基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接法研究參七解郁方治療雙心疾病的分子機(jī)制

劉莉，王鳳榮

作者單位：1遼寧中醫(yī)藥大學(xué)研究生學(xué)院，遼寧 沈陽(yáng) 110847；

2大連大學(xué)附屬中山醫(yī)院老年病科，遼寧 大連 116001；

3遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院心內(nèi)科，遼寧 沈陽(yáng)110032

雙心疾病是心血管系統(tǒng)疾病與精神情緒障礙并存的一類疾病，目前常指冠心病合并焦慮抑郁狀態(tài)，越來(lái)越多的臨床資料顯示冠心病病人常同時(shí)合并焦慮抑郁狀態(tài)。冠心病與焦慮抑郁相互作用、相互影響，互為因果，會(huì)導(dǎo)致疾病進(jìn)一步惡化。冠心病人群患有焦慮抑郁的發(fā)生率明顯高于普通人群［1-2］，這既增加了病人的病痛與經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，也占用了社會(huì)醫(yī)療資源，因此對(duì)于雙心疾病的防治已經(jīng)成為我國(guó)心血管疾病領(lǐng)域亟需解決的重要公共衛(wèi)生問(wèn)題［3］。

中醫(yī)經(jīng)典理論認(rèn)為心在人體中處于最高主導(dǎo)地位，心主血脈，心藏神，指心既是血液循環(huán)的原動(dòng)力，又是精神、意識(shí)和思維活動(dòng)的中心。《素問(wèn)·五臟生成論》：“諸血者皆屬于心。”《素問(wèn)·六節(jié)藏象論》：“心者，生之本，神之變也。”《素問(wèn)·靈蘭秘典論》：“心者，君主之官，神明出焉。”由此，可以看出心主神明的重要生理功能。相反，心主神明功能一旦失司，就會(huì)導(dǎo)致情志異常，發(fā)展為郁病。因此，雙心理論也是中醫(yī)心系疾病理論的重要反應(yīng)，既體現(xiàn)在生理方面相互依存，又體現(xiàn)在病理方面互為因果。目前，雙心疾病的治療通常是在冠心病治療的基礎(chǔ)上再加用抗焦慮抑郁藥，而長(zhǎng)期應(yīng)用這類藥物會(huì)使病人產(chǎn)生很強(qiáng)的依賴性，而且還加重了病人的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)［4］，而中醫(yī)藥對(duì)于雙心疾病的治療效果確切，安全性也能得到很好保證，在近十年的發(fā)展過(guò)程中逐漸受到關(guān)注與認(rèn)可［5］。

王鳳榮教授在古文“開(kāi)心散”“定志小丸”的基礎(chǔ)上創(chuàng)立了參七解郁方，由遠(yuǎn)志、石菖蒲、人參、丹參、三七、郁金、合歡、柴胡、香附、百合、珍珠母、炙甘草組成；其功效為益氣化痰、安神定志，參七解郁方在臨床治療雙心疾病中獲得較好的療效，尤其對(duì)PCI術(shù)后雙心疾病的干預(yù)方面療效可靠。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是多學(xué)科融合形成的新興技術(shù)，基于“疾病-基因-靶點(diǎn)-藥物”相互作用網(wǎng)絡(luò)，系統(tǒng)綜合地觀察藥物對(duì)疾病網(wǎng)絡(luò)的干預(yù)與影響，主要通過(guò)各種組學(xué)數(shù)據(jù)分析和計(jì)算機(jī)模擬手段構(gòu)建多層次網(wǎng)絡(luò)來(lái)實(shí)現(xiàn)。分子對(duì)接是一種研究小分子配體與蛋白質(zhì)受體之間相互作用和識(shí)別的理論方法。本研究將網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接技術(shù)相結(jié)合共同研究中藥參七解郁方治療雙心疾病，為活性成分篩選和機(jī)制探索提供新的方法［6］。

