康 成,張 文,張 璐,馬小妮,蒲三多

蘭州大學第一醫院醫學檢驗中心,甘肅蘭州 730000

多發性骨髓瘤(MM)是一種常見于中老年人的原發性骨髓漿細胞克隆增殖性疾病,表現為過量的單克隆免疫球蛋白在血液和尿液中的分泌[1-2]。MM的發病率約占所有血液腫瘤患者的10%,是僅次于惡性淋巴瘤的第二常見血液系統惡性腫瘤,其可通過化療、靶向治療等手段予以治療,但仍存在復發和耐藥等問題,預后較差。因此,早期診斷、準確分期對于患者生活質量提高意義重大[3-4]。過去臨床上主要通過骨髓細胞形態學檢查診斷MM,但是其存在一定的局限性,結果可能存在假陰性或假陽性,尤其是早期或隱匿性MM患者難以確診[5-6]。MM的分期主要依據國際分期標準(ISS),但是其存在一定的缺陷,容易受到患者自身疾病的影響,導致結果不準確[7-9]。Ⅰ型前膠原氨基端前肽(P1NP)和Ⅰ型膠原羧基端肽β特殊序列(β-CTX)作為常見的骨形成和骨吸收標志物[10]。近年來,有研究發現,其與MM患者的骨病變程度、腫瘤負荷等密切相關,可用于預測MM患者預后評估方面的指標[11]。因此,本研究擬探討骨髓細胞形態學檢查聯合血清P1NP、β-CTX檢測對MM及其分期的診斷價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2020年1月1日至2023年2月1日在本院就診的104例MM患者作為研究對象,根據MM國際分期系統(ISS分期)分為Ⅰ期[血清微球蛋白β2(β2-MG)<3.5 mg/L及白蛋白(ALB)≥35 g/L]、Ⅱ期(不屬于Ⅰ期或Ⅲ期)和Ⅲ期(血清β2-MG≥5.5 mg/L),分別為32例、36例和36例。其中男58例,女46例;年齡38～78歲,平均(59.3±10.2)歲。同時選取同期40例因為缺鐵性貧血、再生障礙性貧血、骨髓增生異常綜合征等原因接受骨髓穿刺的患者作為對照組。其中男22例,女18例;年齡范圍為35～75歲,平均(57.6±9.8)歲。兩組在性別和年齡方面差異無統計學意義(P>0.05)。所有研究對象均簽署知情同意書,本研究已得到醫院倫理委員會的批準。

1.2納入及排除標準 納入標準:(1)符合MM診斷標準的患者;(2)年齡≥18歲;(3)首次就診或近期未接受過任何治療;(4)自愿參與本研究。排除標準:(1)合并其他惡性腫瘤、感染性疾病、肝臟或腎臟功能不全、代謝性疾病、血液系統疾病等;(2)服用過影響骨代謝的藥物(如激素、雙膦酸鹽等);(3)拒絕參與本研究或中途退出。

1.3方法 所有研究對象均在空腹狀態下采集外周靜脈血5 mL,并于2 h內離心分離血清。采用化學發光免疫法(CLIA)測定血清P1NP水平(Roche公司試劑盒),采用電化學發光免疫法(ECLIA)測定血清β-CTX水平(Roche公司試劑盒)。所有操作嚴格按照試劑盒里面的說明書步驟實施。采用骨髓穿刺術取得骨髓液,并制作骨髓涂片。采用流式細胞分析儀(BD公司)對骨髓涂片進行骨髓細胞形態學檢查,計算骨髓漿細胞比例,并觀察其形態特征。所有檢測均按照廠家說明書操作,并由同一技術人員進行。觀察并對比觀察組、對照組、MM各分期組患者血清P1NP、β-CTX水平及骨髓漿細胞比例,并分析血清P1NP、β-CTX和骨髓漿細胞比例對MM及其分期的診斷效能。

2 結 果

2.1MM組和對照組的血清P1NP、β-CTX和骨髓漿細胞比例比較 MM組血清P1NP、β-CTX水平及骨髓漿細胞比例顯著高于對照組(P<0.05)。見表1。

表1 MM組和對照組的血清P1NP、β-CTX和骨髓漿細胞比例比較

2.2MM各分期組的血清P1NP、β-CTX和骨髓漿細胞比例比較 Ⅲ期組血清P1NP、β-CTX水平及骨髓漿細胞比例均高于Ⅱ期組及Ⅰ期組(P<0.05),Ⅱ期組血清P1NP、β-CTX水平及骨髓漿細胞比例均高于Ⅰ期組(P<0.05);血清P1NP、β-CTX和骨髓漿細胞比例隨著MM分期的升高而逐漸增高。見表2。

表2 MM各分期組的血清P1NP、β-CTX和骨髓漿細胞比例比較

2.3血清P1NP、β-CTX和骨髓漿細胞比例對MM及其分期的診斷效能 以骨髓漿細胞比例≥10%為診斷MM的標準,ROC曲線分析結果顯示,血清P1NP和β-CTX對MM的診斷效能均較高,骨髓漿細胞比例對MM的診斷效能較低,血清P1NP、β-CTX和骨髓漿細胞比例聯合檢測對MM的診斷效能最高。見表3和圖1。

