段祥凱,陳紅躍
1. 河南中醫藥大學第二臨床醫學院,河南 鄭州 450000
2. 河南中醫藥大學第二附屬醫院甲乳外科,河南 鄭州 450000
甲狀腺癌屬于常見的內分泌惡性腫瘤,臨床中甲狀腺乳頭狀癌(PTC)最為常見[1]。國際流行病學報告顯示,女性患甲狀腺癌的概率是男性的3 至4 倍,女性性激素,尤其是雌激素在甲狀腺癌的發展過程中起到了重要作用[2]。雌激素通過其受體ERα、ERβ發揮作用,ERα 大多促進惡性腫瘤細胞的增殖,與之相反,ERβ 通常抑制惡性腫瘤細胞的生長[3]。熊果酸是中藥夏枯草的提取物之一,具有廣泛的藥理學作用,如抗炎、抗氧化、抗病毒等[4-5]。隨著近年對中醫藥更為深入的探索,熊果酸在抗腫瘤方面也表現出了巨大的應用前景,如甲狀腺癌、結腸癌、肝癌、前列腺癌等[6]。目前,熊果酸在PTC 發展進程中的作用機制尚不明確。本研究觀察熊果酸對甲狀腺癌BCPAP細胞生物學的影響及具體作用機制。
1.1 實驗材料與試劑胎牛血清、RPMI 1640 培養基、胰蛋白酶溶液(Biological 公司),RIPA 組織裂解液、PMSF(索萊寶公司)。CCK-8 試劑盒(上海同仁公司),蛋白電泳凝膠制備盒(陜西中暉赫彩公司)。ERα、ERβ 抗體(武漢三鷹公司)。Transwell 小室(美國Corning 公司)。甲狀腺癌BCPAP 細胞:人甲狀腺乳頭狀癌細胞(賽百慷公司);Nthy-ori3-1 細胞:人甲狀腺正常細胞株(北京北納生物技術研究院);熊果酸(索萊寶公司)。
1.2 細胞培養甲狀腺癌BCPAP 細胞,采用含10%胎牛血清的RPMI 1640 培養液進行培養,置于37 ℃、5%CO2及飽和濕度細胞培養箱內,待細胞生長至對數期時,收集細胞用于后續實驗。
1.3 熊果酸配置稱取25 mg 熊果酸粉劑,加入到1 mL DMSO內進行溶解。……