1 方法

1.1 數(shù)據(jù)庫(kù)與軟件本研究主要應(yīng)用的生物信息學(xué)工具包括：中藥系統(tǒng)藥理分析平臺(tái)（TCMSP，https：//old.tcmsp-e.com/）、TCMID 數(shù) 據(jù) 庫(kù)（http：//www.megabionet.org/ tcmid/）、Gene Cards 數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//www.Genecards.org/）、在線韋恩分析工具（http：//bioinformatics.psb.ugent. be/webtools/Venn/）、Uniprot 網(wǎng)站（https：//www.uniprot.org）、Pubchem 數(shù)據(jù)庫(kù)（https：// pubchem. ncbi. nlm.nih.gov/）、Gene Cards 數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//www.genecards.org/）、String 數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//cn.string-db.org/）、DAVID 網(wǎng)站（https：//david.ncifcrf.gov/）、Auto Dock Tools 1.5.7軟件。

1.2 參七解郁方中化學(xué)成分以及其可能靶點(diǎn)預(yù)測(cè)利用TCMSP 平臺(tái)為主查找參七解郁方的藥物化學(xué)成分，篩選條件設(shè)定為：（1）類藥性（drug-likeness，DL）≥0.18，（2）口服生物利用度（oral bioavailability，OB）≥30%， TCMSP 平臺(tái)檢索不到的成分通過(guò)TCMID 平臺(tái)為補(bǔ)充進(jìn)行查找。Uniprot 網(wǎng)站確定各靶點(diǎn)的Uniprot ID。每個(gè)化合物利用 Pubchem 獲取 SMILES 和3D 文件，以便進(jìn)行化合物的靶點(diǎn)預(yù)測(cè)和分子對(duì)接的應(yīng)用操作。

1.3 雙心疾病靶點(diǎn)收集利用Gene Cards 數(shù)據(jù)庫(kù)，以“ coronary heart disease”“ anxiety- depression”為關(guān)鍵詞檢索得到雙心疾病的相關(guān)靶點(diǎn)及基因。

1.4 參七解郁方治療雙心疾病靶點(diǎn)篩選在韋恩分析工具在線網(wǎng)站輸入?yún)⑵呓庥舴降乃幬锝M成化合物以及雙心疾病可能的有關(guān)基因，獲取其交集以得到共同作用靶點(diǎn)。

1.5 蛋白質(zhì)相互作用（protein-protein interaction，PPI）網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建以及核心靶點(diǎn)篩選將藥物成分化合物與疾病的交靶點(diǎn)輸入到String 數(shù)據(jù)庫(kù)，構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)。將PPI網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)導(dǎo)入EXCEL 表格，通過(guò)Cytoscape 3.9.0 軟件對(duì)構(gòu)建的PPI網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行可視化處理。

1.6 基因富集分析基因本體（gene ontology，GO）功能主要分為三大類，即細(xì)胞組成（cellular component，CC）、生物學(xué)過(guò)程（biological process，BP），以及分子功能（molecular function，MF）。京都基因和基因組百科全書(shū)（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）數(shù)據(jù)庫(kù)是系統(tǒng)分析基因產(chǎn)物在細(xì)胞中的代謝途徑以及這些基因產(chǎn)物功能的數(shù)據(jù)庫(kù)。KEGG 通路富集分析常常應(yīng)用于差異表達(dá)基因的功能注釋，了解差異表達(dá)基因的相關(guān)功能與作用通路［7］。

在DAVID 網(wǎng)站輸入?yún)⑵呓庥舴街谢钚猿煞峙c雙心疾病的共同潛在靶點(diǎn)，在KEGG富集信號(hào)通路，并且將基因本體GO 功能進(jìn)行富集分析。GO 富集分析時(shí)設(shè)定篩選閾值P＜0.05，分析細(xì)胞組成、生物學(xué)過(guò)程，以及分子功能，將每組的前10 位排名繪制成柱狀圖，進(jìn)行可視化操作。通過(guò)制作氣泡圖對(duì)排名位于前30的信號(hào)通路進(jìn)行可視化分析。

1.7 運(yùn)用分子對(duì)接技術(shù)驗(yàn)證參七解郁方活性成分與雙心疾病的潛在靶點(diǎn)選擇PPI網(wǎng)絡(luò)圖中的主要活性化合物與作用靶點(diǎn)進(jìn)行分子對(duì)接驗(yàn)證。從Pub Chem 分別獲得靶點(diǎn)蛋白以及化合物的三維立體結(jié)構(gòu)，采用Auto Dock工具對(duì)蛋白受體和配體進(jìn)行常規(guī)處理后，進(jìn)行分子對(duì)接，得到結(jié)合能， 即成分與靶點(diǎn)的結(jié)合能是評(píng)價(jià)分子對(duì)接結(jié)果的重要依據(jù)，結(jié)合能越低結(jié)合就越穩(wěn)定，靶點(diǎn)與分子作用的可能性就越大。