圖1 血清P1NP、β-CTX和骨髓漿細胞比例診斷MM的ROC曲線

表3 血清P1NP、β-CTX和骨髓漿細胞比例對MM的診斷效能

以ISS標準為參考,ROC曲線分析顯示,血清P1NP和β-CTX對MM Ⅲ期的診斷效能均較高,血清P1NP、β-CTX聯合檢測對MM Ⅲ期的診斷效能最高。見表4和圖2。

圖2 血清P1NP、β-CTX診斷MM Ⅲ期的ROC曲線

表4 血清P1NP、β-CTX對MM Ⅲ期的診斷效能

3 討 論

隨著近年來化療、靶向治療、干細胞移植等不斷進展,MM患者的生存期有所延長,但仍存在復發和耐藥等問題,預后較差[12-14]。因此,早期診斷、準確分期和有效監測是提高MM患者生活質量和生存期的關鍵。骨髓細胞形態學檢查是目前最常用的MM診斷方法之一,可直接觀察骨髓漿細胞的數量和形態,判斷其是否為單克隆性[15]。但是,骨髓細胞形態學檢查存在一定的局限性。因此,需要結合其他指標進行輔助診斷。

P1NP和β-CTX是常用的骨形成和骨吸收標志物。近年來,有研究發現,血清P1NP和β-CTX水平與MM患者的骨病變程度、腫瘤負荷等密切相關:王豪言等[16]、鐘沂芮等[17]報道顯示,血清P1NP和β-CTX水平與MM患者的骨折風險、生存期和疾病進展相關,可用于評價MM患者雙膦酸鹽治療效果的指標;陶怡等[18]報道發現,血清P1NP和β-CTX水平與MM患者的腎功能、血鈣水平、血紅蛋白水平、血清游離輕鏈水平等相關。因此,血清P1NP和β-CTX檢測對MM患者具有重要的臨床意義。本研究結果發現,MM組患者的血清P1NP和β-CTX水平均顯著高于對照組(P<0.05),并且隨著MM分期的升高而逐漸增高。這可能是因為MM患者的惡性漿細胞分泌多種細胞因子,其可以刺激骨髓基質細胞分化為成熟的破骨細胞,并增加其活性和壽命,從而導致骨吸收增加[19]。同時,這些細胞因子還可以抑制成骨細胞的分化和功能,從而導致骨形成減少[20]。因此,血清P1NP和β-CTX作為骨代謝標志物,可以反映MM患者的骨代謝狀態,其水平升高提示骨吸收增加和骨形成減少。

本研究結果顯示,以血清P1NP≥80 ng/mL和β-CTX≥500 pg/mL為診斷標準,對MM的靈敏度和特異度分別為88.5%和95.0%,聯合檢測的靈敏度和特異度分別為98.1%和100.0%。這提示血清P1NP和β-CTX檢測對MM具有較高的診斷效能,尤其是聯合檢測更具優勢。可能原因為血清P1NP和β-CTX檢測操作簡便、快速、無創傷、結果穩定、可重復、不受取材部位等因素影響;此外,P1NP和β-CTX反映了MM患者的骨代謝動態變化。因此,血清P1NP和β-CTX檢測可以作為骨髓細胞形態學檢查的有效補充,提高MM的診斷率,尤其是對于早期或隱匿性MM患者。

本研究還發現,以血清P1NP≥100 ng/mL和β-CTX≥700 pg/mL為分期標準,對MM Ⅲ期的靈敏度和特異度分別為86.1%和88.2%,聯合檢測的靈敏度和特異度分別為94.4%和97.1%。這說明,血清P1NP和β-CTX檢測對MM Ⅲ期具有較高的診斷效能,尤其是聯合檢測更具優勢。這可能是因為MM Ⅲ期患者的腫瘤負荷較高,骨髓漿細胞比例、血清游離輕鏈水平、β2-MG水平等均較高;同時,MM Ⅲ期患者的骨病變程度較重,骨折風險、高鈣血癥、腎功能不全等均較高[21]。因此,血清P1NP和β-CTX檢測可以作為ISS標準的有效補充,提高MM Ⅲ期的診斷率,尤其是對于ISS標準不敏感或不準確的情況。

本研究有以下局限性:一是樣本量較小,可能存在偶然誤差;二是未考慮其他影響骨代謝的因素,如年齡、性別、體重、飲食、運動等;三是未進行后期隨訪。因此,今后需要進行深入研究以驗證本研究結果,并進一步探討血清P1NP和β-CTX檢測在MM患者臨床管理中的應用價值。

綜上所述,骨髓細胞形態學檢查聯合血清P1NP、β-CTX檢測對MM及其分期具有較高的診斷價值,可作為MM患者的常規檢查項目,有助于評估患者的病情和預后。