不同水平的小球藻對草魚免疫力功能的影響

文章編號：1674-2419（2024）02-0165-04

作者簡介：聞祖銀（1977.3- ），男，壯族，廣西欽州人。欽州市欽南區黃屋屯鎮農業農村服務中心工程師。主要從事水產技術推廣工作。E-mail：2086213700@qq.com。

摘" 要：為研究不同水平的小球藻（Cholorella vulgaris）對草魚（Ctenopharyngodon idella）機體非特異性免疫功能的影響，確定小球藻在改善草魚機體免疫功能方面的最適添加水平。試驗選擇體重約20g、健康無病的草魚400尾，按照單因素試驗設計將其均分4個處理組，每組4個重復，每個重復25尾草魚。各組草魚依次投喂含有0%（對照組）、0.5%、1.0%、1.5%的小球藻的飼料。投喂60 d后，檢測各組草魚機體的非特異性免疫指標。檢測結果顯示，與對照組比較，試驗2組和試驗3組草魚血清中堿性磷酸酶（ALP或AKP）活性顯著提高（Plt;0.05），溶菌酶（LZ）活性顯著提高（Plt;0.05），總抗氧化能力顯著提高（Plt;0.05）；超氧化物歧化酶活性顯著提高（Plt;0.05）；而小球藻對草魚血清中的酸性磷酸酶、過氧化氫酶活力未產生顯著性影響（Pgt;0.05）。研究結果表明，草魚養殖生產中，添加1.0%和1.5%的小球藻可以顯著增強機體的非特異性免疫力。

關鍵詞：小球藻（Cholorella vulgaris）；草魚（Ctenopharyngodon idella）；溶菌酶（LZ）；堿性磷酸酶（ALP或AKP）；超氧化物歧化酶（SOD）

中圖分類號：S965.112 文獻標志碼：A

草魚（Ctenopharyngodon idella）是中國主要的淡水魚養殖品種之一，養殖量巨大。草魚生長快、養殖成本低、肉質鮮美、營養豐富，備受養殖者的青睞。隨著中國草魚養殖規模的逐漸擴大，養殖密度增大，導致養殖水體環境易污染、草魚機體免疫力下降、生長緩慢，進而影響養殖的經濟效益。在飼料中增加添加劑是解決草魚養殖過程中生長緩慢、改善水質環境、提高機體免疫力的有效方式之一。其中小球藻（Cholorella vulgaris）在水產養殖生產中的應用研究結果逐漸增多。小球藻是綠藻門單細胞藻類，外形呈球形，廣泛分布在自然界中。小球藻生長繁殖速度較快，光合效率較高。小球藻中含有多種營養物質及活性成分，如蛋白質、微量元素、脂類、多糖、胡蘿卜素等物質，在水產動物養殖生產中具有廣泛的應用前景。在中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis）的養殖中，與對照組比較，使用適量的小球藻可以使中華絨螯蟹血清中的超氧化物歧化酶（Orgotein，Superoxide Dismutase SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、酸性磷酸酶（ACP）和堿性磷酸酶（ALP或AKP）活性提高36.00%、34.82%、35.63%、87.30%，明顯改善了中華絨螯蟹的非特異性免疫力。在凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）的養殖生產中，添加適量的小球藻可以提高凡納濱對蝦的成活率和生長性能，提高肌肉中脂肪酸、必需氨基酸含量，且小球藻的最適添加水平為1.0%。但目前，有關小球藻在草魚養殖生產中的應用研究結果比較少見。因此，該試驗以草魚為受試對象，探究不同水平的小球藻對草魚機體非特異性免疫力的影響，確定小球藻在改善草魚機體免疫力方面的最適添加水平，為小球藻在草魚的高效養殖生產中的推廣與利用提供一定的理論數據支撐。

1" 材料與方法

1.1" 草魚和小球藻

試驗草魚由廣西欽州市欽南區黃屋屯鎮屯西村養殖場提供。小球藻由深圳永晨實業有限公司提供，其粗蛋白含量為60.13%、粗脂肪含量為13.6%、粗灰分含量為5.49%。

1.2" 試驗設計

試驗選擇體重約20 g、健康無病的草魚400尾，按照單因素試驗設計將其均分4個處理組，每組4個重復，每個重復25尾草魚。各組草魚依次投喂含有0（對照組）、0.5%、1.0%、1.5%的小球藻的飼料，投喂60 d后，檢測各組草魚機體的非特異性免疫指標。試驗草魚的基礎飼料以魚粉、豆粕、菜籽粕、棉籽粕等為蛋白源，以魚油、豆油為脂肪源，各原料粉碎后，逐級混勻，加入適量水，制成粒徑2 mm的顆粒飼料，試驗組草魚飼料分別加入0.5%、1.0%和1.5%的小球藻。試驗草魚的基礎日糧配方見表1。試驗分組處理見表2。

