不同微生物制劑對大口黑鱸生長、形體指標及腸道組織結構的影響

摘 要：為探究不同微生物制劑對大口黑鱸生長、形體指標及腸道組織結構的影響，在商業配合飼料中添加不同濃度的丁酸梭菌[0（A組，CK）、0.25%（B組）、0.5%（C組）、1%（D組）丁酸梭菌（5×108 cfu·g-1）]、0.2%酵母產品（E組）及兩者的混合物（0.25%丁酸梭菌+0.2%酵母產品，F組）進行兩階段共17周的養殖試驗。結果表明：第一階段（14周）試驗組中，除添加0.2%酵母產品（E組）外，其余均較對照顯著提升了大口黑鱸的生長性能，其中添加0.5%丁酸梭菌效果最優；第二階段（17周）試驗組間（A、C和F組），0.5%丁酸梭菌（C組）和0.25%丁酸梭菌+0.2%酵母產品（F組）的末均重及末體長較對照A組均顯著增加；肥滿度、臟體比指數、腸絨毛長度及肌層厚度三組間無顯著差異，但與對照（A組）相比，添加0.5%丁酸梭菌（C組）的各指標有增高趨勢，添加0.25%丁酸梭菌+0.2%酵母產品（F組）的各指標有降低趨勢。研究表明，在本試驗條件下，商業配合飼料中添加0.5%丁酸梭菌對大口黑鱸生長及腸道健康改善的效果最佳。

關鍵詞：丁酸梭菌；酵母；大口黑鱸；生長；形體指標；腸道組織結構

中圖分類號：S 917.4 ""文獻標志碼：A"" 文章編號：0253-2301（2024）01-0023-05

DOI： 10.13651/j.cnki.fjnykj.2023.12.004

Effects of Different Microbial Preparations on the Growth， Physical Indices andIntestinal Tissue Structure of Micropterus salmoides

Abstract： In order to explore the effects of different microbial preparations on the growth， body index and intestinal tissue structure of Micropterus salmoides， different concentrations of Clostridium butyricum [0 （group A， CK）， 0.25% （group B）， 0.5% （group C）， 1% （group D） Clostridium butyricum （5×108 cfu·g-1）]， 0.2% yeast products （group E） and their mixture （0.25% Clostridium butyricum+0.2% yeast products， group F） were added to the commercial compound feed for a two-stage breeding experiment for 17 weeks. The results showed that： in the first stage （14 weeks）， except for adding 0.2% yeast products （group E）， the growth performance of Micropterus salmoides was significantly improved compared with the control group， and the effect of adding 0.5% Clostridium butyricum was the best. In the second stage （17 weeks）， the final mean weight and final body length of 0.5% Clostridium butyricum （group C） and 0.25% Clostridium butyricum+0.2% yeast products （group F） were significantly higher than those of the control group A. There were no significant differences in the fullness， visceral-body ratio index， length of intestinal villus and muscle layer thickness among the three groups. However， compared with the control group （group A）， the indexes of adding 0.5% Clostridium butyricum （group C） had an increasing tendency， and the indexes of adding 0.25% Clostridium butyricum+0.2% yeast products （group F） had a decreasing tendency. The results showed that under the experimental conditions， the addition of 0.5% Clostridium butyricum to the commercial compound feed had the best effect on the growth and improvement of intestinal health of Micropterus salmoides.

Key words： Clostridium butyricum； Yeast； Micropterus salmoides； Growth； Physical index； Intestinal tissue structure

大口黑鱸Micropterus salmoides，俗稱加州鱸，是一種典型的肉食性淡水魚類。因其具有生長快、抗病力強、肉質鮮嫩及營養豐富等優點，目前已成為我國淡水養殖的主要品種，2022年產量達80萬t[1]。然而，高密度養殖模式下，全程使用商業配合飼料容易導致大口黑鱸的腸道營養代謝紊亂、厭食、抗病力減弱及生長性能下降等問題[2-4]。

微生態制劑是一類綠色、安全的飼料添加劑，能改善養殖動物的生長性能和腸道健康，已廣泛應用于水產養殖業中[5]。丁酸梭菌具有耐酸、耐堿及耐高溫等特性，作為飼料添加劑可有效促進魚體的生長和健康[6-7]。酵母含有核苷酸、多肽、多糖、維生素等活性物質，能改善機體的健康狀況，從而提高水產動物的生長性能及抗病力[8-9]。

