巨細胞病毒、EB病毒感染與兒童SLE疾病活動度的關系

曹佳璐，張德，李娜，荊會娟

1 聊城市第二人民醫院檢驗科，山東聊城 252600；2 聊城市第二人民醫院小兒內科

兒童系統性紅斑狼瘡（SLE）是一種可累及多臟器、多系統的自身免疫性疾病，其發病機制非常復雜，與遺傳因素、環境因素以及感染因素等密切相關［1］。巨細胞病毒（CMV）和EB 病毒（EBV）是兩種常見的皰疹病毒科病毒。近年研究發現，CMV、EBV感染與自身免疫性疾病的發生、發展有著密切聯系［2］。CMV、EBV均可激活機體內T淋巴細胞和B淋巴細胞，引起免疫炎癥反應并產生一系列炎癥因子和自身抗體，還能引起機體免疫耐受異常，進而促進自身免疫炎癥反應發生。因此，CMV、EBV 感染可能在SLE 的病理生理過程中起著重要作用［3］。有研究發現，SLE 患者CMV、EBV 感染率顯著增加，CMV、EBV 感染后可引起機體外周血CD8+細胞比例增加、CD4+與CD8+比值倒置，從而促進SLE 的發生、發展［4］。但目前CMV、EBV 感染與兒童SLE 疾病活動度的關系鮮有報道。鑒于此，本研究探討了CMV、EBV 感染與兒童SLE 疾病活動度的關系。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2021 年1 月—2023 年1 月聊城市第二人民醫院小兒內科收治的SLE 患兒98 例（觀察組）。兒童SLE 診斷依據《中國兒童系統性紅斑狼瘡診斷與治療指南》［5］。納入標準：①符合SLE 診斷標準；②年齡＜14 歲；③認知功能正常，治療依從性好；④臨床病歷資料完整。排除標準：①合并其他嚴重結締組織疾病者；②合并重要臟器嚴重功能不全者；③合并嚴重血液系統疾病者；④合并惡性腫瘤者；⑤合并先天性疾病者；⑥合并結核病者。其中，男48 例、女50 例，年齡3～10（6.69 ±1.33）歲；初發且入院前未接受任何治療43 例，已使用激素或免疫抑制劑正規療程治療至少1 年且病情穩定55 例。同期另選在聊城市第二人民醫院門診體檢健康的兒童100 例（對照組），男53 例、女47 例，年齡4～10（7.03 ± 1.45）歲。兩組性別、年齡具有可比性。本研究經聊城市第二人民醫院倫理委員會審核通過（批件編號：2023-03-012），所有患兒監護人對本研究知情并簽署書面知情同意書。

1.2 實驗室檢查 觀察組入院次日，對照組體檢當日，采集清晨空腹外周靜脈血10 mL，1 000 × g 離心10 min，留取上層血清，-80 ℃保存。采用ELISA 法檢測CMV-IgM、抗核小體抗體（ANuA）、抗雙鏈DNA（ds-DNA）抗體、抗β2糖蛋白1（β2-GP1）抗體，采用直接法行Coombs實驗，采用魏氏法檢測紅細胞沉降率（ESR），采用速率散射比濁法檢測補體C3，采用CytoFLEX S流式細胞儀檢測CD23，采用實時熒光定量PCR儀檢測EBV DNA。

1.3 SLE 疾病活動度評價 SLE 患兒入院次日評估SLE疾病活動指數（SLEDAI）。SLEDAI 0～4分表示基本無活動，5～9 分表示輕度活動，10～14 分表示中度活動，≥15分表示重度活動［6］。

1.4 統計學方法 采用SPSS23.0 統計軟件。符合正態分布的計量資料以xˉ ±s表示，結果比較采用獨立樣本t檢驗。計數資料比較采用χ2檢驗。相關性分析采用Spearman 或Pearson 相關分析法。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組CMV-IgM、EBV DNA陽性率比較 觀察組與對照組CMV-IgM 陽性率分別為27.55%（27/98）、4.00%（4/100），EBV DNA 陽性率分別為26.53%（26/98）、11.00%（11/100）。觀察組CMV-IgM、EBV DNA 陽性率均高于對照組（χ2分別為20.789、7.857，P均＜0.05）。

