基于介質阻擋放電低溫等離子體分析儲藏稻谷高溫脅迫下酚類代謝規律

侯帥，張祎佳，周丹丹，馬飛洋，王大鵬，趙思琪，丁超，劉強?

1 南京財經大學食品科學與工程學院/江蘇省現代糧食流通與安全協同創新中心/江蘇高校糧油質量安全控制及深加工重點實驗室，南京 210023；2 南京林業大學輕工與食品學院，南京 210037

0 引言

【研究意義】稻谷儲藏是保障糧食連續性供給和市場化運行不可或缺的重要環節，直接關系到國家的安全和社會穩定[1]。作為全球最大的稻谷消費國，我國稻谷年產量現已超2 億噸，占全球總產量超過30%。根據稻谷安全儲藏嚴格需求，新鮮稻谷必須經過穩定化處理才可進入儲備糧倉進行儲藏[2]。但受到高溫等外界環境影響，每年因儲藏方式不當引起的霉變和黃變等糧食產后損失高達2 500 萬噸[3]。稻谷作為熱敏感型食品原材料，即使在高溫（35 ℃）脅迫下短暫儲藏7 d 左右，加工出的大米色澤顯著變黃，黃粒米比重嚴重超標。因此，如何提高稻谷產后儲藏穩定性，確保加工稻米的商業價值，對促進糧食產后減損至關重要。【前人研究進展】研究表明，偏高水分稻谷在高溫脅迫條件下的儲藏過程中，籽粒表觀顏色、膜脂氧化及代謝酶活性顯著變化，對應的酚類等活性物質含量受到影響，品質劣變嚴重[4]。作為代表性非熱加工技術之一，介質阻擋放電低溫等離子體技術（DBD-CP）可以利用周圍介質產生光電子、離子和自由基等活性物質[5]，對樣品內部代謝途徑產生作用的同時，可在非熱環境下最大程度保留樣品的營養因子。現階段，該技術現被證實在食品貯藏保鮮方面有積極作用[6]。例如，DBD-CP 處理能有效保持樣品中抗壞血酸、酚類、黃酮類以及香氣等相關活性成分的穩定性，類似研究已在草莓果實[7]、枸杞[8]和NFC 果汁[9]中被報道，但關于該技術在稻谷等谷物類品質穩定化方面有待進一步研究。酚類和黃酮類化合物作為稻谷中重要的次級代謝產物，具有消除體內自由基、緩解膜脂氧化等功能特性，對提升環境脅迫下儲藏稻谷穩定性至關重要[10]。當前，稻谷籽粒內部酚類物質合成主要通過苯丙烷代謝途徑。在該途徑中，苯丙氨酸先后經苯丙氨酸解氨酶（PAL）、肉桂酸-4-羥化酶（C4H）和查爾酮合成酶（CHS）等關鍵限速酶的催化，形成一系列苯基酚類和黃酮類化合物[11]。類似研究也證實，經DBD-CP 處理后可以誘導草莓果實內部苯丙烷代謝途徑，顯著提升果實內部花色苷類物質合成關鍵酶的活性，從而促進花色苷類物質的合成與積累，證實了DBD-CP 處理可作為提高采后果實活性物質含量的有效途徑[12]。【本研究切入點】當前儲藏稻谷黃變與酚類物質的代謝關聯已被證實，但基于儲藏稻谷對處理溫度的敏感特性，如何調控儲藏稻谷特性代謝以提高儲藏穩定性有待進一步研究，特別是針對偏高水分稻谷儲藏過程中黃變這一典型特征，利用非熱處理能否實現其儲藏穩定性提高以及酚類代謝調控的機理尚未闡明。【擬解決的關鍵問題】本研究以偏高水分稻谷為研究對象，探究DBD-CP 處理對儲藏稻谷理化指標、活性物質含量及DPPH、ABTS、FARP 等抗氧化能力的影響，闡明DBD-CP 調控儲藏稻谷品質劣變發展的機理，為偏高水分糧食應急化處理提供理論依據和技術支持。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