本試驗以大口黑鱸為養殖對象，在商業配合飼料中添加不同濃度的丁酸梭菌、酵母及兩者的混合物進行養殖試驗，探究不同微生物制劑對大口黑鱸生長性能及腸道組織結構的影響，為大口黑鱸的健康養殖提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 飼料及微生物制劑

飼料由福星（廈門）生物飼料有限公司提供，丁酸梭菌（5×108 cfu·g-1）由廈門昶科生物工程有限公司提供，酵母產品（滅活酵母）由北京和聯四海生物科技有限公司提供。粉狀微生物制劑用水充分溶解后以噴霧的方式均勻拌于飼料中，具體添加量見表1。每次稱取2 d的日投餌量（約3%魚體重量）進行拌料，拌好的飼料置陰涼處保藏。

1.2 鱸魚和飼養管理

養殖試驗在福建漳州長泰縣的福鱸種苗基地進行，試驗動物采用基地自養的大口黑鱸。飼養系統為500 L的PVC流水（20～30 mL·s-1）養殖系統，每天定時以飽食但不留殘餌的方式投喂2次（上午7：30和下午16：30），每天在下午吸污。飼養期間水溫維持在25～26℃，溶解氧大于5 mg·L-1，氨氮含量小于0.15 mg·L-1，pH值為7.5～8.0。

1.3 試驗設計及樣品采集

挑選270尾規格一致的大口黑鱸，分6個試驗組（A、B、C、D、E、F），每組設置3個平行（n=15尾）暫養于上述養殖系統，10 d后測量體重進行微生物制劑投喂試驗。投喂試驗分兩個階段共17周，在第14周對各組魚進行稱重（第1階段），A、C和F組繼續投喂3周（第2階段）。試驗結束，魚禁食24 h后進行麻醉處理，測量體長和體重，分離內臟團并稱重。分離的腸道樣品放于裝有4%多聚甲醛溶液的離心管中保存，用于切片制作。

1.4 指標測定與方法

1.4.1 生長性能

增重率（WGR，%）=（末重-初重）/初重×100；

飼料系數（FCR）=投喂量/（末重-初重）；

肥滿度（CF，g/cm3）=（末體重/末體長）×100；

臟體比指數（VSI，%）=（內臟重/魚體重）×100；

1.4.2 腸道組織結構 腸道組織在4%多聚甲醛溶液中固定24 h后，用70%酒精沖洗，各級乙醇脫水后進行石蠟包埋和切片，利用二甲苯和各級乙醇溶液脫蠟，進行染色和封片。切片通過Eclipse Ci-L拍照顯微鏡40×成像進行觀察和拍照，利用Image-Pro Plus 6.0分析軟件測量絨毛高度和肌層厚度。

1.5 數據分析

試驗結果用SPSS 22.0軟件進行單因素方差分析（One-way ANOVA），多重差異顯著性比較使用Duncan′s法。

2 結果與分析

2.1 第一階段不同微生物制劑對大口黑鱸生長性能的影響

由表2可知，經過14周的投喂試驗，試驗組大口黑鱸的增重率為（122±0.05）%～（138±0.05%），均高于對照A組（110±0.13）%。C組增重效果最佳，F組次之，除E組外，試驗組增重效果顯著（Plt;0.05），且各試驗組間無顯著差異（Pgt;0.05）。試驗組大口黑鱸的餌料系數（0.98±0.10）～（1.06±0.09），與對照A組（1.24±0.21）相比，除E組外，各試驗組降低效果均顯著（Plt;0.05），且試驗組間無顯著性差異（Pgt;0.05）。

2.2 第二階段不同微生物制劑對大口黑鱸形體指標的影響

由表3可知，17周后C組和F組的末均重和末體長相較于對照A組有顯著提高（Plt;0.05），C組和F組間差異不顯著（Pgt;0.05）；肥滿度、臟體比指數在各組間無顯著性差異（Pgt;0.05）。