2 結(jié)果

2.1 參七解郁方化合物、潛在靶點(diǎn)以及疾病靶點(diǎn)預(yù)測(cè)結(jié)果TCMSP 檢索到參七解郁方中289 個(gè)化合物，TCMID 檢索到參七解郁方中16 個(gè)化合物，總計(jì)305 個(gè)。其中沒(méi)有預(yù)測(cè)到靶點(diǎn)為合歡花中有3 個(gè)化學(xué)成分與珍珠母中有9 個(gè)化學(xué)成分。Gen Cards 數(shù)據(jù)庫(kù)中檢索到冠心病靶點(diǎn)1 924 個(gè)，焦慮抑郁靶點(diǎn)1 279個(gè)。通過(guò)韋恩在線工具分析參七解郁方、冠心病、焦慮抑郁的可能靶點(diǎn)，獲得共有交集92個(gè)靶點(diǎn)，得到參七解郁方治療雙心疾病的潛在共有靶點(diǎn)。韋恩圖見(jiàn)圖1。

圖1 參七解郁方與雙心疾病靶點(diǎn)的韋恩圖

2.2 參七解郁方治療雙心疾病共有靶點(diǎn)的PPI 網(wǎng)絡(luò)結(jié)果由圖2 可知，將參七解郁方治療雙心疾病的交集靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING 平臺(tái)，繪制PPI網(wǎng)絡(luò)圖。將置信度得分設(shè)置為0.7，除MT-ND6、DYRK1A、KCNMA1、CHRM2、CLDN4 等蛋白與其他蛋白之間沒(méi)有形成互作關(guān)系被排除，該網(wǎng)絡(luò)包含80 個(gè)節(jié)點(diǎn)及240條邊，平均度值（degree）為6，平均局部聚類系數(shù)為0.453，P＜1.0×10-16，提示與隨機(jī)相似靶點(diǎn)對(duì)比，此組相互作用靶點(diǎn)的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。評(píng)價(jià)參數(shù)設(shè)定為節(jié)點(diǎn)度值，在PPI網(wǎng)絡(luò)內(nèi)，隨著其靶點(diǎn)度值的增加，發(fā)揮的生物學(xué)作用可能更大。該網(wǎng)絡(luò)節(jié)點(diǎn)的大小與度值成正比，而且度值由小到大亦決定網(wǎng)絡(luò)節(jié)點(diǎn)顏色由淺到深。

圖2 參七解郁方治療雙心疾病靶點(diǎn)的PPI網(wǎng)絡(luò)圖

如圖3 所示，靶點(diǎn)度值排名前10 位的依次為信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄活化因子（STAT3）、絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶1（AKT1）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、腫瘤壞死因子（TNF）、絲裂原活化蛋白激酶（MAPK1）、白細(xì)胞介素-10（IL-10）、腫瘤蛋白p53 基因（TP53）、c-fos 原癌基因蛋白（FOS）、雌激素受體α（ESR1）、白細(xì)胞介素-4（IL-4），提示這些靶點(diǎn)是參七解郁方發(fā)揮治療作用的潛在關(guān)鍵靶點(diǎn)。

圖3 參七解郁方治療雙心疾病關(guān)鍵靶點(diǎn)信息

2.3 GO 生物功能注釋及 KEGG 通路富集將80個(gè)靶點(diǎn)輸入DAVID 網(wǎng)站進(jìn)行富集，進(jìn)行GO 功能富集分析，每組篩選條件設(shè)定為P＜0.05，得到細(xì)胞組成相關(guān)條目34 條，生物過(guò)程相關(guān)條目335 條，分子功能相關(guān)條目48 條，每組選取排名前10 位的條目進(jìn)行可視化。

將參七解郁方干預(yù)雙心疾病的靶點(diǎn)導(dǎo)入David在線工具富集KEGG通路，獲得條目106條，其中P＜0.05 的條目100 條，去除與雙心疾病明顯無(wú)關(guān)通路，如瘧疾、肺結(jié)核、阿米巴病、弓形蟲(chóng)病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、利什曼病、百日咳等，選取P＜0.05 且與雙心疾病相關(guān)的前30條繪制成氣泡圖，見(jiàn)圖4。