稻谷樣品：南粳9108（粳稻），2022 年11 月產自南京六合祝玉三家庭農場，攤曬后運送至實驗室4℃儲藏，對應初始水分16%（濕基）。

碳酸鈉（分析純，南京壽德生物科技有限公司）；乙醇、鹽酸、甲醇、冰乙酸（分析純，南京化學試劑股份有限公司）；亞硝酸鈉、醋酸鈉（分析純，上海麥克林生化科技有限公司）；六水合氯化鋁、氫氧化鈉（分析純，國藥集團化學試劑有限公司）；TPTZ（2,4,6-三吡啶基三嗪）、ABTS（2,2′-聯氮-雙（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸））、福林酚、過硫酸鉀、三氯化鐵以及沒食子酸、兒茶素標準品（上海源葉生物科技有限公司）；超氧陰離子含量檢測試劑盒（北京索萊寶生物科技有限公司）；丙二醛測定試劑盒、過氧化氫測定試劑盒（南京建成生物有限公司）；苯丙氨酸解氨酶、肉桂酸-4-羥化酶、查爾酮合酶測定試劑盒（上海酶聯生物科技有限公司）。

1.2 儀器與設備

ST-110A 水分測定儀（廈門易仕特儀器有限公司）；RDN 型人工氣候箱（寧波東南儀器有限公司）；BLH-3250 礱谷機（浙江伯利恒儀器設備公司）；BLH-3110 型精米機（上海嘉定糧油儀器有限公司）；高速萬能粉碎機（天津市泰斯特儀器有限公司）；液氮研磨機（天津市泰斯特儀器有限公司）；XHF-DY高速分散器（寧波新芝生物科技股份有限公司）；TG16WS 高速離心機（長沙湘智離心機儀器有限公司）；旋轉蒸發儀（南京萊福瑞斯有限公司）；CM-5美能達分光測色儀（日本柯尼卡美能達）；HH-4 數顯恒溫水浴鍋（國華電器有限公司）；紫外-可見分光光度計（日本日立高新技術公司）；介質阻擋放電低溫等離子體設備（益潤等離子技術有限公司）。

1.3 試驗方法

1.3.1 樣品處理 樣本經過除雜后，每組分成50 g，用于DBD-CP 處理。處理參數參照文獻報道[13]，處理電壓為60 kV，處理時間為10 min，極板間距離為65 mm，以未處理的稻谷為對照。處理后，所有樣品放置在溫度（35.0±1.0）℃、相對濕度（55±5）%的人工氣候箱中模擬高溫脅迫儲藏，試驗處理共計2.8 kg 樣品，分別于第0、10、20、30、40、50 和60 天取樣，單次取樣數量400 g。取出后，立即將樣品放入液氮中冷凍并于-80 ℃下儲存，直至酶活性的評估完成，每個分析設置3 個重復。

1.3.2 顏色測定 稻谷樣本在經過脫殼后制成糙米用于顏色分析，采用美能達CR400 分光光度計反射模式進行L*、a*和b*值測定。L*值代表亮度值，a*值為紅綠值，b*值為黃藍值，并根據YAN 等[14]提出的黃變指數（YI）值確定糙米表面顏色向黃色偏移的程度，通過以下公式進行計算：

1.3.3 游離酚的提取 參照ZHANG 等[15]的方法，并稍作改動，稻谷在經過礱谷后液氮研磨成粉，準確稱取2 g 米粉與50 mL 預冷的酸性甲醇溶液混合，機械勻漿5 min，然后4 000 r/min 離心10 min，收集上清液，剩余沉淀用50 mL 預冷的酸性甲醇再提取一次，合并兩次上清液，45 ℃旋蒸至干燥，用甲醇定容至10 mL，得游離酚提取液，在-20 ℃條件下保存，提取重復3 次。

