T2DM患者血清sTWEAK、sCD40L水平與糖尿病微血管并發癥的相關性分析

尹婧婧, 竇立冬, 王 昱

(航天中心醫院老年醫學二科, 北京 100049)

2型糖尿病(Type 2 diabetes,T2DM)是指胰島素抵抗或胰島素分泌缺陷導致的一種內分泌疾病,部分病人以胰島素抵抗為主,患者機體具有產生胰島素的能力但胰島素的作用效果較差,另一部分病人以胰島素分泌缺陷為主,兩種類型的患者血糖均處于較高水平[1]。T2DM會隨著病情的發展引發多種并發癥,如:神經病變、大血管病變、眼部及組別病變等,微血管并發癥是其中較為常見的一種[2]。糖尿病微血管并發癥(Diabetic microvascular complications,DMA)是由糖尿病引起的血管病變,可累及腎臟、視網膜及神經微小血管的疾病,視網膜病變(Diabetic retinopathy,DR)及糖尿病腎病(Diabetic nephropathy,DN)是DMA在臨床上的主要表現形式,嚴重者會發展為失明或終末期腎病[3-4]。因此有效預測DMA的發生對改善T2DM患者預后具有重要意義。DMA發病機制復雜,炎癥反應在DMA的發生發展中發揮重要作用[5]。可溶性腫瘤壞死因子樣凋亡弱誘導因子(soluble Tumor nec-rosis factor like weak apoptosis inducer,sTWEAK)是TNF配體超家族的成員,具有激活炎癥反應的作用。研究發現,sTWEAK與心血管病變相關,sTWEAK異常表達表明機體存在持續的炎癥反應,增加Ⅰ型糖尿病抑郁患者心血管疾病和死亡率的風險[6]。CD40是T細胞和B細胞表面重要抗原,可溶性CD40配體(soluble CD40 ligand,sCD40L)是一種新型炎癥標志物,通過結合CD40在炎癥和免疫反應過程中發揮促進炎癥反應的作用。研究顯示,sCD40L參與腦梗死、心絞痛等多種心腦血管疾病的發生與發展,是心血管事件及心血管疾病死亡率的預測因子[7-8]。本研究探究sTWEAK、sCD40L表達水平與DMA發生的相關性,現報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象選取2021年3月-2023年3月航天中心醫院收治的150例T2DM患者為研究對象,其中男性86例,女性64例;年齡40～69歲,平均年齡(54.12±6.91)歲;體質量指數(BMI)20.2～25.6 kg/m2,平均BMI(23.10±1.28)kg/m2;病程9個月～8年,平均病程(5.13±1.35)年。納入標準:(1)參考《中國2型糖尿病防治指南》[9]診斷標準,患者均確診為T2DM;(2)患者年齡>18歲;(3)患者入院前未接受治療或未規律服用降糖藥物;(4)患者均簽署知情同意書。排除標準:(1)患有大血管病變者;(2)患有急性感染性疾病者;(4)存在心、肝、肺功能異常者;(5)患有惡性腫瘤者;(6)患有認知功能障礙者。本研究獲得醫院倫理委員會批準(倫理號:20190528-JT-07)。

1.2 方法

1.2.1 血清sTWEAK、sCD40L水平檢測 所有患者入院時采集外周靜脈血5 mL,3 200 r/min離心10 min后取上層血清,采用酶聯免疫法檢測血清sTWEAK、sCD40L水平,試劑盒均購于上海晶抗生物工程有限公司[貨號:JK-(a)-E01293;sCD40L貨號:JK-(a)-1449)],具體步驟按試劑盒說明書操作。采用酶標儀上檢測各孔450 nm波長處吸光值,根據標準品曲線計算sTWEAK、sCD40L水平。

1.2.2 DMA診斷及分組 參考《基層糖尿病微血管病變篩查與防治專家共識》[10]:患者符合下列任意一條均可診斷為DMA:(1)患者出現明顯的眼科表現,并進行眼底檢查確診為DR;(2)患者尿微量白蛋白和尿肌酐比值>30 mg/g,并出現明顯的腎臟病變;(3)患者出現的糖尿病神經病變癥狀,如:肢體麻木、疼痛等。將發生DMA的患者納入DMA組,其余納入T2DM組。

1.2.3 臨床資料收集 收集所有患者的臨床資料,包括性別、年齡、BMI、病程、吸煙史、飲酒史、合并癥(高血壓、高脂血癥、冠心病);患者入院時測量血壓,統計收縮壓、舒張壓數據;采集患者入院時外周靜脈血,測量空腹血糖(Fasting blood glucose,FBG),糖化血紅蛋白(Glycosylated hemoglobin,HbA1c),并檢測餐后2 h血糖(Postprandial blood glucose,PBG)及血脂4項。采用PUZS-300型全自動生化分析儀(上海帝博思生物科技有限公司)及配套試劑盒檢測高密度脂蛋白膽固醇(High density lipoprotein-cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(Low density lipoprotein-cholesterol,LDL-C)、膽固醇(Total cholesterol,TC)及三酰甘油(Triacylglycerol,TG)水平。

2 結果

2.1 兩組患者血清sTWEAK、sCD40L水平比較DMA組患者血清sTWEAK、sCD40L水平均高于T2DM組,差異有統計學意義(P<0.05),見表1。

表1 兩組患者血清sTWEAK、sCD40L水平的比較

2.2 兩組患者臨床資料比較150例T2DM患者中69例發生DMA,DMA發生率為46.00%;兩組患者在性別、年齡、BMI、吸煙史、飲酒史、合并癥(高血壓、高脂血癥、冠心病)、舒張壓、收縮壓、PBG、TC、TG、LDL-C及HDL-C比較,差異均無統計學意義(P>0.05);DMA組的病程、FPG及HbA1c、sTWEAK、sCD40L水平均高于T2DM組,差異有統計學意義(P<0.05),見表2。