圖4 參七解郁方治療雙心疾病靶點(diǎn)KEGG信號(hào)通路分析

80 個(gè)基因中有67 個(gè)基因參與了前30 條通路的富集，涉及的信號(hào)通路包括低氧誘導(dǎo)因子-1 信號(hào)通路（HIF-1 signaling pathway）、腫瘤壞死因子信號(hào)通路（TNF signaling pathway）、磷脂酰肌醇3 激酶/絲氨酸蘇氨酸蛋白激酶信號(hào)通路（PI3K-AKT signaling pathway）、T 細(xì)胞受體信號(hào)通路（T cell receptor signaling pathway、叉頭框轉(zhuǎn)錄因子O 亞族信號(hào)通路（FoxO signaling pathway）、絲裂原活化蛋白激酶信號(hào)通路（MAPK signaling pathway）等通路，提示參七解郁方對(duì)于雙心疾病的治療可能通過(guò)多條信號(hào)通路以及作用多個(gè)作用靶點(diǎn)起作用。

2.4 藥物化合物-潛在靶點(diǎn)-信號(hào)通路網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建選擇KEGG 富集中的與雙心疾病相關(guān)的前30 條通路所包含的靶點(diǎn)以及靶點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的化合物構(gòu)建化合物-靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)，見(jiàn)圖5。此網(wǎng)絡(luò)包含了節(jié)點(diǎn)175個(gè)，邊線535 條，以度值為標(biāo)準(zhǔn)，參七解郁方活性化合物節(jié)點(diǎn)度值的中位數(shù)為4，涉及的活性成分有89個(gè)，如表1 所示，主要在前30 條信號(hào)通路中發(fā)揮作用，可能通過(guò)作用于56個(gè)靶點(diǎn)。

圖5 參七解郁方治療雙心疾病的成分-靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)

表1 參七解郁方的活性成分信息

參七解郁方中度值大于5 的化合物共12 個(gè)，分別為槲皮素、木樨草素、山柰酚、柑橘素、二氫丹參內(nèi)酯、丹參酮ⅡA、丹參新醌D、異丹參酮Ⅱ、異鼠李素、3'，5'-二甲氧基聯(lián)苯-4-醇、隱丹參酮、β 谷甾醇，表明參七解郁方可能通過(guò)多成分、多靶點(diǎn)、多通路治療雙心疾病。

2.5 分子對(duì)接結(jié)果將度值大于5的前7 個(gè)活性成分的分子配體與前5個(gè)靶點(diǎn)STAT3、AKT1、IL-6、TNF、MAPK1 進(jìn)行對(duì)接，表2為對(duì)接靶點(diǎn)與活性成分的結(jié)合能數(shù)據(jù)，活性成分與靶點(diǎn)的分子對(duì)接顯示對(duì)接能力均較好。參七解郁方活性成分與靶點(diǎn)的分子對(duì)接模式圖見(jiàn)圖6。

圖6 參七解郁方活性成分與靶點(diǎn)的分子對(duì)接模式圖:A為STAT3與木犀草素結(jié)合；B為AKT1與丹參酮ⅡA結(jié)合；C為IL6與異丹參酮Ⅱ結(jié)合；D為TNF與山柰酚結(jié)合；E為TNF與柑橘素結(jié)合；F為MAPK1與異丹參酮Ⅱ結(jié)合