1.3.4 結合酚的提取 參照李青等[16]的方法，并略作改動。向提取游離酚后的沉淀物中加入40 mL 2 mol·L-1NaOH 溶液在室溫下消化1 h，同時充入氮氣震蕩。然后用6 mol·L-1鹽酸調節pH 至1，加入100 mL正己烷萃取混合物中的脂質，剩余混合物用100 mL乙酸乙酯重復萃取5 次，將乙酸乙酯部分合并蒸發至干，用甲醇定容至10 mL，得結合酚提取液，在-20 ℃條件下保存，提取重復3 次。

1.3.5 總酚含量的測定 總酚含量的測定參照SINGLETON 等[17]的方法，并稍作改動。將0.125 mL提取液與0.5 mL 去離子水和 0.125 mL 福林酚試劑混勻，反應6 min，然后分別移取1.25 mL 7% Na2CO3溶液和1 mL 去離子水，混勻后反應90 min，測定760 nm 波長下吸光值。以甲醇作空白對照，以沒食子酸為標準品制作標準曲線。游離態和結合態酚類物質之和用于表示總酚含量。總酚含量以每100 g 稻谷干基中所含沒食子酸當量（mg GAE/100 g DW）表示，測定重復3 次。

1.3.6 總黃酮含量的測定 總黃酮含量的測定參照JIA 等[18]的方法，并稍作改動。將0.3 mL 提取液與1.5 mL 去離子水和0.09 mL 5% NaNO2溶液混勻，反應6 min。然后移取0.18 mL 10% AlCl3·6H2O 溶液，混勻，反應5 min。再移取0.6 mL 1 mol·L-1NaOH 溶液和0.3 mL 去離子水，混勻，測定510 nm 波長下的吸光值。以甲醇作空白對照，以兒茶素為標準品制作標準曲線。總黃酮含量以每100 g 稻谷干基中所含兒茶素當量（mg CE/100 g DW）表示，測定重復3 次。

1.3.7 FRAP 抗氧化能力測定 FRAP 抗氧化能力參考BENZIE 等[19]的方法，并稍作改動。將30 μL 提取液與90 μL 去離子水和900 μL FRAP 反應液混勻，反應30 min，于593 nm 處測定樣品的吸光度。以甲醇作為空白，以Trolox 當量為標準品繪制標準曲線。結果以干基每100 g 稻谷中所含Trolox 當量（mg Trolox equivalents/100 g dry weight）表示，簡寫為 mg TE/100 g DW。測定重復3 次。

1.3.8 ABTS+自由基清除能力測定 ABTS+自由基清除能力測定參考滕慧等[20]的方法，并稍作改動。將50 μL 提取液與1 mL ABTS+反應液混勻，反應30 min，在734 nm 處測定樣品的吸光度。以甲醇作為空白對照，以Trolox 當量為標準品繪制標準曲線。結果以干基每100 g 稻谷中所含Trolox 當量表示（mg TE/100 g DW）。測定重復3 次。

1.3.9 DPPH 自由基清除能力測定 DPPH 自由基清除能力測定參照HUANG 等[21]的方法，并稍作改動。將100 μL 提取液與3 mL 0.1 mmol·L-1DPPH 溶液混合，反應30 min。用紫外可見分光光度計在515 nm處測定樣品的吸光度，以甲醇作為空白對照。按公式計算清除率：

式中，Ac：空白的吸光度；As：樣品的吸光度。

H2O2含量測定：稻谷在經過礱谷后液氮研磨成粉，取1 g 糙米粉與9 mL 生理鹽水混合后機械勻漿，然后10 000 r/min 離心10 min，取上清液待測，H2O2含量采用南京建成生物工程研究所的H2O2試劑盒進行測定，單位為μmol·g-1。

1.3.11 苯丙氨酸解氨酶、肉桂酸-4-羥化酶及查爾酮合酶活力的測定 苯丙氨酸解氨酶、肉桂酸-4-羥化酶及查爾酮合酶活力的測定：稻谷在經過礱谷后液氮研磨成粉，準確稱取1 g 糙米粉，置于離心管中，加入9 mL PBS（pH 7.4）進行機械勻漿，然后3 000 r/min 離心20 min，取上清液待測，酶活力測定采用上海酶聯生物科技有限公司的酶活性試劑盒進行，單位為U·g-1。

