姬松茸干制品中苯甲酸天然本底研究

摘 要：目的：分析檢測姬松茸干制品中苯甲酸天然本底值，為科學有效監督苯甲酸使用情況及制定相關的國家或行業標準提供依據。方法：采集不同地區的姬松茸干制品50批次，依據《食品安全國家標準 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測定》（GB 5009.28—2016）采用液相色譜法檢測苯甲酸含量。結果：41批次姬松茸干制品檢出苯甲酸，檢測值在0.084～0.718 g·kg-1，平均值為0.408 g·kg-1。結論：檢出苯甲酸的姬松茸干制品在生產流通過程均未人為主動添加苯甲酸，證明了姬松茸干制品中存在天然苯甲酸。

關鍵詞：姬松茸干制品；苯甲酸；天然本底值；食品添加劑；高效液相色譜

Abstract： Objective： To analyze and detect the natural background value of benzoic acid in dried Agaricus blazei， so as to provide a basis for scientific and effective supervision of the use of benzoic acid and the formulation of relevant national or industry standards. Method： Fifty batches of dried Agaricus blazei from different regions were collected， and the benzoic acid content was detected by liquid chromatography according to the GB 5009.28—2016. Result： Benzoic acid was detected in 41 batches of dried Agaricus blazei， with the detection values ranging from 0.084 g·kg-1 to 0.718 g·kg-1， and the average value was 0.408 g·kg-1. Conclusion： The dried Agaricus blazei with benzoic acid detected were not artificially added with benzoic acid during the production and circulation process， which proved that natural benzoic acid existed in dried Agaricus blazei.

Keywords： dried Agaricus blazei; benzoic acid; natural background value; food additive; high performance liquid chromatography

苯甲酸是一種芳香族羧酸，分子式為C7H6O2，具有芳香性及羧酸的性質[1]。在食品領域，苯甲酸是一種常見的防腐劑，依據《食品安全國家標準 食品添加劑使用標準》（GB 2760—2014），苯甲酸被允許限量應用在20余種食品類別中，姬松茸干制品并未列入其中，說明不允許在姬松茸干制品中添加苯甲酸[2]。然而，實際生產中，紅棗、蜂蜜、牛乳、豆豉和黃酒等多類食品中含有天然苯甲酸的情況已被行業熟知[3-6]。姬松茸干制品中可能存在天然苯甲酸的情況卻鮮為人知，亦有部分企業生產經營的姬松茸干制品在監督抽檢中檢出苯甲酸，被誤認為人為添加而遭到處罰。因此，只有準確檢測姬松茸干制品中天然苯甲酸的含量，才能進一步判斷與辨別姬松茸干制品中的苯甲酸是人為添加還是天然含有，為國家或行業標準的修改和制定提供科學依據，促進姬松茸產業鏈條的高質量發展。

1 材料與方法

1.1 樣本采集

對我國姬松茸主產區進行調查，從福建、云南、貴州、河南和廣西等產量較高的幾個地區采購姬松茸樣本50批次，每批次至少500 g。采購的樣品覆蓋不同品質和價位，確保不含任何添加物，使樣品具有代表性。

1.2 儀器與試劑

1200高效液相色譜儀，配二極管陣列檢測器，安捷倫；BSA223S分析天平，北京賽多利斯科學儀器有限公司；MS200渦旋振蕩器，杭州瑞誠儀器有限公司；GT10-1離心機，河北醫眾醫療器械有限公司；KH-500SP超聲儀，昆山禾創超聲儀器有限公司；亞鐵氰化鉀、乙酸鋅、甲醇、乙酸銨，均為色譜純。

1.3 實驗方法

1.3.1 樣品處理

樣品制備、試樣提取均參考《食品安全國家標準 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測定》（GB 5009.28—2016）第一法高效液相色譜法[7]。

1.3.2 色譜條件

色譜柱：Agilent Eclipse Plus C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相：甲醇+0.77 g·L-1乙酸銨（10+90，V/V）；流速：1.000 mL·min-1；檢測波長：230 nm；進樣量：5 μL。

1.3.3 標準曲線繪制

參考《食品安全國家標準 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測定》（GB 5009.28—2016）第一法高效液相色譜法，取苯甲酸標準溶液適量，配制成濃度分別為1.0 mg·L-1、5.0 mg·L-1、10.0 mg·L-1、20.0 mg·L-1、50.0 mg·L-1、100.0 mg·L-1和200.0 mg·L-1的混合標準工作溶液[7]。在波長230 nm處測定，以濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標繪制標準曲線。

2 結果與分析

2.1 方法驗證

在1.0～200.0 mg·L-1，苯甲酸標準溶液濃度與峰面積的線性關系良好，線性回歸方程為y=3 763.6x+0.698，R2=0.999 9。苯甲酸的檢出限為0.005 g·kg-1；在0.010 g·kg-1、0.050 g·kg-1、0.200 g·kg-1加標水平下的回收率在96%～98%，滿足《實驗室質量控制規范 食品理化檢測》（GB/T 27404—2008）回收率的要求[8]。