表2 活性成分與靶點(diǎn)的分子對(duì)接結(jié)果

3 討論

胡大一教授在我國(guó)最早提出“雙心醫(yī)學(xué)”理論，指心血管疾病可導(dǎo)致精神情緒障礙，相反精神情緒障礙又會(huì)加重原發(fā)疾病，疾病之間相互作用，導(dǎo)致疾病加重，病人痛苦不堪，有循證醫(yī)學(xué)研究表明也證實(shí)了這個(gè)結(jié)果［8］。冠心病中醫(yī)學(xué)歸為“胸痹”“心痛”“真心痛”等，“焦慮抑郁”歸為“郁證”，兩者雖然分屬不同疾病，但病位均為心，并與肝、脾、腎三臟均有密切聯(lián)系。如《靈樞》所云：“悲哀愁憂則心動(dòng)，心動(dòng)則五臟六腑皆搖”［9］。王鳳榮教授以《千金方》的“開(kāi)心散”“定志小丸”化裁［10］，獨(dú)創(chuàng)參七解郁方，益氣化痰、安神定志。其中遠(yuǎn)志、石菖蒲具有開(kāi)竅化痰之功，與補(bǔ)氣安神之人參共用，合為君藥。正如《本草經(jīng)》中所說(shuō)此三藥共用有益氣養(yǎng)陰，定志解郁之功效。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究主要包括三個(gè)部分，一為篩選藥物活動(dòng)化學(xué)成分，二為獲取潛在的作用靶點(diǎn)，三為建構(gòu)作用網(wǎng)絡(luò)，比較適合于中藥復(fù)方多靶點(diǎn)、多途徑作用特點(diǎn)的機(jī)制研究。分子對(duì)接技術(shù)從剛性對(duì)接、半柔性對(duì)接到柔性對(duì)接，逐步闡明配體與受體的結(jié)合是一個(gè)動(dòng)態(tài)過(guò)程，即配體與受體誘導(dǎo)契合過(guò)程中發(fā)生構(gòu)象改變，最終形成形狀和能量最優(yōu)匹配的結(jié)合模式［11］。

本研究運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究方法得到參七解郁方核心藥物組合發(fā)揮作用的主要有效成分，可分為黃酮類化合物和丹參類化合物，其中黃酮類化合物包括黃酮（柑橘素和木樨草素）、黃酮醇（槲皮素、山柰酚）、類黃酮（異鼠李素），丹參類化合物包括丹參酮類（異丹參酮Ⅱ、丹參酮ⅡA、丹參新醌D、二氫丹參內(nèi)酯、隱丹參酮）和丹參酚類（β 谷甾醇）。黃酮對(duì)心腦血管有很好的保護(hù)作用，其可使體內(nèi)的膽固醇降低，使機(jī)體的血液循環(huán)得到改善，而且黃酮還有很強(qiáng)用抗氧化作用，通過(guò)清除氧自由基而起作用，從而阻止了細(xì)胞老化，可使心腦血管疾病的發(fā)病率有效降低［12］。有研究發(fā)現(xiàn)，一些具有抗焦慮抑郁的中藥中有很多含有黃酮類化合物成分［13］。槲皮素可通過(guò)多種途徑治療焦慮抑郁等神經(jīng)系統(tǒng)疾病，主要途徑包括降低炎癥因子、調(diào)節(jié)神經(jīng)突觸可塑性等［14］。有研究表明中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥因子水平升高是抑郁癥的重要表現(xiàn)之一，而槲皮素可以通過(guò)降低大腦內(nèi)的炎癥因子以預(yù)防小鼠的抑郁樣行為［15］。山柰酚亦有抗抑郁的治療效果，主要通過(guò)提升海馬神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的水平、抑制神經(jīng)細(xì)胞過(guò)度自噬等途徑發(fā)揮作用［16］。木犀草素能夠使細(xì)胞凋亡水平降低并使細(xì)胞活力得到增強(qiáng)，其主要通過(guò)抑制MMP9及使PI3K/AKT 信號(hào)通路激活而實(shí)現(xiàn)的［17］，從而達(dá)到抑制凋亡、抗炎、改善動(dòng)脈粥樣硬化等作用。丹參作為經(jīng)典的傳統(tǒng)中草藥，具有祛瘀止痛、活血通經(jīng)的作用，而且還具有清心除煩的療效，在雙心疾病的治療方面效果可靠［18-19］。丹參類化合物包括多種有效成分，其中丹參酮類成分含量較高，其有擴(kuò)張血管、降脂、抗氧化等作用。學(xué)者研究表明動(dòng)脈硬化大鼠血清中水平較高的ox-LDL、MDA、ROS可以通過(guò)丹參酮類化合物干預(yù)降低，SOD 水平得到提高。臨床研究表明氧化應(yīng)激會(huì)導(dǎo)致機(jī)體的氧自由基水平升高，而這也是引發(fā)焦慮抑郁狀態(tài)的精神類疾病的重要病因之一。有研究表明應(yīng)用隱丹參酮干預(yù)抑郁模型小鼠，其可使小鼠前額葉皮質(zhì)與海馬的BDNF 的表達(dá)水平得到提升，提示隱丹參酮發(fā)揮抗抑郁作用可能通過(guò)改善BDNF得到體現(xiàn)［20］。