1.4 統計分析方法

所有試驗重復3 次，用Microsoft Excel 2016 對數據進行統計和簡單分析，數據相關性采用Correlation Plot 插件進行分析。利用SPSS 22.0 進行方差分析，采用單因素ANOVA 檢驗進行差異性分析，當P＜0.05時，表示樣品間差異性顯著；當P＜0.01 時，表示樣品間差異極顯著。利用Origin 2022 以及Excel 2016 軟件繪圖。

2 結果

2.1 DBD-CP 處理對儲藏過程中稻谷籽粒表觀顏色的影響

偏高水分稻谷在高溫脅迫下儲藏時，隨著儲藏時間的延長，糙米的L*值呈現逐漸下降的趨勢（圖1-A），對照組L*值在儲藏后期下降速率逐漸加快，在60 d時L*下降為（52.50±0.19）；而處理組下降趨勢相對緩慢，在60 d 時L*下降為（54.11±0.12），極顯著高于對照組（P＜0.01）。a*在儲藏過程中呈現逐漸增加的趨勢，對照組a*值在40 d 時上升，為原始樣本的1.14倍。DBD-CP 處理組樣本a*低于對照組，隨著儲藏時間的延長，差距先增大后減小，在40 d 時差距達到最大值，相比于對照組a*值減少了8.8%（圖1-B）。b*值在儲藏過程也逐漸增加，處理組與對照組在第10—30 天表現出顯著性差異（P＜0.05），處理延緩了b*的增加（圖1-C）。隨著儲藏時間的延長，稻谷黃變指數（YI）值不斷上升，在第60 天時，對照組YI 值達到（68.29±0.11），DBD-CP 處理組YI 值隨著儲藏時間的延長，與對照組的差距逐漸增加，在60 d時YI 值僅為（66.29±0.24），表明DBD-CP 可以較好地延緩稻谷黃變的發生。

圖1 DBD-CP 處理對儲藏過程中稻谷表觀顏色的影響Fig. 1 The effect of DBD-CP treatment on the apparent color of rice during storage

2.2 DBD-CP 處理對總酚、總黃酮含量的影響

由圖2-A 可知，對照組總酚含量隨著貯藏時間的延長先上升后下降，在儲藏40 d 時達到最大值，含量約為161.61 mg GAE/100 g DW，在60 d 時含量下降為144.52 mg GAE/100 g DW。處理組總酚含量變化也呈現類似的趨勢，與對照組相比，處理組稻谷中總酚含量在儲藏過程中均顯著高于對照組（P＜0.05）。總黃酮含量與總酚含量變化趨勢類似，隨著儲藏時間的延長而先上升后下降，在儲藏第40 天時，對照組稻谷中總黃酮的含量達到最大值，含量約為202.11 mg CE/100 g DW。處理組稻谷中總黃酮含量顯著高于對照組（P＜0.05），且隨著儲藏時間的延長，差值先增加后減少，在40 d 時差值最大，總黃酮含量為對照組的1.2 倍（圖2-B），表明DBD-CP處理能夠顯著提高儲藏稻谷中的總酚、總黃酮含量。

圖2 DBD-CP 處理對儲藏過程中稻谷總酚、總黃酮含量的影響Fig. 2 Effect of DBD-CP treatment on the content of total phenols and total flavonoids of rice during storage