表2 兩組患者臨床資料比較

2.3Logistic回歸分析法分析T2DM并發微血管病變的危險因素將病程、FPG及HbA1c、sTWEAK、sCD40L水平(均賦值為連續變量)作為自變量,將T2DM患者DMA的發生情況作為因變量進行賦值(發生=1,未發生=0),納入多因素Logistic模型,結果顯示,病程長、HbA1c高水平、sTWEAK高水平及sCD40L高水平均是導致T2DM并發微血管病變的獨立危險因素(P<0.05),見表3。

表3 Logistic回歸分析法分析T2DM并發微血管病變的危險因素

2.4 血清sTWEAK、sCD40L對T2DM并發微血管病變的預測價值ROC結果顯示,血清sTWEAK、sCD40L單獨及聯合檢測預測T2DM并發微血管病變的AUC(95%CI)分別為0.714(0.635～0.785)、0.744(0.666～0.812)、0.859(0.792～0.910),二者聯合用于T2DM并發微血管病變的預測效能優于各指標單獨檢測(Z=2.626、2.395,P<0.05),見表4、圖1。

圖1 血清sTWEAK、sCD40L預測T2DM并發微血管病變發生的ROC曲線圖

表4 血清sTWEAK、sCD40L對T2DM并發微血管病變的預測價值

3 討論

近年來,T2DM患者并發微血管病變病例數逐漸增多,越來越多的學者致力于探究DMA的發病機制,以期延緩病情進展。T2DM患者機體長期處于高糖狀態,血管內皮細胞壓力增加,血管內皮長期處于應激及炎癥狀態,最終造成內皮功能損傷。炎癥在血管內皮損傷中發揮重要作用,在高糖環境下白細胞分泌大量炎癥因子可誘導內皮黏附分子過度表達,進一步加重炎癥反應,同時炎癥因子刺激血管內皮細胞增殖,增加視網膜、腎臟及神經組織的血管新生,誘導DMA的發生[11-12]。國外研究指出炎癥和血管生成因子參與并加重DN的發展,在大量炎癥因子的作用下,機體微循環受損,從而導致DMA的發生[13]。基于上述背景推測sTWEAK、sCD40L可能通過炎癥反應過程參與T2DM、DMA的發生和發展,因此本研究旨在分析二者與T2DM合并DMA的關系,為臨床防止DMA提供依據。

本研究對比分析了有無發生DMA患者的血清sTWEAK、sCD40L水平,結果顯示血清sTWEAK、sCD40L在DMA組的水平高于T2DM組,提示DMA患者血清sTWEAK、sCD40L異常。分析原因為,sTWEAK其特異性受體結合后能誘導血管內皮細胞分泌大量趨化因子及炎癥因子,從而趨化單核細胞、中性粒細胞聚集于血管內皮細胞表面,激活炎癥反應,從而促進血管內皮損傷,最終誘發DMA。有報道指出,sTWEAK介導的血管炎癥反應在動脈粥樣硬化(Atherosclerosis,AS)的發生和發展過程中發揮重要調控作用[14]。sCD40L是一種跨膜蛋白,在血管炎癥反應中同樣發揮重要作用,近期研究表明,sCD40L水平于糖尿病肢體缺血新的病變及復發有關,能夠預測糖尿病肢體缺血的臨床結局[15]。當sCD40L與CD40結合后,能活化內皮細胞并釋放基質金屬合成酶,導致間質纖維增生,引起血管內皮損傷及AS,其作用機制可能與共信號分子TNF-TNFR超家族介導的炎癥反應有關[16]。另外sCD40L高水平能夠有效促進氧化應激反應,產生氧化自由基、過氧化氫等活性物質,打破促炎及抗炎因子之間的平衡,加重炎癥反應,進一步導致DMA的發生。因此DMA患者血清sTWEAK、sCD40L水平升高,且與T2DM患者DMA的發生關系密切。

本研究經Logistic分析發現,病程長、HbA1c高水平、sTWEAK高水平及sCD40L高水平均是導致T2DM并發微血管病變的獨立危險因素。T2DM患者病程越長,患者血糖長期控制不佳更易對機體造成不良影響,病情持續進展,患者發生T2DM的風險隨之增高。郝偉等[17]研究顯示,T2DM伴有AS斑塊患者的血清sTWEAK水平升高,提示sTWEAK參與糖尿病血管病變的發生。有研究指出,AS患者sCD40L水平升高,sCD40L是利于AS負荷分層的有效工具,說明sCD40L參與血管內皮病變進程[18]。Pereira-da-Silva等[19]研究表明,穩定型AS患者sCD40L水平升高,尤其是頸動脈和冠狀動脈區域。上述說明sCD40L通過介導炎癥參與血管內皮損傷,從而誘導DMA的發生。由此可知,sTWEAK、sCD40L與機體炎癥反應、AS關系密切,二者均參與DMA的發生與發展。本研究采用ROC分析sTWEAK、sCD40L對DMA預測價值,結果顯示,血清sTWEAK、sCD40L聯合預測T2DM并發微血管病變的AUC高于各項單獨檢查,提示二者聯合用于預測T2DM患者的DMA的效能較高,臨床中可對sTWEAK、sCD40L高水平的患者予以重視,合理制定血糖控制方案,有效降低DMA的發生風險。

綜上所述,血清sTWEAK、sCD40L在DMA患者中均異常升高,與DMA關系密切,sTWEAK、sCD40L聯合檢測對于T2DM并發微血管病變的預測價值較高。