2.3 不同微生物菌劑對大口黑鱸腸道組織結構的影響

由圖1、表4可知，A組、C組和F組腸絨毛形態規則，結構清晰；腸絨毛長度C組gt;A組gt;F組，肌層厚度C組gt;A組gt;F組，但均無顯著性差異（Pgt;0.05）。

3 討論

3.1 不同微生物制劑對大口黑鱸生長性能和形體指標的影響

生長性能和形體指標一定程度上反映魚體的健康狀況，丁酸梭菌對魚體生長性能的影響不僅跟不同魚類的耐受程度有關，還與添加量有關。朱振祥[10]的研究顯示，在飼料中添加1×107 cfu·g-1丁酸梭菌對鯉魚的增重率、特定生長率及飼料系數均無顯著影響，而樊英等[11]研究表明，飼料中添加7.35×106 cfu·g-1丁酸梭菌可顯著提升虹鱒魚的特定生長率，相應的飼料系數也顯著降低。本研究發現，飼料中添加0.25%、0.5%和1%的5×108 cfu·g-1丁酸梭菌均能顯著提升大口黑鱸的增重率，降低飼料系數，影響效果隨添加量的增加呈先提升后下降的趨勢，這與舒琥等[12]在寶石鱸中的研究結果一致，提示適宜的添加量對促進養殖動物的生長至關重要。在形體指標方面，肥滿度和臟體比是衡量魚體能量狀態的重要指標，本研究中0.5%的丁酸梭菌添加組的指標雖然高于其他組，但無顯著差異，這與朱建國[13]對七彩神仙魚的研究結果一致，而吳楊等[14]在卵形鯧鲹幼魚中觀察到顯著增高的效果，表明丁酸梭菌對魚形體的影響具有物種差異性。

本研究結果顯示，飼料中添加0.2%的酵母產品對大口黑鱸的生長性能無顯著影響，Zhou等[15]研究也表明添加0.1%和0.2%的酵母水解物對大口黑鱸的促生長效果不明顯，相似的試驗結果在易婉婷等[16]研究中也被報道。然而，Feng等[17]在飼料中添加3%酵母培養物顯著提升了大口黑鱸的特定生長率，劉泓宇等[18]用兩種不同發酵底物的2%和4%的酵母培養物飼喂珍珠龍膽石斑魚，添加4%的兩種酵母培養物均提高了石斑魚的生長性能，2%含非蛋白氮的酵母培養物組影響不顯著。Ran等[19]用含0.1%的活酵母與相同量的滅活酵母的飼料分別飼喂尼羅羅非魚，結果顯示活酵母添加組提升了羅非魚的生長性能，滅活酵母添加組則效果不顯著。本研究添加的0.2%酵母產品為滅活酵母，其單獨添加及與0.25%的丁酸梭菌混合添加對大口黑鱸的生長性能均無較明顯的提升，可能與其添加量較小及生產工藝不同有關。

3.2 不同微生物菌劑對大口黑鱸腸道組織結構的影響

腸道形態和結構對水產動物的營養吸收及維持正常的生理功能至關重要。腸壁由外向內分為漿膜層、肌層和黏膜層。黏膜層向內折疊形成腸絨毛，增大消化吸收的面積， 因此腸絨毛長度反映腸道對營養物質的吸收能力；肌層厚度影響腸道的收縮與蠕動功能，進而影響腸道的消化吸收效率[20]。本研究中，添加0.5%的丁酸梭菌有提升大口黑鱸腸絨毛長度及肌層厚度的趨勢，這與Meng等[21]在鯉魚中的研究結果相似；而添加0.25%丁酸梭菌和0.2%酵母混合物降低了大口黑鱸的腸絨毛長度及肌層厚度，陳潯等[22]在飼料中添加0.1%和0.3%的酵母培養物，結果發現大口黑鱸的腸絨毛長度及肌層厚度在添加0.1%酵母培養物的試驗組中也有下降趨勢，提示應結合對腸道菌群影響的研究，進而更全面的探究微生物制劑對養殖動物生長及健康的影響。

4 結論

本試驗探究了不同濃度丁酸梭菌、酵母及丁酸梭菌與酵母混合物大口黑鱸生長及腸道組織結構的影響，結果表明商業配合飼料中添加0.5%丁酸梭菌（C組）對促進大口黑鱸生長及腸道健康改善的效果最佳，其作用機制需進一步研究。

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