2.3 DBD-CP 處理對稻谷抗氧化能力的影響

在儲藏過程中，對照組ABTS+自由基清除能力先升高后降低，在50 d 時達到最大值；處理組ABTS+自由基清除能力隨著儲藏時間的延長具有波動性，呈現先下降后上升再下降的趨勢，儲藏初期含量為對照組的1.1 倍，在整個儲藏期間分別在10、20 和40 d與對照組存在顯著差異（P＜0.01）（圖3-A）。稻谷鐵離子還原能力以及DPPH 自由基清除能力隨著儲藏時間的變化趨勢與ABTS+自由基清除能力變化趨勢相似，在多個儲藏時間節點存在顯著性差異（P＜0.05）（圖3-B、C），表明DBD-CP 處理能夠提高稻谷的抗氧化特性。

圖3 DBD-CP 處理對儲藏過程中稻谷抗氧化性的影響Fig. 3 Effect of DBD-CP treatment on the oxidation resistance of rice during storage

2.4 DBD-CP 處理對稻谷中活性氧含量的影響

稻谷儲藏期間過氧化氫含量呈現先上升后下降的趨勢，在20 d 時達到最大值，30 d 時開始緩慢下降。整個儲藏周期內，處理組稻谷籽粒中H2O2含量均低于對照組。其中，在儲藏30 d 時，籽粒內部的H2O2含量已呈現極顯著差異（P＜0.01）（圖4-A）。稻谷儲藏過程中的含量與過氧化氫含量呈相同的變化趨勢（圖4-B），儲存20 d 后，未處理稻谷的含量約是處理組的2 倍，表明DBD-CP 處理能夠清除稻谷中活性氧。

圖4 DBD-CP 處理對儲藏過程中稻谷活性氧含量的影響Fig. 4 Effect of DBD-CP treatment on active oxygen content in rice grain during storage

2.5 DBD-CP 處理對稻谷中MDA 含量的影響

處理組稻谷和未處理稻谷的MDA 含量在整個儲藏期間先上升后下降，且DBD-CP 處理組稻谷的MDA含量始終低于未處理組。儲藏20 d 后，對照組和處理組稻谷的MDA 含量分別為51.65 和40.351 nmol·g-1，對照組中MDA 含量的增幅比DBD-CP 處理組高20.6%（圖5），表明DBD-CP 處理能夠抑制MDA 含量的增加。

圖5 DBD-CP 處理對稻谷丙二醛含量的影響Fig. 5 Effect of DBD-CP treatment on MDA content in rice

2.6 DBD-CP 處理對稻谷中苯丙烷代謝關鍵酶活性的影響

在儲藏期間，對照組PAL 活性均呈先增加后下降的趨勢，在20 d 達到最大值，DBD-CP 處理組PAL活性也呈現類似的趨勢，且在儲藏過程中始終顯著高于對照組（P＜0.01）；在30 d 時，DBD-CP 處理組稻谷PAL 活性為0.15 U·g-1，是對照組的2.28 倍，表明DBD-CP 處理能夠迅速提高稻谷PAL 活性，且在儲藏期間一直具有促進作用（圖6-A）。與PAL 類似，稻谷C4H 和CHS 活性在儲藏期間也呈現先增加后下降的趨勢，DBD-CP 處理組稻谷的C4H 和CHS 活性在儲藏期間具有波動性，先下降后上升再下降，且一直顯著高于對照組（P＜0.01）。在儲藏結束時，DBD-CP 處理組稻谷的C4H 和CHS 活性分別為0.13和6 240.95 U·g-1，分別為對照組的1.62 和1.87 倍，表明DBD-CP 處理可提高儲藏期間的C4H 和CHS 活性（圖6-B、C）。

圖6 DBD-CP 處理對稻谷中苯丙烷代謝關鍵酶活性的影響Fig. 6 Effect of DBD-CP treatment on the activities of key enzymes involved in phenylpropanoid metabolism in rice