PPI 網(wǎng)絡(luò)以及核心靶點(diǎn)顯示參七解郁方的有效成分靶點(diǎn)主要為 STAT3、AKT1、IL6、TNF、MAPK1等，且分子對(duì)接證實(shí)有效成分靶點(diǎn)與各主要成分之間具有良好的結(jié)合能力。STAT3作為調(diào)節(jié)細(xì)胞因子誘導(dǎo)的促炎和抗炎反應(yīng)的重要轉(zhuǎn)錄因子之一，可促進(jìn)與炎癥相關(guān)的基因表達(dá)，其激活可增加神經(jīng)炎癥相關(guān)的細(xì)胞因子分泌［21］。MAPK 信號(hào)傳導(dǎo)涉及多種生物過(guò)程，如組織發(fā)育、細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡等等。在動(dòng)脈粥樣硬化形成過(guò)程中，ox-LDL 和酶促修飾LDL 在巨噬細(xì)胞中誘導(dǎo)MAPK 活化，這反過(guò)來(lái)通過(guò)PPAR 介導(dǎo)的LDL 攝取受體如CD36 的上調(diào)來(lái)增強(qiáng)LDL 攝取［22-23］。此外，MAPK1 可通過(guò)調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄、翻譯、細(xì)胞骨架重排來(lái)介導(dǎo)多種生物學(xué)功能，可參與神經(jīng)發(fā)育、神經(jīng)可塑性和重度抑郁癥的基因。KEGG 通路富集結(jié)果發(fā)現(xiàn)，參七解郁方可能通過(guò)調(diào)節(jié)PI3K-AKT 信號(hào)通路、FoxO 信號(hào)通路、MAPK 信號(hào)通路、TNF 信號(hào)通路、HIF-1 信號(hào)通路等改善雙心疾病。PI3K/AKT 信號(hào)通路為重要的細(xì)胞信號(hào)通路之一，其廣泛存在于細(xì)胞中，是介導(dǎo)多種生長(zhǎng)因子促存活的重要通路，在抑郁癥及抗抑郁藥物作用機(jī)制的研究中逐漸受到關(guān)注。AKT 是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，為 PI3K下游的一個(gè)重要靶標(biāo)。AKT有AKT1、AKT2、AKT3。AKT1 是3 種亞型中為最重要的亞型，也是唯一在心臟和大腦中都富集的AKT 亞型，在冠心病及焦慮抑郁中均發(fā)揮重要的作用［24］。Fox O 家族是Fox基因家族中的一個(gè)亞族，能與DNA上的反應(yīng)元件結(jié)合，激活靶基因，參與細(xì)胞增殖、分化、代謝、凋亡等過(guò)程。PI3K/AKT 信號(hào)通路在Fox O調(diào)節(jié)過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用。

從網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析結(jié)果可見(jiàn)，參七解郁方治療雙心疾病為多成分、多靶點(diǎn)、多通路的模式。參七解郁方可能通過(guò)活性成分槲皮素、木樨草素、山柰酚、柑橘素、丹參酮ⅡA、丹參新醌D、異丹參酮Ⅱ、異鼠李素、3'，5'-二甲氧基聯(lián)苯-4-醇、隱丹參酮、二氫丹參內(nèi)酯、β 谷甾醇等與 STAT3、AKT1、IL-6、TNF、MAPK1 等蛋白結(jié)合，進(jìn)而調(diào)節(jié)TNF signaling pathway、PI3K-AKT signaling pathway、T cell receptor signaling pathway、MAPK signaling pathway 等信號(hào)通路，發(fā)揮降低炎癥反應(yīng)、凋亡，提高神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)、可塑性等的作用。

本研究通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法和分子對(duì)接技術(shù)對(duì)參七解郁方治療雙心疾病的作用靶點(diǎn)和途徑進(jìn)行預(yù)測(cè)和驗(yàn)證，研究的局限性也很明確，即未采用體內(nèi)、外實(shí)驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證預(yù)測(cè)的結(jié)果，僅僅使用分子對(duì)接驗(yàn)證方式仍是不夠深入的，還需進(jìn)行具體實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步論證與探索，這為我們今后的研究提供了新思路和新方向。