2.2 姬松茸干制品中苯甲酸的結果分布

2.2.1 姬松茸干制品中苯甲酸含量分布

對50批次姬松茸干制品進行檢測，以每0.1 g·kg-1為一個區間，分析樣品苯甲酸含量數據分布，見圖3。在50批次姬松茸干制品樣本中，天然苯甲酸含量最高值為0.718 mg·kg-1，最低值為0.084 mg·kg-1；有31份樣本天然苯甲酸含量在0.2～0.5 g·kg-1，占檢測總樣本量的62%；有9份樣本未檢出苯甲酸，或者是低于檢出限0.00 5 g·kg-1，占檢測總樣本量的18%。

2.2.2 不同地區姬松茸干制品檢出苯甲酸情況

采購的50批次樣本分別來自福建、云南、貴州、河南、廣西5個姬松茸主產省份（自治區），每個產地采購10批次，檢出率分別為90%、90%、70%、80%、80%，見圖4。

2.2.3 不同地區姬松茸干制品中苯甲酸含量分布

福建姬松茸干制品苯甲酸檢出值在0.278～0.711 g·kg-1，平均值為0.461 g·kg-1；云南姬松茸干制品苯甲酸檢出值在0.366～0.718 g·kg-1，平均值最高，為0.503 g·kg-1；貴州姬松茸干制品苯甲酸檢出值在0.233～0.491 g·kg-1，平均值為0.411 g·kg-1；河南姬松茸干制品苯甲酸檢出值在0.084～0.194 g·kg-1，平均值最低，為0.318 g·kg-1；廣西姬松茸干制品苯甲酸檢出值在0.242～0.472 g·kg-1，平均值為0.328 g·kg-1。具體數值分布見表1。

2.3 姬松茸干制品中苯甲酸來源分析

調研中了解到姬松茸種植使用的原料為玉米芯、秸稈、蔗渣、牛糞、石膏和石灰，姬松茸生產工藝為原料有氧發酵→二次發酵→播種→發菌→覆土→出菇→采收→切腳→清洗→烘干→分選包裝→陰涼干燥儲存[9]。原料發酵、種植、采收、干燥和貯存過程均未使用苯甲酸及其鈉鹽，故姬松茸干制品中檢出苯甲酸可能是內源性因素造成的。研究發現，天然苯甲酸主要有兩種來源：植物生長過程中，次級代謝反應生成苯甲酸[10]；微生物代謝反應生成苯甲酸[11]。例如，馬尿酸水解、苯丙氨酸經微生物降解、苯甲醛氧化均可形成苯甲酸。

對于苯甲酸及其衍生物在植物體內的合成方法，科學界如今還沒有明確一致的結論。目前，主要有兩種推測：苯丙氨酸經一系列酶催化形成苯甲酸及其衍生物；莽草酸轉化成苯甲酸及其衍生物。雖然發現姬松茸干制品中存在天然苯甲酸，但是苯甲酸的生成方式和作用機理還未知，尚待進一步研究與開發。

3 結論

本文采集產自5個省份（自治區）的50批次姬松茸干制品樣本，檢測苯甲酸含量，結合實驗數據、2024年版《全國食品安全監督抽檢實施細則》（以姬松茸為主要原料的產品不檢測苯甲酸）以及相關參考文獻資料得出姬松茸干制品中檢出的苯甲酸為天然生成，排除了人為添加苯甲酸的可能。50批次姬松茸干制品中檢出天然苯甲酸的本底值均小于1.0 g·kg-1。其中，云南省生產的姬松茸干制品苯甲酸平均含量最高，為0.503 g·kg-1，檢出率也最高，為90%。姬松茸干制品檢出的苯甲酸本底值普遍在0.2～0.5 g·kg-1。本研究結果為姬松茸干制品中苯甲酸限量標準的制定提供了參考依據。

參考文獻

[1]呂娜.食品防腐劑苯甲酸鈉的毒理學研究[D].長春：吉林農業大學，2006.

[2]國家衛生健康委員會，國家市場監督管理總局.食品安全國家標準 食品添加劑使用標準：GB 2760—2024[S].北京：中國標準出版社，2024.

[3]李曉，李媛，張建成，等.陜西紅棗中苯甲酸的本底值分析[J].現代食品科技，2022，38（4）：254-259.

[4]李曉，李媛，安瑜，等.陜西紅棗中天然苯甲酸的測定及研究[J].食品與發酵工業，2020，46（19）：217-221.

[5]唐文強，劉長海.豆豉中天然苯甲酸的生成途徑研究[J].廣東農業科學，2011，38（17）：79-80.

[6]李浩哲.杏仁罐頭不同儲藏時間本底苯甲酸含量的測定[J].檢驗檢疫學刊，2020，30（3）：62-64.

[7]國家衛生和計劃生育委員會，國家食品藥品監督管理總局.食品安全國家標準 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測定：GB 5009.28—2016[S].北京：中國標準出版社，2016.

[8]國家質量監督檢驗檢疫總局，中國國家標準化管理委員會.實驗室質量控制規范 食品理化檢測：GB/T 27404—2008[S].北京：中國標準出版社，2008.

[9]馬曉青.姬松茸針葉林下種植栽培技術研究[J].種子科技，2024，42（5）：70-72.

[10]唐文強，劉長海.天然苯甲酸生物合成機制的研究進展[J].中國調味品，2011，36（8）：12-15.

[11]張青云，姜竹茂.食品中天然苯甲酸的溯源分析及本底調查[J].中國食品添加劑，2020，31（2）：178-181.