2.2 SLE患兒初發者與穩定者CMV-IgM、EBV DNA陽性率比較 SLE患兒初發者與穩定者CMV-IgM陽性率分別為13.95%（6/43）、38.18%（21/55），EBV DNA 陽性率分別為44.19%（19/43）、87.27%（48/55）。SLE 患兒初發者CMV-IgM 陽性率低于其穩定者（χ2=7.097，P＜0.05），EBV DNA 陽性率高于其穩定者（χ2=12.253，P＜0.05）。

2.3 SLE 患兒CMV-IgM 陽性者與陰性者疾病活動相關指標比較 見表1、2。

表1 SLE患兒CMV-IgM陽性者與陰性者ESR、補體C3、SLEDAI比較（± s）

表1 SLE患兒CMV-IgM陽性者與陰性者ESR、補體C3、SLEDAI比較（± s）

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表2 SLE患兒CMV-IgM陽性者與陰性者ANuA、抗ds-DNA抗體、抗β2-GP1抗體及Coombs實驗和CD23陽性率比較［例（%）］

2.4 SLE 患兒EBV DNA 陽性者與陰性者疾病活動相關指標比較 見表3、4。

表3 SLE患兒EBV DNA陽性者與陰性者ESR、補體C3、SLEDAI比較（xˉ ± s）

表4 SLE患兒EBV DNA陽性者與陰性者ANuA、抗ds-DNA抗體、抗β2-GP1抗體及CD23陽性比較［例（%）］

2.5 SLE 患兒CMV-IgM、EBV DNA 陽性與疾病活動相關指標的關系 SLE 患兒CMV-IgM 陽性與ESR、SLEDAI以及ANuA、抗ds-DNA 抗體、抗β2-GP1抗體、CD23 陽性均呈正相關關系（r分別為0.601、0.524、0.519、0.554、0.618、0.573，P均＜0.05），與補體C3 呈負相關關系（r=-0.533，P＜0.05）；SLE 患兒EBV DNA 陽性與ESR、SLEDAI 以及ANuA、抗ds-DNA 抗體、抗β2-GP1 抗體、CD23 陽性均呈正相關關系（r分別為0.526、0.612、0.591、0.538、0.464、0.587，P均＜0.05），與補體C3 呈負相關關系（r=-0.479，P＜0.05）。

3 討論

SLE 是一種常見的自身免疫性疾病，約20%在兒童期發病，典型癥狀包括對稱性頰部蝶形紅斑及不同程度關節疼痛、腫脹、發熱等［7］。兒童SLE 機體存在嚴重的免疫功能紊亂，以淋巴細胞異常凋亡、B淋巴細胞功能亢進、T淋巴細胞功能失調以及多種自身抗體異常表達為主要特征［8］。SLE 的發病機制非常復雜，與遺傳因素、環境因素以及感染因素等密切相關［1］。普遍認為，SLE 的發生與多種病原體感染密切相關，如CMV、EBV、皰疹病毒等。有研究報道，CMV、EBV 感染可能通過調控細胞免疫、影響細胞因子分泌等途徑參與SLE 的發生和發展［9］。但現階段兒童SLE 的發生與CMV、EBV 感染的關系尚不完全清楚，仍需進一步探索。

