RasGRP1啟動子區甲基化對脂多糖誘導人T淋巴細胞炎癥的作用及機制*

劉磊, 劉美言, 高源1,, 閔潔煜1,, 殷永強, 鐘毅

(1.貴州醫科大學附屬醫院 麻醉科, 貴州 貴陽 550001; 2.貴州醫科大學 麻醉學院, 貴州 貴陽 550004)

膿毒癥是宿主對感染的反應失調引起的危及生命的器官功能障礙,嚴重時可發展為膿毒癥休克,甚至死亡[1]。DNA甲基化是一種重要的表觀遺傳學修飾,已有研究表明在膿毒癥診療中某些基因的甲基化修飾對患者疾病轉歸具有重要作用[2]。在膿毒癥早期炎癥階段,體內數千個基因的表達就已經發生了改變,涉及數百個基因的DNA甲基化水平也發生了改變[3-4],這些基因大多與細胞炎癥反應和干擾素(interferon,IFN)信號轉導有關,同時還能夠決定T細胞的分化方向[5-6]。Hopp等[7]在對社區獲得性肺炎患者全血樣本的分析中發現,DNA甲基化在膿毒癥的急性炎癥中起重要作用;新生兒膿毒癥患者中炎癥相關基因的甲基化水平有顯著改變,某些基因的DNA甲基化可作為生物標志物區分早期和晚期膿毒癥[8]。采用生物信息學分析篩選膿毒癥診斷和預后生物標志物[9],并結合本課題組前期研究,RAS鳥苷酸釋放蛋白1(ras guanyl nucleotide releasing protein 1,RasGRP1)在膿毒癥患者中存在表達差異且甲基化程度高。因此,本研究旨在通過由細菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)誘導淋巴細胞炎癥模型,使用甲基化轉移酶抑制劑5-Aza-2′-脫氧胞苷(5-Aza-2′-deoxycytidine)與LPS共處理,驗證RasGRP1及其甲基化修飾在LPS誘導淋巴細胞炎癥模型中的作用。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1細胞株來源 人T淋巴細胞白血病細胞JurkatE6-1(CL-0129),由武漢普諾賽生命科技有限公司提供,由學校轉化醫學研究中心保存。……