miR-595、miR-1246在潰瘍性結腸炎血清中的表達及其與腸道菌群相關性研究

孟娟娟,胡海波,閆彩文

(山西省長治市人民醫院 消化內科,046000)

潰瘍性結腸炎是一種病因尚不十分明確的結腸和直腸慢性非特異性炎癥性疾病,病變局限于大腸黏膜及黏膜下層[1]。病變多位于乙狀結腸和直腸,也可延伸至降結腸,甚至整個結腸。其病程漫長,常反復發作,可見于任何年齡,以20～30歲最為多見[2-3]。miRNA是一類長約22個核苷酸、高度保守的內源性非編碼小分子RNA。研究[4-5]表明,miRNA表達與人類潰瘍性結腸炎密切相關,其異常表達影響潰瘍性結腸炎的發生和發展。本研究旨在探討miR-595、miR-1246在潰瘍性結腸炎病人血清中的表達及其與腸道菌群的相關性。現作報道。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019 年1月至2020 年1月我院收治的潰瘍性結腸炎病人160例作為觀察組,均符合中華醫學會消化病學分會潰瘍性結腸炎協作組制定的診斷標準[6],并根據疾病活動性將病人分為活動期(aUC組)和緩解期(rUC組),各80例。其中aUC組男42例,女38例,年齡(43.62±5.21)歲;rUC組男40例,女40例,年齡(44.65±2.34)歲。排除標準:(1)納入研究前4周內服用抗生素、益生菌等藥物者;(2)嚴重心腦血管疾病者;(3)自身免疫性疾病者。同期選取我院健康體檢者158名作為對照組。各組性別、年齡均具有可比性。

1.2 方法

抽取各組靜脈血5 mL,4 ℃、3 000 r/min離心10 min,吸取上清,-80 ℃保存備用。采用實時熒光定量PCR(RT-qPCR)檢測miR-595、miR-1246表達水平,Trizol提取血清中總RNA,采用反轉錄試劑盒將總RNA合成cDNA。RT-qPCR試劑盒實時熒光定量。反應條件:95 ℃預變性5 min,95 ℃變性30 s,60 ℃退火30 s,72 ℃延伸30 s,共40個循環。miR-595上游引物:5′-GXG AAG TGT GCC GTG GT-3′,下游引物:5′-CAG TGC GTG TCG TGG AGT-3′;miR-1246上游引物:5′-ACA CTC CAG CTG GGA ATG GAT TTT TGG-3′,下游引物:5′-ACT GAC TGA TGC AAT CTC AAC TGG TGT CGT GGA-3′;U6上游引物:5′-ATT GGA ACG ATA CAG AGA AGA TT-3′,下游引物:5′-GGA ACG CTT CAC GAA TTT G-3′。相對表達量采用2-ΔΔCt法計算。……