1.3" 飼養管理

試驗開始前，試驗草魚先馴養2周，期間飼喂基礎飼料。草魚飼養在圓桶中，直徑為0.8m。正式試驗期間，各組草魚投喂相應的試驗飼料，每日投喂量約為草魚體重的3%～4%，每次投喂2 h后，吸出殘餌。每日監測養殖水質情況，pH值約為7.4，溶解氧大于6 mg/L。每日不間斷充氧。

1.4" 非特異性指標的檢測

試驗最后一天，各組草魚晨飼之前，尾靜脈采血，用于檢測血清中的溶菌酶、堿性磷酸酶、酸性磷酸酶、過氧化氫酶、超氧化物歧化酶、丙二醛等非特異性免疫指標。檢測方法參考試劑盒說明書，試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.5" 數據分析

各組草魚血清非特異性免疫指標數據采用SAS 9.5分析顯著性，LSD方法進行組間數據的兩兩比較，結果用平均值表示，Plt;0.05表示數據差異顯著。

2" 結果

不同水平的小球藻對草魚血清非特異性免疫指標的影響，見表3。從表3中數據可見，與對照組比較，試驗2組和試驗3組草魚血清中堿性磷酸酶活性顯著提高（Plt;0.05），溶菌酶活性顯著提高（Plt;0.05），總抗氧化能力顯著提高（Plt;0.05）；超氧化物歧化酶活性顯著提高（Plt;0.05）；而小球藻對草魚血清中的酸性磷酸酶、過氧化氫酶活力未產生顯著性影響（Pgt;0.05）。研究表明，草魚養殖生產中，添加1.0%和1.5%的小球藻可以顯著增強機體的非特異性免疫力。

3" 討論

水產動物血清中的非特異性免疫指標主要包括溶菌酶、堿性磷酸酶、超氧化物歧化酶等。其中溶菌酶和堿性磷酸酶的活性可以衡量機體的免疫強弱。溶菌酶是一種堿性蛋白酶，可以阻止病原微生物的入侵，而堿性磷酸酶可以殺滅病原微生物。本試驗中，在草魚養殖中添加1.0%和1.5%的小球藻可以明顯提高溶菌酶和堿性磷酸酶活性，表明適量的小球藻可以改善草魚機體抵抗病原菌的能力。超氧化物歧化酶是動物機體內重要的抗氧化酶之一，可以清除體內多余的自由基。該試驗中，在草魚養殖中添加1.0%和1.5%的小球藻可以明顯提高超氧化物歧化酶活性，表明小球藻可以顯著增強草魚機體的抗氧化能力。闕江龍等等研究了小球藻對草魚生長、免疫、肌肉品質及消化酶活性的影響，發現適量的小球藻可以明顯提高草魚血清中總抗氧化能力、溶菌酶活性、堿性磷酸酶活性，且小球藻的最適添加水平為0.75%，與該研究結果類似。小球藻在改善草魚機體免疫力方面的添加量水平不同，可能是因為草魚體重、小球藻有效成分含量及養殖環境不同導致的。生產實踐中，可以根據試驗所用小球藻的營養水平確定最適的添加劑量，在保證提高草魚養殖效益的同時降低養殖成本。

4" 結論

該試驗結果表明，在草魚養殖生產中添加適量的小球藻可以顯著提高草魚血清中溶菌酶、超氧化物歧化酶、堿性磷酸酶活性及總抗氧化能力，明顯增強了草魚機體的非特異性免疫功能，且小球藻的最適添加水平為1.0%和1.5%。

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Effects of different levels of Chlorella vulgaris on the immune function of Ctenopharyngodon idellus

WEN Zuyin

（Qinzhou City Qinnan District Huangyutun Town Agricultural and Rural Service Center， Qinzhou 535033， Guangxi China）

Abstract：In order to study the effects of different levels of Chlorella vulgaris on the organismal non-specific immune function of grass carp （Ctenopharyngodon idella）， and to determine the optimal level of addition of Chlorella vulgaris in improving the organismal immune function of grass carp. In the experiment， 400 healthy and disease-free grass carp weighing about 20g were selected and divided into 4 treatment groups with 4 replicates each and 25 fish in each replicate according to the one-way experimental design. Each group was fed with 0% （control）， 0.5%， 1.0% and 1.5% chlorella vulgaris. After 60 d of feeding， the non-specific immunity indexes of the body of grass carp in each group were detected. The test results showed that compared with the control group， alkaline phosphatase （ALP or AKP） activity in the serum of grass carp in the test 2 and test 3 groups was significantly increased （Plt;0.05）， lysozyme （LZ） activity was significantly increased （Plt;0.05）， total antioxidant capacity was significantly increased （Plt;0.05）; and superoxide dismutase activity was significantly increased （Plt;0.05）; and the effect of Chlorella on the serum of grass carp was significantly increased （Plt;0.05）. The acid phosphatase and catalase activities in grass carp serum were not significantly affected （Pgt;0.05）. The results of this study indicated that the addition of 1.0% and 1.5% chlorella vulgaris could significantly enhance the non-specific immunity of grass carp in aquaculture production.

Keywords：chlorella vulgaris; Ctenopharyngodon idella; lysozyme （LZ）; alkaline phosphatase （ALP or AKP）; superoxide dismutase （SOD）