2.7 相關性分析

在上述指標分析基礎上，進一步對DBD-CP 處理稻谷苯丙烷代謝與酚類物質的關聯特性進行數據分析，關聯熱圖結果表明，儲藏稻谷中酚類物質含量與苯丙烷代謝關鍵酶的活性呈高度正相關（圖7）。總黃酮與PAL 酶活性含量（P＜0.05、R2=0.7）、C4H（P＜0.05、R2=0.71）和CHS（P＜0.05、R2=0.7）呈正相關，總酚與總黃酮（P＜0.05、R2=0.75）之間也存在顯著的相關性。根據皮爾遜相關系數，過氧化氫含量和含量與DPPH、ABTS 和FRAP 具有一定的負相關性，說明酚類物質具有清除ROS 的作用，而清除ROS 有助于減少細胞膜損傷。由此推測，DBD-CP處理可能是通過激活苯丙烷代謝促進酚類合成代謝和加強抗氧化系統避免膜質過氧化，進而延緩稻谷品質劣變。

圖7 DBD-CP 處理稻谷苯丙烷代謝與酚類物質的相關性分析Fig. 7 Correlation analysis between phenylpropanoid metabolism and phenolic compounds in rice treated with DBD-CP

3 討論

3.1 DBD-CP 處理提高了儲藏稻谷表觀顏色穩定性

受到高溫脅迫時，隨著儲藏時間延長，稻谷黃變程度逐漸加重，對應的稻米凝膠也失去了原有的亮白色與半透明狀態[22]。本研究結果表明，在35 ℃條件下儲藏10 d 后，對應的YI 指數呈現顯著上升。類似研究報道也指出，儲藏稻谷發生黃變后，碾出的大米糊化特性、流變特性以及蒸煮特性均呈現不同程度劣變，嚴重影響其食用價值[23]。溫度越高，稻谷呼吸作用越強，黃化現象越容易發生[24]；另一方面，儲藏過程中稻谷籽粒內部脂質氧化增強，會進一步加劇籽粒黃變的現象[25]。在本研究中，DBD-CP 技術在儲藏期間改善了稻谷品質，提高了儲藏過程中苯丙烷代謝關鍵酶活性和酚類物質的合成。DBD-CP 處理對a*值沒有顯著影響，但顯著提高了L*值，降低了b*值和YI 值[11]。從表觀特征來看，DBD-CP 技術可被視為儲藏稻谷采后黃變阻抑的有效方法，處理后的樣品在高溫脅迫下的儲藏穩定性得到有效提升。

3.2 DBD-CP 處理抑制了儲藏稻谷中活性氧以及MDA含量的激增

在應對外界脅迫時，植物果實組織內部會加速ROS 代謝與積累，但ROS 含量過多會對組織細胞造成持續損傷。當植物種子萌發迅速或儲藏受到脅迫時，其體內的電子流處于高能狀態，并與氧粒子結合形成大量的ROS，產生“氧化爆發”現象，進而導致蛋白質、膜脂質和細胞損傷。過氧化氫和作為植物種子中兩種重要的ROS，早期ROS 的激增是植物氧化應激的標志[26]。本研究中，高溫脅迫下儲藏前20 d 內，未處理樣本籽粒內部ROS（和H2O2）含量持續激增。然而，在經DBD-CP 處理后儲藏，“氧化爆發”現象得到明顯抑制，對應的H2O2和含量顯著降低。這可能是因為DBD-CP 處理后稻谷籽粒內部酚類物質的合成受到誘導上調，提升了儲藏過程中ROS 的清除能力[27]。與YANG 等[27]和ZHAO 等[28]研究類似，均表明可以通過誘導酚類物質合成，進而實現樣本儲藏過程中內部ROS 代謝穩定性的提升。另外，MDA 作為判斷膜脂過氧化程度的重要指標，其含量的增加意味著多不飽和脂肪酸的氧化，細胞膜損傷[29]。MDA含量越高，對應的細胞膜損傷越嚴重[30]。本研究發現，高溫脅迫下儲藏稻谷中MDA 含量迅速積累，但DBD-CP 處理顯著抑制了其增長速率。在儲藏后期，MDA 含量有所下降的原因可能是由于MDA 具有不穩定性，容易發生自身聚合反應，形成更復雜的化合物，如吡喃和多聚丙二醛，或進一步被氧化生成乙酸[31]。此外，丙二醛可以與其他化合物進行縮合反應，形成各種有機化合物，如亞硫酸氫鹽等[32]。

