氣相色譜-質譜法測定雞肉中多種農藥殘留

摘 要：目的：建立氣相色譜-質譜法測定雞肉中15種農藥殘留的方法。方法：樣品經乙腈提取，凝膠色譜儀凈化，SH-RXi-5Sil MS毛細管柱分離，氣相色譜-質譜法檢測，內標法定量。結果：15種農藥殘留在0.04～2.00 μg·mL-1線性關系良好，相關系數R2均大于0.998。方法檢出限為0.002 0～0.008 6 mg·kg-1，定量限為0.005 6～0.018 0 mg·kg-1，加標回收率為76.4%～93.5%，相對標準偏差為0.4%～9.3%。結論：該方法準確度高、精密度好，適用于同時測定雞肉中多種農藥殘留。

關鍵詞：農藥殘留；雞肉；氣相色譜-質譜法

Abstract： Objective： To establish a method for the determination of 15 pesticide residues in chicken by gas chromatography-mass spectrometry. Method： The samples were extracted with acetonitrile， cleaned up by gel chromatography， separated by SH-RXi-5Sil MS capillary column， detected by gas chromatography-mass spectrometry， and quantified by internal standard method. Result： The 15 pesticide residues had a good linear relationship in the range of 0.04～2.00 μg·mL-1， and the correlation coefficient R2 was greater than 0.998. The detection limit of the method was 0.002 0～0.008 6 mg·kg-1， the limit of quantification was 0.005 6～0.018 0 mg·kg-1， the spiked recovery was 76.4%～93.5%， and the relative standard deviation was 0.4%～9.3%. Conclusion： This method has high accuracy and good precision， and is suitable for the simultaneous determination of multiple pesticide residues in chicken.

Keywords： pesticide residue; chicken; gas chromatography-mass spectrometry

不當使用農藥產生的農藥殘留及其代謝物會通過食物鏈傳遞給動物，對人體健康構成潛在威脅。氣相色譜-質譜法（Gas Chromatography-Mass Spectrometry，GC-MS）適用于動物源性農藥殘留的檢測，且檢測結果相比于氣相色譜法更加精確[1]。

在測定肉雞中農藥殘留時，油脂、蛋白質等雜質干擾較大，且會污染進樣口及色譜柱。基于此，本文通過凝膠滲透色譜儀去除油脂、色素等大分子物質[2-5]，采用氣相色譜-質譜聯用儀測定。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

TQ8040氣質聯用儀，島津；J2 Preplinc Platform凝膠色譜儀，北京普利泰；420R冷凍高速離心機，Hettich；heidolph自動渦旋混合器，海道夫；TXB622L電子天平，SHIMADZU；RA8旋轉蒸發儀，海道夫。

乙腈、丙酮、環己烷、乙酸乙酯，均為色譜純；氯化鈉、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀，均為分析純；NaCl飽和2 mmol·L-1磷酸緩沖溶液；15種農藥對照品標準溶液和環氧七氯B（100 μg·mL-1）標準溶液，均來源于農業農村部環境保護科研監測所。

1.2 實驗方法

1.2.1 樣品的制備及保存

隨機取新鮮的雞胸肉樣品切成小塊，用高速絞肉機均質混勻，置于-18 ℃條件下保存。

1.2.2 樣品前處理

（1）提取。準確稱取5.00 g樣品，置于50 mL離心管中，加入5 mL純水，均質混勻5 min，加入20 mL乙腈，4 g氯化鈉，均質混勻6 min，取上清液10 mL，用NaCl飽和2 mmol·L-1磷酸緩沖溶液調pH值至中性，在40 ℃水浴條件下旋轉濃縮至近干，加入10 mL乙酸乙酯-環己烷（1∶1，V/V）復溶，作為待凈化液。

（2）凈化。取上述待凈化液置于凝膠色譜儀（Gel Permeation Chromatography，GPC）上凈化，以乙酸乙酯-環己烷（1∶1，V/V）為流動相，控制流速為5 mL·min-1，收集15～25 min時間段的洗脫液于雞心瓶中，在40 ℃水浴條件下旋轉濃縮至近干，加入2 mL丙酮溶液復溶，加入40 μL內標溶液，過0.22 μm微孔濾膜，用于氣相色譜-質譜測定，內標法定量。

1.2.3 儀器條件

（1）色譜條件。色譜柱：SH-RXi-5Sil MS毛細管柱（30.0 m×0.25 mm，0.25 μm）；進樣口溫度：280 ℃；進樣量：1 μL；進樣方式：不分流進樣。柱溫箱升溫程序：初始溫度60 ℃，保持1 min；25 ℃·min-1升溫至210 ℃，保持3 min；30 ℃·min-1升溫至300 ℃，保持3 min。