CMV 是一種雙鏈DNA 病毒，屬于皰疹病毒科。CMV 能夠攻擊多種靶細胞，如上皮細胞、神經細胞、內皮細胞等［10］。近年研究發現，CMV 感染可引起機體外周血CD8+細胞比例增加、CD4+與CD8+比值倒置，從而在SLE 的病理生理過程中發揮重要作用［3-4］。但目前CMV 感染與兒童SLE 疾病活動度的關系鮮有報道。本研究結果顯示，觀察組CMV-IgM陽性率顯著高于對照組，說明在兒童SLE 中CMV 感染率較高，并且SLE 患兒初發者CMV-IgM 陽性率低于其穩定者，這可能與初發SLE 患兒體內免疫系統尚未完全激活，病原體可能處于活動感染期有關。究其原因，SLE 的發生、發展與淋巴細胞異常凋亡及其亞群失調有關，而CMV 感染亦可引起機體類似的免疫學改變。因此，CMV 感染可能與SLE 的發生、發展密切相關。李詠等［11］研究發現，SLE 患兒新發者CMV感染率顯著高于其穩定者。但也有研究認為，SLE與CMV感染并無直接關系［12］。目前，SLE患兒易感染CMV還是CMV感染可促進SLE病情進展尚無定論。本研究結果還發現，SLE 患兒CMV-IgM 陽性者ESR、SLEDAI 及ANuA、抗ds-DNA 抗體、抗β2-GP1抗體、Coombs 實驗陽性率均顯著高于其陰性者，而補體C3 顯著低于其陰性者。進一步研究發現，SLE患兒CMV-IgM 陽性與ESR、SLEDAI 及ANuA、抗ds-DNA抗體、抗β2-GP1抗體、CD23陽性均呈正相關關系，與補體C3 呈負相關關系。結果提示，CMV 感染可能與兒童SLE 疾病活動度有關。SLE 患兒初發者CMV-IgM 陽性率低于其穩定者，這可能與初發SLE 患兒體內免疫系統尚未被完全激活，免疫球蛋白介導的抗體反應低下有關；也可能與穩定期SLE患兒長期使用免疫抑制劑或激素類藥物，白細胞和免疫球蛋白下降，導致機體免疫功能低下有關。SLE 患兒感染CMV 后，不僅可通過激活單核-巨噬細胞引起炎癥反應，還可通過抗體依賴細胞介導的細胞毒作用使自然殺傷細胞數量減少而降低其免疫防御功能，進而加速SLE 病情進展。此外，CMV 感染還能啟動患兒體內NF-κB 信號通路、抗體依賴細胞介導的細胞毒作用等靶細胞凋亡程序，使眾多細胞內成分暴露，產生各種抗體，從而損害免疫系統功能，加速SLE的發生、發展［13］。

EBV 是一種雙鏈線性DNA 病毒，亦屬于皰疹病毒科。EBV 感染在兒童期極為常見，表現為活動性感染和潛伏性感染兩種狀態［14］。近年研究發現，EBV 感染可引起機體外周血CD8+細胞比例增加、CD4+與CD8+比值倒置，從而在SLE 的病理生理過程中發揮重要作用［3-4］。但目前EBV 感染與兒童SLE疾病活動度的關系鮮有報道。本研究結果顯示，觀察組EBV DNA 陽性率顯著高于對照組，說明在兒童SLE 中EBV 感染率較高；SLE 患兒初發者EBV DNA陽性率高于其穩定者，說明SLE 患兒體內存在EBV活動性感染，可能是由于SLE 患兒體內處于潛伏性感染的EBV 被激活有關，再者初發SLE 患兒體內免疫系統尚未被完全激活，免疫球蛋白介導的抗體反應低下，亦可導致EBV 活動明顯。EBV 感染極易引起淋巴瘤和傳染性單核細胞增多癥，還可導致過敏反應和自身免疫性疾病發生［15］。有研究報道，SLE患者血清EBV 抗體滴度顯著升高［16］，表明SLE 患者EBV 活動性感染明顯。本研究結果顯示，SLE 患兒EBV DNA 陽性者ESR、SLEDAI 及ANuA、抗ds-DNA抗體、抗β2-GP1 抗體、CD23 陽性率均高于其陰性者，而補體C3 低于其陰性者；進一步研究發現，SLE患兒EBV DNA 陽性與ESR、SLEDAI 以及ANuA、抗ds-DNA抗體、抗β2-GP1抗體、CD23陽性均呈正相關關系，與補體C3 均呈負相關關系。結果提示，EBV感染可能與兒童SLE 疾病活動度有關。SLE 患兒EBV 感染后可通過多種途徑活化體內B 淋巴細胞，導致機體免疫功能紊亂，細胞異常凋亡、細胞內成分暴露，進而產生大量自身抗體，加重SLE 病情。此外，由于EBV 可在SLE 患兒體內處于潛伏感染狀態，機體體液免疫雖可防止外源性病原微生物入侵，但無法清除體內處于潛伏感染狀態的EBV。因此，SLE 患兒發病后機體免疫系統遭到破壞，進而感染EBV，加重SLE病情，從而形成惡性循環。

綜上所述，CMV、EBV感染與兒童SLE疾病活動度密切相關，在臨床工作中應積極監測病毒感染并制定相應的抗病毒治療措施，從而更好地控制SLE病情。