢測效率，降低時(shí)間和試驗(yàn)材料成本提供依據(jù)，為食品質(zhì)量安全檢測提供技術(shù)支撐。

參考文獻(xiàn)

[1]趙立群，石金娥，張寧，等.2018年吉林省部分地區(qū)市售食用植物油產(chǎn)品中塑化劑含量的檢測結(jié)果分析[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào)，2019，10（6）：1465-1469.

[2]曾琴，張晶晶，李聰，等.植物油中鄰苯二甲酸酯來源和檢測研究進(jìn)展[J/OL].中國油脂，1-13[2024-06-20].https：//doi.org/10.19902/j.cnki.zgyz.1003-7969.230212.

[3]向成艷，唐曉倩，張奇，等.食品中鄰苯二甲酸酯類塑化劑檢測技術(shù)研究進(jìn)展[J].中國油料作物學(xué)報(bào)，2023，45（5）：1073-1081.

[4]潘曉玉，趙逸涵，王宗義，等.冷凍脫脂HPLC測定食用植物油中4種多環(huán)芳烴[J].北京農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)，2022，37（2）：113-116.

[5]中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局，中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì).實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測：GB/T 27404—2008[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2008.