葡萄灰霉病生物源農藥篩選試驗

摘 要：葡萄灰霉病是危害葡萄生產最主要的真菌病害之一，對葡萄的產量和品質均有較大影響，對灰霉病綠色防治方法進行探索可為優質安全葡萄果品生產提供良好的生產實踐基礎。通過對陽光玫瑰葡萄進行離體葉片接種灰霉病菌進而探索生物源藥劑的防治效果。結果表明，較對照而言，生物源藥劑（綠地康3號、苦參堿和棕櫚精油）可以阻止葡萄葉片灰霉病病斑面積的擴大，其中苦參堿的防治效果最佳。所以，設施葡萄灰霉病綠色防治方法中建議優先使用苦參堿。

關鍵詞：葡萄灰霉病；生物源；農藥藥效

葡萄是世界四大水果之一，在我國廣泛種植且被公認為重要的果樹類經濟作物。現階段葡萄生產多采用設施栽培模式，有效地降低了病蟲害風險（尤其是霜霉病）[1-2]，設施葡萄常見病害為灰霉病，灰霉病病菌是一種寄主范圍廣的兼性寄生菌，分生孢子經過氣流傳播，侵染到破損的葉片、花、穗[3-4]。發病時，病斑邊緣呈不規則形，病葉下垂或干枯，花序和果實容易腐爛脫落，從而造成經濟損失。溫室大棚排水設施差、土壤黏性大、枝葉茂密、通風透光不良、溫濕度高均能引起灰霉病發病[5]。

現階段對葡萄灰霉病病菌的防治以化學防治為主，生物防治和生態控制為輔。灰霉病病菌對環境適應性強，容易產生抗藥性，影響了化學防控的有效性，并且化學農藥對生態環境造成的破壞廣受社會關注，所以采用生物農藥替換化學農藥成為今后病蟲害防治的一個重要發展方向[6-8]。綠地康3號是中農綠康北京生物技術有限公司研發的生物源藥劑，可以使作物表面形成一種高效的保護膜，能有效地防止有害病原菌進入植物體內，有效阻止植物病蟲害、病原細菌生長，誘導出植物機體對病原菌的防護機能，抑制菌類對植物的危害，起到保護植物的作用，綠地康3號防治葡萄病害的研究已有相關報道[9]。苦參堿是由苦參的組織提取制成，主要成分為生物堿和黃酮類，近年來，國內逐漸開發出苦參堿農藥，應用于葡萄的病蟲害防治[10]。據報道植物精油對病菌活性有抑制作用[11]。此外，華東師范大學研究發現丙酸鈣在酸性較強的情況下可完全抑制灰霉菌的孢子生長，可有效預防葡萄果實灰霉病的發生，有效控制葡萄采后的品質劣變[12]。鑒于前人報道，筆者在本試驗中選擇4種不同的生物源藥劑，通過在離體葉片上進行接種觀察發病情況，分析藥劑藥效，為葡萄生產提供理論數據和實踐依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）由本課題組分離純化，經過形態學觀察和分子鑒定[13]，菌株保存于馬鈴薯蔗糖瓊脂（ PDA） 培養基斜面上（ 4 ℃保存 ） 。

試驗于2023年6月在上海市農業科學院實驗室進行，大小一致的葡萄幼嫩葉片取自上海市農業科學院莊行試驗站的10年生陽光玫瑰葡萄樹上。

1.2 試驗方法

取大小一致的幼嫩葉片，放打濕的濾紙上（圖1），使用不同的藥劑用噴壺均勻地噴在葉片背面，每隔2小時噴1次，連噴2次。

不同藥劑處理如下：CK—清水；T1—綠地康3號（中農綠康北京生物技術有限公司），稀釋500倍；T2—0.6% 苦參堿（內蒙古清源保生物科技有限公司），稀釋500倍；T3—棕櫚精油（上海美植家園藝有限公司），稀釋800倍；T4—丙酸鈣（南通奧凱神武技術開發有限公司），0.5%，pH值5.0。

待藥劑揮發干后，選用在PDA培養基上培養3天的菌落，使用0.8厘米打孔器進行打孔，將打孔后的菌餅鋪在葡萄葉片背面（圖2），并放入人工培養箱（上海皓莊有限公司，型號LI280A）中培養，設置溫度22 ℃、相對濕度90%觀察記錄葉片感染情況，觀察5天后，使用ImageJ軟件統計葡萄葉片病斑感染面積[14]。

1.3 數據統計與分析

采用Excel 2010 和SPSS 18.0 軟件進行數據統計和分析。

2 結果與分析

葡萄葉片背面接種灰霉病后，每天觀察病斑的生長情況，不同處理下病斑的發展趨勢有所不同，CK和T4處理下的病斑發展速度較快，T2處理下的病斑發展速度較慢。

由圖3和表1可知，不同處理下陽光玫瑰葉片上灰霉病病斑在5天后有明顯的差異，其中CK和T4處理的病斑感染面積最大，分別為8.16和8.29 厘米2；T1和T3處理的病斑面積次之，分別為4.55和4.31 厘米2；T2處理的病斑面積最小（1.73 厘米2），且與其他處理有顯著差異。由上可知，清水處理和丙酸鈣處理下灰霉病病斑發展情況較為類似，說明丙酸鈣可能對葉片灰霉病防治方面沒有作用；綠地康3號和棕櫚精油處理下的灰霉病病斑面積較清水處理小，且具有顯著差異，說明綠地康3號和棕櫚精油防治葡萄葉片灰霉病有效果；相比較而言，苦參堿處理下病斑擴散面積最小，說明苦參堿對葡萄葉片灰霉病防治效果最佳。

3 討 論

灰霉病是廣泛分布于全世界葡萄種植國家和地區的重要病害，它嚴重影響了葡萄的產量和品質。傳統防治灰霉病的藥劑如腐霉利、嘧霉胺、多菌靈、百菌清等由于使用頻繁，灰霉病菌對部分藥劑已產生抗藥性，防效較差。經分析，葡萄品種、栽培方式、栽培條件等因素不同，灰霉病藥劑防效可能有所差異[15-17]，故在葡萄生產中，可通過調節設施棚內溫濕度，園藝地布覆蓋地面，以及葉片、枝條和果實的科學管理等措施有效防止灰霉病的發生，同時，鑒于生物防治較化學防治具有安全、環保等優點，生產中應優先采用生物防治。

本試驗結果表明供試的4種藥劑中，3種藥劑（綠地康3號、苦參堿和棕櫚精油）對葡萄葉片的灰霉病均有一定的防治效果，其中苦參堿最能有效抑制灰霉病的發生。馬蕊等[8]在田間試驗發現對葡萄果實灰霉病使用苦參堿藥劑后發病率較對照降低；楊勇等[10]研究發現丁子香酚和苦參堿混配對葡萄灰霉病菌防治效果明顯，可以減少和替代化學農藥的使用，提高果品品質。綜合以上結果，建議在設施葡萄生產上優先使用苦參堿對葡萄灰霉病進行防治。

參考文獻

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