3.3 DBD-CP 處理提高了儲藏稻谷總酚、總黃酮含量及苯丙烷代謝關鍵酶活力

為消除應對外界脅迫時產生的過量ROS，植物組織內部通常會有兩個防御ROS 的保護系統[33]。一類是酶促抗氧化系統，由抗氧化酶的活性構成，利用抗壞血酸-谷胱甘肽循環等抗氧化化合物與ROS 反應；另一類是由酚類、抗壞血酸、谷胱甘肽、類胡蘿卜素和生育酚等活性物質組成的非酶抗氧化系統[33]。稻谷中含有豐富的酚類化合物，酚類是植物體內重要的次生代謝產物，具有抗氧化活性，作為抗氧化劑和ROS清除劑，保護植物免受脅迫[34]。本研究中，DBD-CP處理促進了儲藏稻谷總酚、總黃酮的合成，誘導了儲藏稻谷籽粒內部苯丙素類和類黃酮代謝途徑，加速了籽粒內部次級代謝產物的合成與積累。類似研究也發現DBD-CP 處理通過影響苯丙素和類黃酮的途徑來增加藍莓果實內部酚類和類黃酮的含量水平[11]。抗氧化特性表明生物活性物質的總含量，如抗壞血酸、谷胱甘肽、生育酚、類胡蘿卜素和酚類化合物[35]可作為評價生物樣本狀態的關聯指標。本研究采用FRAP 法來反映稻谷提取物對鐵離子的還原能力，用DPPH 和ABTS+來評價其對自由基的清除能力，證實了經DBD-CP 處理后能顯著提高儲藏稻谷的抗氧化特性。從物質代謝角度分析發現，DBD-CP 處理后儲藏稻谷中的總酚、總黃酮等次級代謝產物含量顯著提升，表明關聯代謝途徑受到影響，對應籽粒內部抵御外界脅迫的能力得到提高。這可能是因為DBD-CP 處理激活苯丙烷代謝促進酚類物質合成，從而增強了對ROS的清除能力，延緩了稻谷的劣變[36-37]。結合苯丙烷代謝途徑關鍵限速酶的活性分析，DBD-CP 處理激活了苯丙烷代謝途徑中苯丙氨酸解氨酶（PAL）、肉桂酸-4 羥化酶（C4H）以及查爾酮合酶（CHS）活性的增加[38-39]，誘導了儲藏稻谷苯丙烷代謝通路的加速上調，對應的下游酚類、黃酮類等活性小分子物質積累速率得到提升，緩解了由高溫脅迫下稻谷籽粒內部ROS積累造成的膜脂損傷，從而提升了高溫脅迫下稻谷的儲藏穩定性。

4 結論

在高溫儲藏過程中，DBD-CP 處理可顯著提升儲藏稻谷的顏色穩定性，超氧陰離子、過氧化氫以及MDA 含量在儲藏20 d 時已顯著降低，新鮮且偏高水分稻谷的劣變速率顯著受到抑制；此外，在高溫脅迫儲藏期間，DBD-CP 處理樣本總酚及總黃酮含量同步顯著提升，抗氧化特性和鐵離子還原能力均呈現同步增強；經DBD-CP 處理后的PAL、C4H 和CHS 活性顯著提升，對應的苯丙烷代謝途徑得到上調；相關性分析證實高溫脅迫下偏高水分稻谷酚類物質含量與PAL、C4H 和CHS 酶活性顯著關聯，與籽粒內部活性氧以及丙二醛含量呈現負相關。因此，DBD-CP 處理可以通過激活苯丙烷代謝促進偏高水分稻谷籽粒內部酚類合成速率，加強組織抗氧化特性并緩解膜質過氧化和自由基的積累，進而延緩稻谷在高溫脅迫儲藏環境下的品質劣變。