（2）質譜條件。接口溫度：280 ℃；離子源溫度：280 ℃；電子轟擊源：70 eV；溶劑延遲時間：3 min；掃描模式：多反應監測；其他質譜參數見表1。

1.2.4 標準工作曲線的繪制

將15種農藥對照品溶液用丙酮配制成濃度為10 μg·mL-1的混合標準儲備液，將環氧七氯B配制成濃度為5 μg·mL-1的內標溶液。將混合標準儲備液用丙酮進一步稀釋配制成濃度為0.04 μg·mL-1、0.10 μg·mL-1、0.20 μg·mL-1、0.50 μg·mL-1、1.00 μg·mL-1和2.00 μg·mL-1的標準系列溶液（現配現用），按標準溶液定容體積，加入5 μg·mL-1的環氧七氯B內標溶液，使標準溶液內標濃度為0.1 μg·mL-1，配制標準工作曲線。

2 結果與分析

2.1 樣品前處理條件優化

2.1.1 提取溶劑的選擇

通過實驗考察乙腈與丙酮的提取效果，發現丙酮與水有較好的互溶性，旋蒸步驟較難蒸干，只能旋蒸過后采用氮吹至近干，由于步驟煩瑣，吹干時間過長，導致回收率僅為31.7%～52.9%；乙腈提取的回收率可達到78.3%～99.4%。因此，本次實驗采用乙腈作為提取溶劑。

2.1.2 凈化方法的選擇

本次實驗考察了僅用SPE凈化柱凈化、用GPC儀凈化后再用石墨化碳黑-氨基復合固相萃取柱凈化、僅用GPC凈化后就用丙酮復溶的提取效果。結果顯示，用GPC儀凈化后再用石墨化碳黑-氨基復合固相萃取柱凈化的回收率為42.4%～54.6%，僅用SPE凈化柱凈化的回收率為39.6%～50.9%，僅用GPC儀凈化的回收率為83.6%～101.2%。因此，本次實驗采用GPC儀凈化后直接用丙酮復溶上機測定。

2.2 線性范圍、檢出限及定量限

如表2所示，各種農藥在0.04～2.00 μg·mL-1濃度范圍內線性關系良好，相關系數R2均大于0.998。稀釋混合標準溶液添加到樣品，按上述方法進行檢測，按信噪比為3確定檢出限，信噪比為10確定為定量限。經多次實驗，得到15種農藥殘留的方法檢出限為0.002 0～0.008 6 mg·kg-1，方法定量限為0.005 6～0.0180 mg·kg-1。

2.3 回收率和精密度

準確稱取5.00 g空白雞肉9份，分別置于50 mL離心管中，分別添加濃度為0.2 μg·mL-1、0.4 μg·mL-1、1.0 μg·mL-1的混合標準工作液，每個濃度點做3個樣，用于GC-MS測定，計算回收率，結果見表3。加標回收率為76.4%～93.5%，相對標準偏差為0.4%～9.3%，滿足實驗標準要求。

2.4 樣品檢測結果

在百色市各農貿市場隨機抽取50份雞肉樣品，采用本實驗方法進行15種農藥殘留檢測。結果顯示，有1批樣品檢出氟蟲腈，檢出結果為0.012 mg·kg-1；有1批樣品檢出毒死蜱，檢出結果為0.007 8 mg·kg-1；其余48批均未檢出農藥殘留。

3 結論

通過改進提取方法，有效去除樣品多余雜質，減少對目標物的干擾，本文建立了氣相色譜-質譜法測定雞肉中15種農藥殘留的方法。該方法具有樣品前處理過程操作簡單、靈敏度高等特點，回收率及精密度均能達到日常檢測的基本要求，適用于肉雞中多種常見農藥殘留的檢測。

參考文獻

[1]劉潤珠，王松，崔鶴，等.牛肉和豬肉基質中多農藥殘留GCMS分析方法[J].食品研究與開發，2013，34（22）：25-28.

[2]韋鳳棲，莫靜波.食品中農藥殘留檢測的樣品前處理技術進展[J].中國衛生檢驗雜志，2012，22（3）：678-680.

[3]李君君，李力軍，徐惠誠，等.動物源性食品中農藥多殘留檢測前處理技術研究進展[J].中國食品衛生雜志，2012，24（4）：403-407.

[4]趙秋，鄭志雯，張崢，等.氣相色譜法測定魚和肉中有機磷農藥殘留量[J].理化檢驗（化學分冊），2004（3）：150-152.

[5]杰夫，初春.凝膠色譜凈化系統用于測定牛肉樣品中有機氯農藥殘留[C]//西北地區第七屆色譜學術報告會甘肅省第十二屆色譜年會論文集.蘭州：甘青寧色譜協作中心，2012：204-206.

作者簡介：黃彩鳳（1984—），女，壯族，廣西百色人，在職碩士，主管藥師。研究方向：食品藥品檢驗。

通信作者：王雙婁（1994—），女，壯族，云南廣南人，本科。研究方向：食品檢驗。E-mail： 851235233@qq.com。